華西醫(yī)學(xué)期刊出版社
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找到 作者 包含"彭展" 1條結(jié)果
  • 人眼脈絡(luò)膜黑色素瘤OCM-1細(xì)胞中腫瘤干細(xì)胞的分離純化

    目的 分離及純化人眼脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞OCM-1中的腫瘤干細(xì)胞。 方法 將OCM-1細(xì)胞復(fù)蘇,使用Dubecco標(biāo)準(zhǔn)改良Eagle培養(yǎng)基(DMEM/F12)培養(yǎng)后,改用無血清化學(xué)限定培養(yǎng)基(SFM),并分離純化培養(yǎng)腫瘤干細(xì)胞,用流式細(xì)胞儀檢測神經(jīng)干細(xì)胞特異性標(biāo)記物CD133的表達(dá)比率,并對第六代細(xì)胞進(jìn)行神經(jīng)RNA結(jié)合蛋白(musashi-1)免疫細(xì)胞化學(xué)染色,顯微鏡下觀察陽性細(xì)胞比率。 結(jié)果 在標(biāo)準(zhǔn)DMEM/F12培養(yǎng)基中貼壁生長的OCM1細(xì)胞用SFM培養(yǎng)基培養(yǎng)后,貼壁細(xì)胞顯著減少,至第6代時細(xì)胞均為懸浮團狀集落生長,呈現(xiàn)典型的干細(xì)胞生長方式。在不同代的細(xì)胞中,CD133均有陽性,未經(jīng)過分離的OCM-1細(xì)胞、經(jīng)過SFM培養(yǎng)并分離的第1、2代OCM1細(xì)胞的陽性比率分別2.5%、217%、57.8%,第6代的細(xì)胞CD133陽性比率達(dá)到79.8%,musashi-1強陽性表達(dá)。 結(jié)論 脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞中存在腫瘤干細(xì)胞。使用干細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng),并通過限制分化、連續(xù)傳代的方法,可分離純化出懸浮克隆集落生長的干細(xì)胞。 (中華眼底病雜志,2007, 23:87-90)

    發(fā)表時間:2016-09-02 05:48 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
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