目的 探討性別差異對內(nèi)毒素血癥大鼠肺臟組織核因子-κB（NF-κB）活化的影響。方法 取40只清潔級Wistar大鼠，雌、雄各半，分為對照組（雌、雄各10只）和內(nèi)毒素血癥組（雌、雄各10只），采用腹腔注射內(nèi)毒素5 mg/kg制作動物模型，無菌留取肺臟組織標(biāo)本，用凝膠阻滯遷移分析方法（EMSA）檢測NF-κB的活化情況，同時檢測大鼠血清中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）及雌二醇（E2）含量。結(jié)果 對照組雌、雄性大鼠肺臟組織有NF-κB微弱活化，分別為1.33±0.24和1.47±0.40，同時血清中TNF-α含量較少，分別為(0.75±0.16) ng/ml和(0.82±0.12) ng/ml，各項指標(biāo)在雌、雄性大鼠間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）； 注射內(nèi)毒素后雌、雄性大鼠的NF-κB值分別為12.10±2.89和19.53±2.12，TNF-α值分別為（4.10±0.72） ng/ml和（6.37±1.29) ng/ml，較對照組明顯升高（P＜0.01），但是雌性大鼠各項指標(biāo)的變化明顯低于雄性大鼠（P＜0.01）。對照組雌、雄性大鼠血清E2水平分別為（5.94±1.03) ng/L和(0.93±0.30) ng/L，注射內(nèi)毒素后相應(yīng)值為（6.13±1.31) ng/L和（1.06±0.26） ng/L，但兩組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（Pgt;0.05）。相關(guān)分析表明，雌、雄性內(nèi)毒素血癥大鼠肺臟組織NF-κB 的活化與血清中TNF-α含量呈正相關(guān)（r=0.921 1，P=0.013； r=0.907 2，P=0.017），與E2含量呈負(fù)相關(guān)（r=-0.887 5，P=0.017； r=-0.872 3，P=0.022）。 結(jié)論 內(nèi)毒素血癥大鼠肺臟組織NF-κB的活化及血清中TNF-α的含量存在性別差異，內(nèi)源性雌激素可能通過抑制NF-κB 的活化介導(dǎo)了對雌性內(nèi)毒素血癥大鼠肺臟的保護(hù)作用。
目的 研究胃癌組織中核因子-κBp65(NF-κBp65)的表達(dá)及其與血管內(nèi)皮生長因子（VEGF）的關(guān)系。 方法 應(yīng)用免疫組化SP法，對56例胃癌組織檢測NF-κBp65和VEGF的表達(dá)，并與良性組織作對照研究。 結(jié)果 胃癌組織中NF-κBp65和VEGF的表達(dá)陽性率分別為62.5%和76.8%，顯著高于胃粘膜不典型增生表達(dá)陽性率的33.3%和44.4%（P＜0.05）及正常胃粘膜表達(dá)陽性率的0和8.3%（P＜0.01）。NF-κBp65的表達(dá)與胃癌臨床分期、浸潤深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)（P＜0.05），與病理類型無關(guān)（Pgt;0.05）。NF-κBp65表達(dá)與VEGF呈正相關(guān)（r=0.36, P＜0.01）。 結(jié)論 NF-κBp65可能通過上調(diào)VEGF的表達(dá)，在胃癌的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮重要作用。
目的探討核因子-kappa B(NF-κB）在血管成形術(shù)后再狹窄中的作用。 方法對國內(nèi)、外近5年的有關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行綜述。結(jié)果在血管成形術(shù)后NF-κB可引起平滑肌細(xì)胞增生及凋亡減少，導(dǎo)致血管內(nèi)膜過度增生。結(jié)論NF-κB在血管成形術(shù)后再狹窄中起著重要作用。
目的 探討核因子κB 圈套寡核苷酸( NF-κB decoy ODN) 轉(zhuǎn)染對小鼠成熟樹突狀細(xì)胞( DCs) 生物學(xué)特性的影響。方法 體外誘導(dǎo)Balb/c 小鼠骨髓細(xì)胞生成未成熟DCs( imDCs) , 經(jīng)抗原 OVA 以及LPS孵育后成為OVA 沖擊的骨髓來源成熟DCs( mDCs) , 流式細(xì)胞儀檢測DCs 表面分子CD11c 以及MHC-Ⅱ的表達(dá)予以鑒定; 將NF-κB decoy ODN 體外轉(zhuǎn)染小鼠骨髓來源成熟DCs, 同時設(shè)立陰性對照組( 轉(zhuǎn)染NF-κB“變異”O(jiān)DN) 以及未轉(zhuǎn)染組, EMSA 檢測轉(zhuǎn)染后NF-κB 的活性變化; 流式細(xì)胞儀檢測各組DCs 表面共刺激分子( CD40、CD80、CD86) 的表達(dá); 混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)觀察各組DCs 對OVA 致敏的T淋巴細(xì)胞增殖的影響。