目的：探討蛋白酶體抑制劑——硼替佐米對初治多發(fā)性骨髓瘤的療效及對移植造血干細(xì)胞采集的影響。方法：對一例初發(fā)的中年男性多發(fā)性骨髓瘤患者使用硼替佐米+地塞米松+反應(yīng)停（VTD）的方案進(jìn)行化療，獲得緩解后采集外周血造血干細(xì)胞。結(jié)果：應(yīng)用以硼替佐米為基礎(chǔ)的方案治療3個療程后，患者即獲得完全緩解；完成4個療程化療后成功采集足夠數(shù)量的外周血造血干細(xì)胞；完成6個療程化療后，進(jìn)入維持治療，至今已完全緩解17個月。治療過程中除惡心、嘔吐外無其他明顯不良反應(yīng)。結(jié)論：硼替佐米用于初治多發(fā)性骨髓瘤有良好的治療效果，不良反應(yīng)少，不影響造血干細(xì)胞采集。
目的 制備腫瘤相關(guān)糖蛋白-72抗原（TAG-72）嵌合錨定T細(xì)胞，通過體外實驗檢測其對乳腺癌細(xì)胞的抑癌活性。方法 分離健康人外周血單個核細(xì)胞（PBMC），采用脂質(zhì)體lipofectamineTM 2000介導(dǎo)的細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)染方法，將已制備的重組真核表達(dá)載體即抗TAG-72-scFv-CD3ζ-pcDNA 3.0導(dǎo)入PBMC，以獲得TAG-72嵌合錨定T細(xì)胞，以此為轉(zhuǎn)染組；用轉(zhuǎn)染空載體pcDNA 3.0的PBMC作為對照組。將轉(zhuǎn)染組嵌合錨定T細(xì)胞和對照組PBMC細(xì)胞分別與乳腺癌細(xì)胞系MCF-7及Bcap37共培養(yǎng)，觀察兩者對乳腺癌細(xì)胞G1期的阻滯率。結(jié)果 轉(zhuǎn)染組對MCF-7細(xì)胞系的G1期阻滯率為（82.3±6.9）%，對照組為（43.4±3.9）%，2組間比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；轉(zhuǎn)染組對Bcap37細(xì)胞系的G1期阻滯率為（51.3±4.7）%，對照組為（45.6±2.5）%，2組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 TAG-72嵌合錨定T細(xì)胞可特異性地抑制TAG-72＋乳腺癌細(xì)胞的增殖，此將為乳腺癌的臨床診治提供一種有希望的途徑。
目的 探討大腸癌患者外周血CK20 mRNA的表達(dá)及其意義。 方法 用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）方法檢測42例大腸癌患者術(shù)前、術(shù)后外周血及20例大腸癌患者新鮮癌組織標(biāo)本中CK20 mRNA的表達(dá)，另以20例健康成年自愿者作對照。 結(jié)果 42例大腸癌患者外周血CK20 mRNA呈陽性表達(dá)者術(shù)前為19例（45.24%），術(shù)后為14例（33.33%）； 20例大腸癌患者新鮮癌組織中CK20 mRNA表達(dá)均為陽性。而正常對照組20例外周血CK20 mRNA表達(dá)均為陰性。且大腸癌外周血CK20 mRNA陽性表達(dá)與組織學(xué)類型無關(guān)（Pgt;0.05），但與有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肝轉(zhuǎn)移及Dukes分期有關(guān)（P＜0.05）。 結(jié)論 檢測外周血中CK20 mRNA表達(dá)將有助于大腸癌的早期診斷、預(yù)后的判斷及治療方案的制定。
目的觀察重癥急性膽管炎（ACST）患者術(shù)后外周血單核細(xì)胞(PBMC)中核因子kB（NFkB）活性的變化及其與膽道感染嚴(yán)重程度和預(yù)后的關(guān)系。 方法20例ACST患者根據(jù)其預(yù)后情況分為生存組（14例）和死亡組（6例），同時選擇胃潰瘍行大部切除術(shù)或疝修補(bǔ)術(shù)等非炎癥疾病患者10例作為對照組，分別于術(shù)后24 h取外周血, 用密度梯度離心法分離PBMC，提取核蛋白, 并用凝膠電遷移改變分析法(EMSA)測定PBMC中NFkB活性的變化, 所得結(jié)果用圖像分析儀分析并以相對光密度（ROD）表示。用酶聯(lián)免疫法（ELISA）測定血漿中TNFα、IL6和IL10含量的變化。結(jié)果ACST死亡組NFkB活性最高（5.02±1.03），生存組次之(2.98±0.51)，對照組最低(1.02±0.34)，各組間比較差異有顯著性意義（P＜0.05）。ACST死亡組血漿TNFα和IL6含量明顯增高，分別為（496.28±52.35） ng/L和（578.13±67.72） ng/L,生存組分別為（284.47±39.41） ng/L和（318.67±34.92） ng/L，對照組分別為（89.43±10.39） ng/L和（101.27±13.47） ng/L, 各組間比較差異有顯著性意義(P＜0.05)。 ACST死亡組和生存組IL10分別為（378.42±41.02） ng/L和（384.75±39.24） ng/L,均明顯高于對照組的(69.36±11.05) ng/L（P＜0.05），死亡組與生存組之間差異無顯著性意義（Pgt;0.05）。結(jié)論ACST時患者PBMC中NFkB的活性顯著增高，增高的NFkB能較好地預(yù)測膽道感染的嚴(yán)重程度及其預(yù)后。
