干細(xì)胞為機(jī)體組織中的一個(gè)極小的未分化細(xì)胞亞群,具有增生、自我維持、自我更新、能產(chǎn)生大量具有功能的子代細(xì)胞。對(duì)胚胎干細(xì)胞、人成體視網(wǎng)膜干細(xì)胞及眼內(nèi)腫瘤干細(xì)\胞研究發(fā)現(xiàn),人胚胎及成體視網(wǎng)膜均存在有干細(xì)胞,眼內(nèi)腫瘤如視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤、脈絡(luò)膜黑色素瘤內(nèi)也有腫瘤干細(xì)胞的存在;將不同干細(xì)胞移植到視網(wǎng)膜下或玻璃體腔,均能分化成神經(jīng)元或視網(wǎng)膜結(jié)構(gòu)。干細(xì)胞有望成為疾病發(fā)病機(jī)制及治療研究突破的最新靶點(diǎn)。 (中華眼底病雜志, 2007, 23: 83-86)
目的 分離及純化人眼脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞OCM-1中的腫瘤干細(xì)胞。 方法 將OCM-1細(xì)胞復(fù)蘇,使用Dubecco標(biāo)準(zhǔn)改良Eagle培養(yǎng)基(DMEM/F12)培養(yǎng)后,改用無(wú)血清化學(xué)限定培養(yǎng)基(SFM),并分離純化培養(yǎng)腫瘤干細(xì)胞,用流式細(xì)胞儀檢測(cè)神經(jīng)干細(xì)胞特異性標(biāo)記物CD133的表達(dá)比率,并對(duì)第六代細(xì)胞進(jìn)行神經(jīng)RNA結(jié)合蛋白(musashi-1)免疫細(xì)胞化學(xué)染色,顯微鏡下觀察陽(yáng)性細(xì)胞比率。 結(jié)果 在標(biāo)準(zhǔn)DMEM/F12培養(yǎng)基中貼壁生長(zhǎng)的OCM1細(xì)胞用SFM培養(yǎng)基培養(yǎng)后,貼壁細(xì)胞顯著減少,至第6代時(shí)細(xì)胞均為懸浮團(tuán)狀集落生長(zhǎng),呈現(xiàn)典型的干細(xì)胞生長(zhǎng)方式。在不同代的細(xì)胞中,CD133均有陽(yáng)性,未經(jīng)過(guò)分離的OCM-1細(xì)胞、經(jīng)過(guò)SFM培養(yǎng)并分離的第1、2代OCM1細(xì)胞的陽(yáng)性比率分別2.5%、217%、57.8%,第6代的細(xì)胞CD133陽(yáng)性比率達(dá)到79.8%,musashi-1強(qiáng)陽(yáng)性表達(dá)。 結(jié)論 脈絡(luò)膜黑色素瘤細(xì)胞中存在腫瘤干細(xì)胞。使用干細(xì)胞培養(yǎng)液培養(yǎng),并通過(guò)限制分化、連續(xù)傳代的方法,可分離純化出懸浮克隆集落生長(zhǎng)的干細(xì)胞。 (中華眼底病雜志,2007, 23:87-90)
目的:探討視網(wǎng)膜前膜(epiretinal membranes,ERMs)和視網(wǎng)膜下膜(subretinal membranes,SRMs)內(nèi)淋巴細(xì)胞是否被激活及其免疫反應(yīng)的作用。 方法:用一組單克隆抗體mdash;抗CD25(激活T細(xì)胞)、抗CD23(激活B細(xì)胞)、抗CD68(巨噬細(xì)胞)和抗人類白細(xì)胞抗原Ⅱ類抗原(human leukocyte antigen Ⅱantigen,HLAmdash;DR)調(diào)查了增殖性玻璃體視網(wǎng)膜病變(prliferative vitreoretinopathy,PVR)、外傷性PVR和繼發(fā)性牽引性視網(wǎng)膜脫離的ERMs20例,PVR和外傷性PVR SRMs各1例。 結(jié)果:ERMsCD23和CD25陽(yáng)性各4例,SRMsCD23和CD25陽(yáng)性各l例。CD68和HLAmdash;DR在所有標(biāo)本均為陽(yáng)性。 結(jié)論:在ERMs和SRMs可能存在著T、B細(xì)胞介導(dǎo)的異常免疫反應(yīng),這種反應(yīng)在上述疾病的發(fā)生發(fā)展中可能起著重要作用。 (中華眼底病雜志,1996,12:147-150)
目的 建立成年人與2個(gè)月月齡嬰兒視網(wǎng)膜組織的雙向凝膠電泳圖譜,初步分析成年人視網(wǎng)膜與嬰兒視網(wǎng)膜蛋白質(zhì)的表達(dá)差異。方法 9例角膜移植后剩余的成年人眼球視網(wǎng)膜組織,2 例角膜移植后剩余的2個(gè)月月齡嬰兒眼球視網(wǎng)膜組織;抽提蛋白質(zhì),雙向凝膠電泳后考馬斯亮藍(lán)染色掃描分析圖譜,選取明顯差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行質(zhì)譜鑒定。結(jié)果 成年人與2個(gè)月月齡嬰兒視網(wǎng)膜組織的凝膠經(jīng)考馬斯亮藍(lán)染色分別檢測(cè)到1179和1295個(gè)蛋白點(diǎn),其中1039個(gè)蛋白點(diǎn)位置相匹配。5個(gè)差異蛋白點(diǎn)的質(zhì)譜鑒定結(jié)果顯示,人血清白蛋白、鳥(niǎo)苷酸激酶在成年人的視網(wǎng)膜中高表達(dá);微管蛋白、轉(zhuǎn)醛醇酶和晶體蛋白在2個(gè)月月齡嬰兒的視網(wǎng)膜中高表達(dá)。結(jié)論 成功建立了人視網(wǎng)膜蛋白質(zhì)的雙向凝膠表達(dá)圖譜。經(jīng)質(zhì)譜鑒定證實(shí)了成年人和嬰兒的視網(wǎng)膜蛋白質(zhì)存在表達(dá)差異。
目的 研究近視眼組織結(jié)構(gòu)改變,探索其發(fā)病機(jī)制。 方法 將雛雞單眼眼瞼縫合,驗(yàn)光確定近視形成后,摘出眼球進(jìn)行測(cè)量及光、電鏡檢查。 結(jié)果 縫合組眼球三條徑線均明顯增大,平均屈光度為-15.00D。光鏡下見(jiàn)縫合組視桿細(xì)胞外節(jié)較長(zhǎng),與視網(wǎng)膜色素上皮(retinal pigment epithelium, RPE)細(xì)胞胞體相接,用測(cè)微器測(cè)量鞏膜軟骨層增厚,視網(wǎng)膜變薄。電鏡下見(jiàn)縫合組視桿細(xì)胞外節(jié)變長(zhǎng),膜盤完整,RPE細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)含有外節(jié)磨盤片段的吞噬體明顯減少。 結(jié)論 早期形覺(jué)剝奪可影響雞視細(xì)胞外節(jié)磨盤脫落,并引起眼球增大,近視眼形成。 (中華眼底病雜志,1999,15:20-23)