【摘要】 目的 觀察吸煙COPD 模型大鼠肺組織內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)凋亡基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12( Caspase-12) 的基因和蛋白表達。方法 40 只成年雄性Wistar 大鼠隨機分為對照組、吸煙2 個月組、吸煙4 個月組及戒煙1 個月組。采用單純被動吸煙法復(fù)制大鼠COPD 模型。檢測各組大鼠第0. 3 秒用力呼氣容積與用力肺活量比值( FEV0. 3 /FVC) 和呼氣峰流速( PEF) 。逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)( RT-PCR) 檢測肺內(nèi)Caspase-12 mRNA 表達, 免疫組化、Western blot 檢測其蛋白表達, 熒光酶標(biāo)法檢測其活性。結(jié)果 大鼠吸煙2 個月后, 肺功能較對照組明顯下降( P lt;0. 05) , 肺結(jié)構(gòu)出現(xiàn)破壞; 吸煙4個月后, FEV0. 3 /FVC 顯著下降( P lt;0. 05) , 肺結(jié)構(gòu)破壞明顯; 戒煙1 個月組肺功能較吸煙4 個月組稍好轉(zhuǎn), 肺結(jié)構(gòu)破壞仍明顯( P gt;0. 05) 。與對照組比較, Caspase-12 表達及活性在吸煙2 個月大鼠模型中升高( P lt;0. 05) , 在吸煙4 個月大鼠中明顯升高( P lt;0. 05) , 在戒煙1 個月組較吸煙4 個月組稍下降但無顯著差異( P gt;0. 05) 。結(jié)論 吸煙能夠誘導(dǎo)肺內(nèi)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)凋亡基因Caspase-12 表達增加,促進COPD 的發(fā)生與發(fā)展。
目的觀察內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)凋亡基因半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(Caspase-12)在百草枯誘導(dǎo)肺纖維化模型大鼠肺組織中的表達。 方法30只Spragne-Dawley(SD)大鼠隨機分為對照組、14 d模型組和28 d模型組。采用百草枯灌胃法復(fù)制肺纖維化模型。逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測肺內(nèi)Caspase-12 mRNA表達,免疫組化檢測其蛋白表達。HE和Masson染色判斷肺組織肺泡炎及肺纖維化程度。 結(jié)果HE和Masson染色結(jié)果證實成功復(fù)制肺纖維化模型。模型組大鼠肺泡炎和肺纖維化程度較對照組嚴(yán)重(P＜0.01)。與對照組比較,Caspase-12表達在14 d模型組中明顯升高(P＜0.01),在28 d模型組中更高(P＜0.01)。 結(jié)論百草枯中毒大鼠肺內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)凋亡基因Caspase-12表達增高,提示內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激在百草枯中毒引起的肺纖維化中發(fā)揮重要作用。