目的 探討在香煙誘導(dǎo)氣道上皮細胞黏蛋白MUC5AC 表達過程中Src / JNK 信號通路的作用。方法 香煙抽提物預(yù)處理的人氣道上皮A549 細胞, 分別以活性氧( ROS) 清除劑DMTU、JNK 特異性抑制劑SP600125 及Src 激酶抑制劑PP2 干預(yù)。測定各組細胞中ROS 的含量, 采用RT-PCR、ELISA 法觀察細胞黏蛋白( MUC) 5AC轉(zhuǎn)錄水平及培養(yǎng)上清液中MUC5AC 蛋白水平的改變,以Western blot 法檢測細胞表皮生長因子受體( EGFR) 的蛋白表達。結(jié)果 細胞暴露于不同濃度的香煙抽提物中, ROS的量呈濃度遞增; ROS清除劑DMTU 顯著降低香煙所致的Src 磷酸化; Src 特異性抑制劑PP2 處理組中的JNK 磷酸化水平與對照組比較有明顯下降, MUC5AC 的表達水平也明顯降低; JNK特異性抑制劑SP600125 組中MUC5AC 的蛋白表達和基因轉(zhuǎn)錄水平較對照組均明顯降低。結(jié)論 ROS-Src-JNK信號通路可能參與A549 上皮細胞中MUC5AC 的表達調(diào)控。
目的 觀察激素抵抗型支氣管哮喘（簡稱 SR 哮喘）患者外周血維生素 D 水平，探討維生素 D 對 SR 哮喘患者 T 淋巴細胞 JNK/AP-1 和糖皮質(zhì)激素受體的影響。 方法 收集 2014 年至 2015 年期間門診和住院急性發(fā)作的哮喘患者 62 例，其中激素敏感型支氣管哮喘（簡稱 SS 哮喘）26 例，SR 哮喘 36 例；選取同期健康體檢正常者 25 例作為對照。收集入組者臨床資料，取外周靜脈血檢測 25-羥維生素 D[25-(OH)D] 水平并分離 T 淋巴細胞。T 淋巴細胞培養(yǎng)分組如下：健康對照組（A 組），SS 哮喘對照組（B 組），SR 哮喘對照組（C 組），SR 哮喘 JNK 抑制劑（SP600125）+1,25-(OH)2D3 組（D 組），SR 哮喘 JNK 抑制劑組（SP600125）（E 組），以及 SR 哮喘 1,25-(OH)2D3 組（F 組）。T 淋巴細胞共培養(yǎng) 48 h，培養(yǎng)結(jié)束后采用 Western blot 方法檢測 T 淋巴細胞中磷酸化 JNK（p-JNK）和磷酸化糖皮質(zhì)激素受體（p-GR）的表達，RT-PCR 法檢測 c-Jun mRNA 的表達。 結(jié)果 B 組和 C 組血清 25-(OH)D 水平均低于 A 組（P<0.05），且 C 組低于 B 組（P<0.05）。B 組和 C 組 T 淋巴細胞中 p-JNK 蛋白水平高于 A 組（P<0.05），且 C 組高于 B 組（P<0.05），E 組和 F 組均低于 C 組（P<0.05），D 組低于 F 組（P<0.05）。C 組 T 淋巴細胞中 p-GR 蛋白低于 A 組和 B 組（P<0.05），E 組和 F 組均高于 C 組（P<0.05），D 組高于 F 組（P<0.05）。RT-PCR 法檢測 B 組和 C 組 T 淋巴細胞中 c-Jun mRNA 水平高于 A 組（P<0.05），C 組高于 B 組（P<0.05），E 組和 F 組均低于 C 組（P<0.05），D 組低于 F 組（P<0.05）。C 組患者 25-(OH)D 水平與 p-JNK 和 c-Jun mRNA 水平呈負相關(guān)（r=–0.69，r=–0.65，P<0.05），與 p-GR 水平呈正相關(guān)（r=0.72，P<0.05）。 結(jié)論 維生素 D 缺乏在 SR 哮喘患者中患病率高。1,25-(OH)2D3 可通過抑制 SR 哮喘 T 淋巴細胞 JNK/AP-1 信號通路而促進 p-GR 的表達，這可能是維生素 D 改善 SR 哮喘患者的糖皮質(zhì)激素抵抗的機制之一。
目的 探討胃轉(zhuǎn)流手術(shù)治療肥胖合并 2 型糖尿病的機制及其與 c-Jun 氨基末端激酶（JNK）信號通路的關(guān)系。 方法 將小鼠胰島素瘤細胞根據(jù)不同的處理方式分為 4 組：完全培養(yǎng)基組（對照組）、30 mmol/L 糖培養(yǎng)基組（高糖組）、高糖+100 nmol/L 胰高血糖素樣肽-1 受體類似物艾塞那肽組（艾塞那肽組）及高糖+100 nmol/L 胰高血糖素樣肽-1 受體類似物艾塞那肽+JNK 激動劑組（JNK 激動劑組）。各組細胞按培養(yǎng)條件培養(yǎng)至第 7 天時收集細胞，采用 MTT 法檢測細胞活性，流式細胞儀檢測細胞凋亡率，Western blot 法檢測免疫球蛋白結(jié)合蛋白（Bip）、CCAAT 增強子結(jié)合蛋白同源蛋白（CHOP）、caspase-3 及 P-SAPK/JNK 蛋白的表達水平。 結(jié)果 與對照組比較，高糖組和 JNK 激動劑組的細胞活性明顯下降（P<0.05），細胞凋亡率明顯增加（P<0.01），P-SAPK/JNK 及 caspase-3 蛋白表達水平明顯增高，但 Bip 和 CHOP 蛋白表達水平僅高糖組明顯升高（P<0.01）；與高糖組比較，艾塞那肽組的細胞活性明顯升高（P<0.05），細胞凋亡率明顯降低（P<0.01），Bip、CHOP、P-SAPK/JNK 及 caspase-3 蛋白表達水平也明顯下降（P<0.01），JNK 激動劑組的 BIP 及 CHOP 蛋白表達水平也明顯降低（P<0.01）；與艾塞那肽組比較，JNK 激動劑組的細胞活性明顯下降（P<0.05），細胞凋亡率明顯升高（P<0.01），P-SAPK/JNK 及 caspase-3 蛋白表達水平明顯升高（P<0.01）。 結(jié)論 胃轉(zhuǎn)流手術(shù)可以通過調(diào)節(jié)胰高血糖素樣肽-1 分泌增加來抑制胰島 β 細胞內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激，進而抑制 JNK 信號通路，保護胰島 β 細胞，抑制細胞凋亡，從而達到治療 2 型糖尿病的效果。