目的克隆大鼠galectin-9基因全長cDNA，構(gòu)建含大鼠galectin-9基因的重組腺病毒載體，并予以鑒定。方法從大鼠的肝臟組織中用RT-PCR的方法克隆擴(kuò)增大鼠galectin-9基因，再定向插入到帶NotⅠ和HindⅢ酶切的pDC316-GFP穿梭質(zhì)粒中，獲得穿梭質(zhì)粒pDC316-GFP-galectin-9。經(jīng)PCR、NotⅠ和HindⅢ酶切及測(cè)序鑒定后，用脂質(zhì)體將穿梭質(zhì)粒pDC316-GFP-galectin-9與腺病毒骨架質(zhì)粒pBHGlox△E1.3Cre共轉(zhuǎn)染HEK-293細(xì)胞。經(jīng)位點(diǎn)特異性重組獲得含目的基因的重組腺病毒Ad5-galectin-9，行PCR鑒定，經(jīng)HEK-293細(xì)胞擴(kuò)增及純化制備高滴度病毒液，用細(xì)胞培養(yǎng)方法測(cè)定病毒TCID50滴度。結(jié)果 PCR、酶切及測(cè)序證實(shí)穿梭質(zhì)粒構(gòu)建正確，PCR鑒定證實(shí)大鼠galectin-9基因重組腺病毒載體構(gòu)建正確，病毒的感染滴度為1.4×109 U/ml。結(jié)論成功構(gòu)建了含大鼠galectin-9基因的重組腺病毒表達(dá)載體，為進(jìn)一步研究大鼠galectin-9基因的功能奠定了基礎(chǔ)。