視網(wǎng)膜由多類細胞組成，每類細胞都有著獨特的生物學(xué)功能。即使是同類細胞，也會因遺傳異質(zhì)性導(dǎo)致細胞功能出現(xiàn)差異。以往傳統(tǒng)的研究手段無法分辨這些差異，有些細胞由于缺乏特異性分子標(biāo)記或數(shù)量稀缺也難以定義，阻礙了人們對這些細胞的認(rèn)識及研究。隨著生物技術(shù)的發(fā)展，單細胞轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)可以獲得單個細胞轉(zhuǎn)錄組表達譜、識別細胞間異質(zhì)性、鑒別細胞亞類及稀有細胞群，揭示每個細胞的轉(zhuǎn)錄組表達譜特征和功能差異，剖析細胞的起源、功能及變異特征?？色@得與疾病相關(guān)的特征性細胞亞類及特異性差異表達基因，加深我們對疾病起因、發(fā)展的理解，也為臨床診斷及靶向治療提供幫助。
目的觀察小鼠形覺剝奪對不同類型RGC形態(tài)的影響。方法實驗研究。60只B6.Cg-Tg（Thy1-YFP）HJrs/J轉(zhuǎn)基因小鼠隨機分為形覺剝奪組及對照組，分別為28、32只。形覺剝奪組小鼠右眼通過遮蓋片進行單眼遮蓋2周作為剝奪眼，同時納入對側(cè)眼進行分析。對照組小鼠不作任何處理，取右眼作為對照眼。形覺剝奪前及形覺剝奪后2周，測量兩組小鼠屈光度及眼軸相關(guān)參數(shù)；采用免疫組織化學(xué)染色對視網(wǎng)膜上表達黃色熒光蛋白（YFP）的RGC進行三維重構(gòu)和形態(tài)分析；采用免疫熒光染色對RGC數(shù)量進行統(tǒng)計。形覺剝奪組剝奪眼及其對側(cè)眼、對照眼之間各參數(shù)比較采用單因素方差分析。結(jié)果形覺剝奪后2周，形覺剝奪組剝奪眼較對側(cè)眼和對照眼出現(xiàn)了顯著的近視改變（F=15.009，P＜0.001），同時伴有玻璃體腔深度加深（F=3.360，P=0047）、眼軸延長（F=5.011，P=0.013），但前房深度和晶狀體厚度無明顯變化（P＞0.05）。在視網(wǎng)膜后極部，形覺剝奪組剝奪眼RGC數(shù)量較對側(cè)眼、對照眼明顯減少，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（F=4.769，P=0.035）。根據(jù)樹突野形態(tài)，三維重構(gòu)的RGC可分為4種類型。4類RGC形態(tài)在形覺剝奪后均發(fā)生了改變。其中三類參與形覺信息傳遞的RGC出現(xiàn)樹突分布變豐富的改變；而參與非形覺信息傳遞的第四類RGC形態(tài)則發(fā)生了雙眼對稱性改變，表現(xiàn)為樹突節(jié)段變少、長度變長，同心圓分析發(fā)現(xiàn)其樹突分支點數(shù)目變少、長度變短。結(jié)論形覺剝奪影響了RGC形態(tài)，其中參與形覺和非形覺的RGC形態(tài)變化不同。
目的 觀察3個ND1基因G3635A突變Leber遺傳性視神經(jīng)病變（LHON）家系線粒體基因組中的突變位點，探討其分子遺傳致病機制。方法 3個家系共88名成員納入本研究。母系成員53名，非母系成員35名。分別采用標(biāo)準(zhǔn)對數(shù)視力表、佳能眼底數(shù)碼彩色照相、Humphrey 視野計、俞自萍色覺圖、德國羅蘭電生理儀對所有成員行視力、眼底、視野、色覺及視覺誘發(fā)電位檢查。其中，確診為LHON 16例，未患LHON 72名。選擇135名無血緣關(guān)系的中國溫州地區(qū)正常健康者作為對照組。抽取所有受試者外周靜脈血，提取全基因組DNA，檢測ND1基因G3635A突變位點。采用擴增產(chǎn)物片段有重疊的24對引物，檢測3個家系先證者線粒體單體型分型和基因組突變位點。結(jié)果 3個家系先證者及母系成員均發(fā)現(xiàn)ND1基因 G3635A突變位點，非母系成員和對照組受試者均未發(fā)現(xiàn)ND1基因G3635A突變位點。先證者線粒體單體型分型分別為東亞單體型N9a3、D4、R11a。先證者線粒體全基因組檢測發(fā)現(xiàn)，除ND1基因G3635A突變位點外，D-Loop區(qū)存在12個變異位點，RNA編碼區(qū)存在6個變異位點，多肽編碼區(qū)存在36個變異位點。結(jié)論 3個ND1基因G3635A突變家系先證者及母系成員均存在G3635A突變位點；G3635A突變位點是3個家系的分子遺傳致病基礎(chǔ)。
目的 觀察7個中國Leber遺傳性視神經(jīng)病變（LHON）家系的分子遺傳學(xué)特征。方法 對7個家系先證者及其母系成員和134例正常健康者進行臨床眼科檢查。除7個先證者外，還確診2例LHON患者。用24對有部分重疊的引物對受檢者線粒體DNA全序列進行擴增，雙向測序，結(jié)果與修正的劍橋參照序列進行比對，分析突變位點。計算突變位點的外顯率，分析家系的單體型。結(jié)果 7個家系先證者及其母系成員均未攜帶ND4 G11778A、ND1 G3460A和ND6 T14484C這3個常見的原發(fā)突變位點，但均攜有與LHON相關(guān)的ND1 T3394C突變位點。134位正常健康者中僅發(fā)現(xiàn)4例攜帶此突變位點。7個家系的ND1 T3394C外顯率分別為12.50%、22.22%、16.67%、6.25%、9.09%、11.11%、28.57%。根據(jù)本亞線粒體單體型系統(tǒng)進化樹分析結(jié)果，7個家系分別屬于東亞線粒體單體型M9、M9、M、D4、M、M9、M9。結(jié)論 中國LHON家系中存在ND1 T3394C突變位點，該突變位點的外顯率為6.25%~28.57%，表現(xiàn)度不一。