【摘 要】 目的 研究殼聚糖（chitosan，CH）脫乙酰度（degree of deacetylation，DDA）對(duì)CH- 甘油磷酸鹽溫控體系凝膠化行為的影響，同時(shí)比較其在凝膠形成前后的流變學(xué)行為差異。 方法 將DDA 為70%、85%、90% 和97%的CH 粉末分別溶解于0.1 mol/L 的鹽酸溶液，制備各DDA 濃度為2%（w/v）的CH 溶液樣品，每種DDA 制備5 個(gè)樣品，于10℃下與五水甘油磷酸鈉（β-glycerol phosphate disodium salt pentahydrate，GP）溶液混勻后，得到不同DDA 的CH-GP 溫敏溶液。用AR 2000ex 流變儀在pH7.02 條件下分別對(duì)CH-GP 溶液和凝膠進(jìn)行流變學(xué)以及物理性質(zhì)表征測(cè)定。 結(jié) 果 pH7.02 條件下，DDA分別為85%、90%及97%的CH-GP 溫敏溶液，其初始凝膠化溫度分別為（59.90 ± 0.08）、（48.10 ± 0.08）、（37.10 ± 0.11）℃，凝膠化時(shí)間分別為（12.4 ± 0.6）、（8.2 ± 0.5）、（4.9 ± 0.1）min；DDA 為70% 的CH-GP 溶液凝膠化溫度超過(guò)70℃，凝膠化時(shí)間超過(guò)15 min。各DDA 的CH 樣品凝膠化溫度和凝膠化時(shí)間比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。CH-GP 體系形成凝膠前，儲(chǔ)能模量（G’）和耗能模量（G’’）最初均隨頻率升高而上升，至凝膠化溫度點(diǎn)時(shí)2 條曲線(xiàn)交匯，之后G’ 顯著升高，G’’ 則緩慢下降。形成凝膠后，隨著頻率升高，G’ 和G’’ 均無(wú)明顯改變。 結(jié)論 流變學(xué)表征可客觀(guān)測(cè)定CH-GP 體系的凝膠化溫度以及凝膠的力學(xué)性能，因而這種方法在組織工程設(shè)計(jì)用于不同目的的支架時(shí)，有助于針對(duì)不同靶向組織選擇合適DDA 的CH 原料。
目的建立一種準(zhǔn)確的檢測(cè)交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠中交聯(lián)劑1，4丁二醇二縮水甘油醚（1,4-butanediol diglycidyl ether,BDDE）殘留量的方法，為產(chǎn)品的質(zhì)量控制提供科學(xué)的檢測(cè)方法。 方法采用氣相色譜法考察BDDE的熱穩(wěn)定性，同時(shí)利用熒光分光光度法測(cè)定透明質(zhì)酸鈉凝膠中BDDE的殘留量。通過(guò)分析熒光法檢測(cè)BDDE殘留量的影響因素（透明質(zhì)酸酶及BDDE穩(wěn)定性）改良熒光法。將透明質(zhì)酸酶添加到BDDE標(biāo)準(zhǔn)溶液中，測(cè)定交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠中BDDE殘留量。 結(jié)果傳統(tǒng)熒光法檢測(cè)示，BDDE殘留量與熒光值呈線(xiàn)性相關(guān)性，線(xiàn)性方程為y=14.102x+1.103，R2=0.999 8。BDDE具有熱不穩(wěn)定性，隨溫度上升與時(shí)間延長(zhǎng)均會(huì)發(fā)生分解。熒光法檢測(cè)透明質(zhì)酸酶和交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠酶解液均產(chǎn)生熒光值。經(jīng)改良后的熒光法得到新的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，y=14.027x+7.062，R2=0.999 9。 結(jié)論熒光檢測(cè)法是一種簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確測(cè)定交聯(lián)透明質(zhì)酸鈉凝膠中BDDE殘留量的方法。由于BDDE具有熱不穩(wěn)定性，使用該方法時(shí)需嚴(yán)格控制各步驟溫度，排除溫度對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。同時(shí)采用傳統(tǒng)熒光法檢測(cè)凝膠中交聯(lián)劑BDDE的殘留量時(shí)需對(duì)凝膠進(jìn)行酶解，而引入的透明質(zhì)酸酶對(duì)檢測(cè)結(jié)果存在較大影響，可將透明質(zhì)酸酶添加到BDDE標(biāo)準(zhǔn)溶液中，以扣除其對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響。