目的 探討組織工程肌腱保存過程中細(xì)胞存活率研究的方法。方法 采用碘化丙啶(PI)將第4代人成纖維細(xì)胞的死細(xì)胞染色,雙苯并咪唑染料(Ho)染色活細(xì)胞后經(jīng)適當(dāng)波長紫外光激發(fā),分別產(chǎn)生紅色熒光和藍(lán)色熒光,利用流式細(xì)胞儀區(qū)分活細(xì)胞和死亡細(xì)胞;將組織工程化肌腱種子細(xì)胞懸液4 ml(6.0×105個/ml)平分成兩管,其中一管反復(fù)凍融,將細(xì)胞凍死;另一管不凍。再將兩管細(xì)胞按不同比例混合,采用熒光染色流式細(xì)胞儀分析,研究其量效關(guān)系;并用熒光攝影,圖像分析,即刻及2小時熒光標(biāo)記到流式細(xì)胞儀,檢測對細(xì)胞存活率的影響。結(jié)果 熒光染色流式細(xì)胞分析可反映加入凍融死細(xì)胞比例與存活細(xì)胞的量效關(guān)系,即細(xì)胞存活率與未凍融細(xì)胞和凍融細(xì)胞比例分別成正、負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù) r=0.970(P<0.05);熒光攝影后圖像分析也顯示了同樣的量效關(guān)系,r=0.982(Plt;0.05);熒光標(biāo)記后2小時檢測比即刻檢測細(xì)胞存活率降低,但差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Pgt;0.05);通過熒光顯微鏡可直接觀察組織工程化肌腱上的細(xì)胞。結(jié)論 PI和Ho熒光染色后流式細(xì)胞儀分析及熒光攝影是組織工程肌腱保存過程中細(xì)胞存活率研究的較好方法。
目的 探討視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤(retinoblastoma,RB)細(xì)胞分化程度對擴散和存活預(yù)后的影響。 方法 對156份RB眼球標(biāo)本 進(jìn)行組織病理學(xué)觀察,根據(jù)腫瘤細(xì)胞分化程度將其分為分化型與未分化型,注意有無腫瘤細(xì) 胞的擴散,并統(tǒng)計兩型發(fā)生擴散的比率。對隨訪到的82例RB患者進(jìn)行死亡率統(tǒng)計。用檢驗的方法比較兩型間死亡率和擴散發(fā)生率。記錄擴散部位與死亡率之間的關(guān)系、死者生前眼球摘除術(shù)后平均存活時間。 結(jié)果 分化型RB 17例17只眼,發(fā)生腫瘤細(xì)胞局部擴散8只眼,占47.06%;未分化型137例139 只眼,發(fā)生局部擴散66只眼,占47.48%。兩型間發(fā)生擴散的比率差異無顯著性意義(Pgt;0.05)。隨訪到的患者中,分化型RB死亡率27.27%,未分化型RB死亡率22.54%,二者比較差異亦無顯著性意義(Pgt;0.05)??魞?nèi)和鞏膜侵犯者死亡率100%,視神經(jīng)侵犯Ⅳ級者死亡率62.50%,葡萄膜侵犯者死亡率22.22% 。眼球摘除術(shù)后生存時間為5~41個月,平均21.92個月。 結(jié)論 分化型與未分化型RB的存活預(yù)后及局部擴散比率差異無顯著性意義。發(fā)生擴散的RB,無論是分化型還是未分化型其預(yù)后均取決于擴散的程度以及是否進(jìn)行積極治療。 (中華眼底病雜志,2001,17:18-20)