華西醫(yī)學(xué)期刊出版社
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找到 作者 包含"彭圣智" 1條結(jié)果
  • TGF-β3 修飾退變髓核細(xì)胞移植修復(fù)兔退變椎間盤(pán)的效果觀察

    目的 探討TGF-β3 基因修飾后退變髓核細(xì)胞生物學(xué)效應(yīng)以及植入兔退變椎間盤(pán)后對(duì)退變椎間盤(pán)的影響。 方法 將重組腺病毒載體Ad-TGF-β3 與第2 代退變髓核細(xì)胞按10 ∶ 1 比例混合培養(yǎng)轉(zhuǎn)染(Ad-TGF-β3 組),待細(xì)胞融合后傳代,MTT 檢測(cè)轉(zhuǎn)染細(xì)胞增殖活性,Western blot 檢測(cè)TGF-β3 蛋白含量,免疫細(xì)胞化學(xué)染色觀察對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期轉(zhuǎn)染細(xì)胞Ⅱ型膠原染色陽(yáng)性率;采用病毒空載體轉(zhuǎn)染髓核細(xì)胞(Adv 組)和未經(jīng)轉(zhuǎn)染髓核細(xì)胞(空白組)作為對(duì)照。取30 只新西蘭兔,體重3.2 ~ 3.5 kg,雌雄不限,通過(guò)針刺L3、4、L4、5 和L5、6 椎間盤(pán)制備椎間盤(pán)退變模型。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物按照隨機(jī)數(shù)字法分為3 組,轉(zhuǎn)染細(xì)胞組(A 組,n=12)、退變細(xì)胞組(B 組,n=12)和空白對(duì)照組(C 組,n=6)。A、B 組將100 μL 濃度為1 × 105 個(gè)/mL 對(duì)應(yīng)細(xì)胞懸液注射入退變椎間盤(pán),C 組同法注入等量PBS。注射后6、10、14 周取A、B 組各4 只、C 組2 只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物處死,取L3、4、L4、5 和L5、6 椎間盤(pán)行組織學(xué)觀察,RT-PCR 檢測(cè)Ⅱ型膠原和蛋白多糖mRNA 表達(dá)。 結(jié)果 Ad-TGF-β3轉(zhuǎn)染后髓核細(xì)胞活性明顯改善;轉(zhuǎn)染后3、7、14 d,TGF-β3在髓核細(xì)胞內(nèi)表達(dá)逐漸升高;Ad-TGF-β3 組髓核細(xì)胞細(xì)胞質(zhì)內(nèi)見(jiàn)棕黃色Ⅱ型膠原陽(yáng)性染色,陽(yáng)性率顯著高于Adv 組及空白組(P lt; 0.05)。組織學(xué)觀察示,A 組椎間盤(pán)退變程度較B、C組明顯減輕。6、10、14 周A組Ⅱ型膠原和蛋白多糖mRNA表達(dá)顯著高于B、C組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。 結(jié)論 TGF-β3 基因修飾退變髓核細(xì)胞后可明顯改善細(xì)胞生物活性,轉(zhuǎn)染后髓核細(xì)胞植入兔體內(nèi)可明顯增加退變椎間盤(pán)的基質(zhì)分泌。

    發(fā)表時(shí)間:2016-08-31 04:23 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
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