目的 探討前列腺素I2受體（IP）、血栓素A2受體（TP）與環(huán)氧合酶-2（COX-2）在肝移植缺血再灌注損傷中的相互作用及其機理。方法 雄性SD大鼠隨機分為3組：正常對照組（n=16）、原位肝移植組（n=32）和尼美舒利（nimesulide）干預(yù)組（n=32），分別于手術(shù)后3、6、12 和24 h取血液和肝組織標本備檢。RT-PCR檢測肝組織中IP、TP及COX-2 mRNA表達； 免疫組化法檢測COX-2在肝組織中的定位及表達； HE染色確定組織損傷程度； 檢測血清ALT和AST變化。結(jié)果 免疫組化染色結(jié)果顯示，原位肝移植組COX-2蛋白表達比正常對照組明顯增強，主要分布于匯管區(qū)肝竇內(nèi)皮細胞、肝細胞及巨噬細胞內(nèi)，尼美舒利干預(yù)組COX-2蛋白表達較原位肝移植組明顯減弱。 原位肝移植組中IP mRNA、TP mRN及COX-2 mRNA表達水平均比正常對照組明顯升高，IP/TP比值也明顯升高（P＜0.05）。 尼美舒利干預(yù)組IP mRNA和TP mRNA表達水平（術(shù)后6及12 h）比原位肝移植組明顯降低（P＜0.05），IP/TP比值手術(shù)后3、6及24 h較原位肝移植組降低（P＜0.05）； COX-2 mRNA表達水平在術(shù)后6、12及24 h低于原位肝移植組（P＜0.05）。HE染色見原位肝移植組肝損傷明顯，尼美舒利干預(yù)組肝損害較原位肝移植組明顯減輕； 血清中各時點AST和3、6及12 h的ALT在原位肝移植組明顯增高于其他2組（P＜0.05），且均在再灌注后6 h達峰值。結(jié)論 IP/TP的平衡在肝移植缺血再灌注損傷中具有重要作用，抑制COX-2的表達可通過改善IP/TP的失衡從而減輕肝移植缺血再灌注損傷。
目的通過 shRNA 干擾技術(shù)，探討靶向沉默 RNA 解旋酶 DDX46 基因?qū)κ彻荀[癌 TE-1 細胞增殖及凋亡的影響。 方法以人永生化食管鱗狀上皮細胞 Het-1A 為對照，實時定量聚合酶鏈反應(yīng)（qRT-PCR）檢測 DDX46 基因 mRNA 在 TE-1 細胞中的相對表達；DDX46 基因 RNAi 靶點序列慢病毒感染的 TE-1 細胞為實驗組，陰性對照序列慢病毒感染的TE-1細胞為對照組，進行細胞計數(shù)、克隆形成和細胞凋亡實驗；Stress and Apoptosis Signaling Antibody Array Kit 檢測 DDX46 基因靶向沉默前后信號通路關(guān)鍵分子的變化。 結(jié)果與對照組相比，靶向沉默 DDX46 基因后細胞計數(shù)顯示 TE-1 細胞生長被顯著抑制（P<0.01），克隆形成實驗顯示細胞克隆形成能力被顯著抑制（P<0.001），Annexin V-APC 單染法流式細胞儀凋亡檢測顯示細胞凋亡顯著增加（P<0.001）。PathScan® Antibody Array 檢測發(fā)現(xiàn) Akt（Ser473，phosphorylation）和 IκBα（total, N/A）表達水平顯著下降（P<0.01），Caspase-3（Asp175，cleaved）表達水平升高（P<0.05）。 結(jié)論DDX46 基因在食管鱗癌 TE-1 細胞中高表達；RNAi 靶向沉默 DDX46 基因可抑制 TE-1 細胞增殖、誘導細胞凋亡；DDX46 基因沉默可能是通過下調(diào) Akt/NF-κB 信號轉(zhuǎn)導通路，進而發(fā)揮抑制腫瘤細胞增殖、誘導細胞凋亡的作用。