目的探討胃癌患者外周血淋巴細(xì)胞（PBL）CD44變異體5（CD44v5）含量和瘤組織CD44v5表達(dá)情況，及其對胃癌轉(zhuǎn)移的診斷和進(jìn)展評價的意義。方法應(yīng)用流式細(xì)胞儀（FCM）檢測31例胃癌患者術(shù)前PBL CD44v5含量并與正常對照組相比較，同時采用免疫組化SABC法檢測33例胃癌組織CD44v5表達(dá)情況。結(jié)果胃癌患者術(shù)前PBL CD44v5含量較正常對照組明顯增高（P＜0.01）。有轉(zhuǎn)移的胃癌患者PBL CD44v5含量明顯高于無轉(zhuǎn)移者（P＜0.01）。術(shù)前PBL CD44v5含量與腫瘤大小、浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及病理分期呈顯著的正相關(guān)（r=0.486，P＜0.05）。正常胃粘膜無CD44v5表達(dá)，胃癌組織CD44v5表達(dá)陽性率為69.7%，其表達(dá)與腫瘤浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在顯著相關(guān)性。胃癌原發(fā)灶CD44v5表達(dá)陽性者其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽性率顯著高于陰性者。結(jié)論CD44v5有望作為監(jiān)測胃癌轉(zhuǎn)移的生物學(xué)指標(biāo)。應(yīng)用FCM定量檢測胃癌患者術(shù)前外周血CD44v5含量，對胃癌轉(zhuǎn)移的診斷和進(jìn)展的評價可能具有重要的臨床意義。
嚴(yán)重感染及感染性休克是全身性感染( sepsis) 導(dǎo)致的以器官功能損害為特征的復(fù)雜臨床綜合征, 在ICU患者的發(fā)病率高達(dá)25% [1] 。近年來, 盡管抗感染治療及器官功能支持技術(shù)取得了長足的進(jìn)步, 但嚴(yán)重感染的病死率仍高達(dá)30% ～70% [2] 。嚴(yán)重感染的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜, 免疫功能的紊亂參與嚴(yán)重感染的發(fā)生與發(fā)展。樹突狀細(xì)胞( DCs) 在啟動機(jī)體免疫應(yīng)答中發(fā)揮關(guān)鍵性作用。近年研究顯示, 嚴(yán)重感染患者外周血DCs 數(shù)量及功能呈現(xiàn)明顯動態(tài)改變, 并與病情嚴(yán)重程度及預(yù)后相關(guān)。因此監(jiān)測嚴(yán)重感染的危重病患者外周血DCs改變具有重要的臨床意義。
目的 探討基因芯片技術(shù)在心血管外科臨床及科研中的應(yīng)用價值，應(yīng)用表達(dá)譜基因芯片篩選體外循環(huán)（CPB）前后外周血單個核細(xì)胞（PBMC）的差異表達(dá)基因，為CPB炎性反應(yīng)的研究提供線索。 方法 CPB開始、CPB結(jié)束即刻抽取患者動脈血，分離PBMC，用BD AtlasTM cDNA Expression Arrays表達(dá)譜基因芯片對比細(xì)胞因子的差異表達(dá)，應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）對結(jié)果進(jìn)行驗證。 結(jié)果 將基因芯片技術(shù)成功應(yīng)用于CPB研究，并得到CPB前后PBMC細(xì)胞因子基因表達(dá)譜，其中白細(xì)胞介素-6(IL-6)和Wnt5a差異表達(dá)較明顯，但半定量RT-PCR驗證結(jié)果未發(fā)現(xiàn)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.888，0.135)。 結(jié)論 基因芯片技術(shù)在CPB后細(xì)胞因子變化的研究中有一定應(yīng)用價值；表達(dá)譜基因芯片初步篩選出了CPB后的差異表達(dá)基因，這些基因可能參與了CPB引起的炎性反應(yīng)及其他病理生理反應(yīng)；PBMC可能不是CPB中細(xì)胞因子的主要來源。
