目的 研究胃癌組織中核因子-κBp65(NF-κBp65)的表達(dá)及其與血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）的關(guān)系。 方法 應(yīng)用免疫組化SP法，對56例胃癌組織檢測NF-κBp65和VEGF的表達(dá)，并與良性組織作對照研究。 結(jié)果 胃癌組織中NF-κBp65和VEGF的表達(dá)陽性率分別為62.5%和76.8%，顯著高于胃粘膜不典型增生表達(dá)陽性率的33.3%和44.4%（P＜0.05）及正常胃粘膜表達(dá)陽性率的0和8.3%（P＜0.01）。NF-κBp65的表達(dá)與胃癌臨床分期、浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.05），與病理類型無關(guān)（Pgt;0.05）。NF-κBp65表達(dá)與VEGF呈正相關(guān)（r=0.36, P＜0.01）。 結(jié)論 NF-κBp65可能通過上調(diào)VEGF的表達(dá)，在胃癌的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。
目的研究survivin反義寡核苷酸(ASODN)對膽囊癌細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用。 方法采用脂質(zhì)體介導(dǎo)survivin ASODN轉(zhuǎn)染人膽囊癌細(xì)胞株GBC-SD，采用流式細(xì)胞儀技術(shù)檢查細(xì)胞凋亡變化，采用電鏡技術(shù)觀察細(xì)胞的形態(tài)變化，采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測survivin基因表達(dá)的變化。結(jié)果脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染survivin ASODN后，膽囊癌細(xì)胞內(nèi)survivin mRNA表達(dá)相對系數(shù)為0.512±0.011,明顯低于未轉(zhuǎn)染者的0.980±0.012 (P＜0.01)，平均下調(diào)了47.83%(P＜0.01)，凋亡細(xì)胞比率為(26.28±3.91)%，明顯高于未轉(zhuǎn)染者的（0.50±0.23）%，P＜0.01，電鏡下可見膽囊癌細(xì)胞呈典型凋亡樣改變。結(jié)論survivin ASODN轉(zhuǎn)染后能下調(diào)survivin的表達(dá)，可有效誘導(dǎo)GBC-SD細(xì)胞凋亡。
目的 用反轉(zhuǎn)錄PCR法，調(diào)取膽囊癌細(xì)胞內(nèi)的端粒酶RNA(hTR)基因，并針對其序列設(shè)計(jì)錘頭狀核酶切割基因序列，并將其構(gòu)建入真核表達(dá)載體pTriEx4內(nèi)。方法 根據(jù)hTR cDNA序列，設(shè)計(jì)引物，經(jīng)RT-PCR法從體外培養(yǎng)的膽囊癌細(xì)胞內(nèi)調(diào)取hTR模板區(qū)基因，根據(jù)其測序結(jié)果，合成錘頭狀核酶基因，與經(jīng)相應(yīng)酶切的真核表達(dá)載體連接，酶切鑒定重組體的正確性。結(jié)果經(jīng)RT-PCR從細(xì)胞內(nèi)調(diào)出68 bp序列，與hTR cDNA比較，與模板區(qū)域堿基序列一致。核酶基因重組子經(jīng)酶切鑒定序列正確。結(jié)論 RT-PCR法可調(diào)出膽囊癌hTR基因有效片段； 成功構(gòu)建了針對hTR模板區(qū)的核酶基因的真核表達(dá)載體，為膽囊癌的基因治療奠定了基礎(chǔ)。