目的 評價肺癌患者外周血中Lunx mRNA表達(dá)用于診斷肺癌微轉(zhuǎn)移的特異性和敏感性，探討肺癌轉(zhuǎn)移的早期診斷方法。 方法 2004年3月～2005年2月，以Lunx mRNA為腫瘤標(biāo)記物，采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcriptionpolymerase chain reaction，RT-PCR)技術(shù)，檢測60例Ⅰ～Ⅲ期行手術(shù)治療的肺癌患者（肺癌組）外周血Lunx mRNA的表達(dá),并以行手術(shù)治療的20例肺良性病變患者（肺良性病變組）及10例健康人外周血（健康對照組）作為對照。結(jié)合病理類型、臨床分期、隨訪，評價Lunx mRNA作為肺癌微轉(zhuǎn)移腫瘤標(biāo)記物的臨床意義。 結(jié)果 （1）肺癌組患者外周血中Lunx mRNA的陽性表達(dá)率為46.7％（28/60），Lunx mRNA在肺良性病變組（0/20）和健康對照組外周血中無表達(dá)（0/10）；（2） Lunx mRNA在肺癌I期患者中陽性表達(dá)率為8.3％（1/12），Ⅱ期患者中為333％(5/15)，Ⅲ期患者中為66.7％（22/33），Ⅰ期和Ⅱ期患者的Lunx mRNA表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義，Ⅲ期與Ⅰ期、Ⅱ期患者的Lunx mRNA表達(dá)差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=15.88， P=0.000)；（3） 在38例腺癌患者中17例Lunx mRNA表達(dá)為陽性，在14例鱗癌患者中7例表達(dá)為陽性，3例腺鱗癌患者中3例表達(dá)為陽性，3例小細(xì)胞肺癌患者中1例表達(dá)為陽性，1例大細(xì)胞肺癌和1例肉瘤樣癌患者表達(dá)為陰性。不同病理類型的肺癌患者的Lunx mRNA表達(dá)差異無統(tǒng)計學(xué)意義；（4） 截至2005年3月的隨訪發(fā)現(xiàn)，Lunx mRNA 表達(dá)陽性的28例患者中有9例發(fā)生轉(zhuǎn)移，Lunx mRNA表達(dá)陰性的32例患者中僅1例發(fā)生轉(zhuǎn)移。 結(jié)論 在肺癌患者外周血微轉(zhuǎn)移的檢測中，Lunx mRNA表現(xiàn)出較高的敏感性和特異性，有可能成為診斷肺癌外周血微轉(zhuǎn)移較合適的分子標(biāo)記物。
目的 比較自體骨髓干細(xì)胞和外周血干細(xì)胞移植治療下肢缺血的臨床療效。方法 2004年12月～2005年12月，對42例下肢缺血患者分別采用骨髓干細(xì)胞移植（A組，n=21）和外周血干細(xì)胞移植(B組，n=21)。其中男32例，女10例；年齡34～80歲，平均656歲。糖尿病下肢缺血28例，血栓閉塞性脈管炎8例，單純下肢動脈硬化閉塞癥6例。缺血病程：3個月～5年，平均21年。治療后4周，應(yīng)用主觀標(biāo)準(zhǔn)包括疼痛、冷感、麻木以及客觀標(biāo)準(zhǔn)包括間歇性跛行距離、踝肱指數(shù)（ankle brachial index, ABI）、經(jīng)皮氧分壓、血管造影、截肢率和足部創(chuàng)面變化等一系列指標(biāo)評價其療效。結(jié)果 治療后4周，A、B組疼痛緩解總有效率分別為88.2%和89.5%（P＞0.05），冷感緩解改善率分別為94.4%和94.7%（P＞0.05），麻木改善有效率分別為69.2%和66.7%（P＞0.05）。A、B組ABI分別增加38.1%和33.3%（P＞0.05）；經(jīng)皮氧分壓（TcPO2）有效率分別增加85.7%和90.5%（P＞0.05）；新生側(cè)支血管評估：A、B組分別有12例和9例患者術(shù)后復(fù)查血管造影，A、B組總有效率分別為83.3%和77.8%（P＞0.05）；截肢率評價：兩組截肢率均為9.1%（P＞0.05）；足部創(chuàng)面變化，A、B組有效率分別為600%和66.7%（P＞0.05）。40例患者獲隨訪3～15個月，平均8個月。主觀評價，A、B組有效率分別為75.0%和70.0%（P＞0.05）?？陀^評價：A、B組ABI較術(shù)前分別增加60.0%和65.0%；A、B組TcPO2較術(shù)前分別增加80.0%和75.0%；A、B組新生側(cè)支血管總有效率分別為90.0%和84.6%；A、B組潰瘍面除B組1處明顯縮小外，其余均愈合，客觀評價指標(biāo)兩組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論 無論是骨髓干細(xì)胞還是外周血干細(xì)胞移植治療下肢缺血都是有效的方法；但對同時伴心腦血管病變的患者，進(jìn)行自體干細(xì)胞移植，尤其是采用外周血干細(xì)胞移植需特別慎重。