結(jié)果 成功培養(yǎng)出骨髓來源成熟DCs; NF-κB decoy ODN 轉(zhuǎn)染DCs 的NF-κB活性明顯降低( P lt;0. 05) , DCs 表面CD40、CD80 共刺激分子的表達(dá)與陰性對照組、未轉(zhuǎn)染組比較無明顯改變( P gt; 0. 05) , 而CD86 的表達(dá)與其他各組比較明顯降低( P lt;0. 05) ; 在混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)中,NF-κB decoy ODN轉(zhuǎn)染DCs 對T細(xì)胞的增殖有抑制作用( P lt; 0.05) , 而陰性對照組與未轉(zhuǎn)染組的DCs具有強烈的激發(fā)T細(xì)胞增殖的能力( P lt; 0. 05) 。結(jié)論 NF-κB decoy ODN 轉(zhuǎn)染DCs 可能通過CD86 的表達(dá)降低顯著抑制抗原特異性T細(xì)胞活化, 該改良的DCs 有可能用于哮喘的免疫治療。
目的 研究n-3多不飽和脂肪酸預(yù)防同種異體移植血管硬化的作用。 方法 SD和Wistar大鼠各240只，隨機配對成240對建立頸總動脈同種異體移植血管模型，并隨機平均分成4組，每組60對。 對照組：術(shù)前、術(shù)后未喂食n-3多不飽和脂肪酸；A組：術(shù)前2周始喂食n-3多不飽和脂肪酸600mg/kg（以EPA含量計，下同），直至摘取標(biāo)本；B組：喂食300mg/kg；C組：喂食150mg/kg。分別于術(shù)后1、7、14、21和28d摘取受者移植血管，觀察移植血管在活體的搏動情況，HE染色光學(xué)顯微鏡下觀察移植血管的組織學(xué)病理改變，電子顯微鏡觀察移植血管的超微結(jié)構(gòu)變化，免疫組織化學(xué)染色檢測細(xì)胞間黏附分子-1（ICAM-1）、血管細(xì)胞黏附分子-1（VCAM-1）和細(xì)胞核因子κB（NF-κB）在移植血管的表達(dá)。 結(jié)果 對照組術(shù)后7d移植血管開始有病理改變，28d時最為明顯，管腔已基本堵塞；A組、B組、C組移植血管的病理改變均較對照組遲緩，管腔通暢率優(yōu)于對照組。對照組ICAM-1，VCAM-1，NF-κB的表達(dá)較A組、B組和C組明顯增強(Plt;0.05)。移植術(shù)后1d、7d ICAM-1、VCAM-1、NF-κB的表達(dá)A組、B組、C組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（Pgt;0.05)，移植術(shù)后14、21和28d的表達(dá)C組較A組、B組明顯增強(Plt;0.05)，而A組與B組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Pgt;0.05)。 結(jié)論 n-3多不飽和脂肪酸能夠預(yù)防同種異體移植血管硬化，表現(xiàn)為移植血管病理改變發(fā)生遲緩，管腔通暢率高,ICAM-1，VCAM-1和NF-κB的表達(dá)減弱，n-3多不飽和脂肪酸以300 mg/kg用量達(dá)到的效果最佳。
目的探討氣管注入肺泡表面活性物質(zhì)(PS)對大鼠呼吸機相關(guān)性肺損傷(VILI)的保護(hù)作用及機制。方法將40只Wistar大鼠采用區(qū)組法隨機分為對照組、高潮氣量組(HV組)、VILI組和PS組4組,每組各10只。對照組未行機械通氣,其余3組容量控制通氣,PS組同時經(jīng)氣管內(nèi)插管注入豬PS100mg/kg。監(jiān)測心率、平均動脈壓(MAP)、血氣分析、肺濕/干重比(W/D)和支氣管肺泡灌洗液(BALF)中白細(xì)胞計數(shù),測定肺組織核因子-κB(NF-κB)活性和BALF中及血清白細(xì)胞介素-8(IL-8)濃度,并觀察大體及光學(xué)顯微鏡下肺組織損傷的改變。結(jié)果損傷性機械通氣后大鼠MAP及氧合指數(shù)(PaO2/FiO2)顯著降低,而肺組織NF-κB活性和W/D顯著增高。PS組與VILI組相比,MAP、PaO2/FiO2、肺組織NF-κB活性、BALF中白細(xì)胞計數(shù)、BALF及血清中IL-8濃度均有統(tǒng)計學(xué)意義(Plt;0.05)。組織學(xué)檢查顯示PS組較VILI組病變明顯減輕。結(jié)論經(jīng)氣管注入PS可抑制VILI大鼠NF-κB基因表達(dá),對VILI有保護(hù)作用。
目的 觀察白細(xì)胞介素-1β（IL-1β）對體外培養(yǎng)的人胃黏膜上皮GES-1細(xì)胞中腸道特異性標(biāo)志物尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子-1（CDX1）和腸道黏蛋白-2（MUC2）表達(dá)的誘導(dǎo)作用，探討其作用機理。方法 通過不同濃度及不同作用時間的IL-1β刺激人胃黏膜上皮GES-1細(xì)胞，采用實時定量PCR法檢測CDX1 mRNA和MUC2 mRNA的表達(dá)水平； 并使用NF-κB抑制劑PDTC預(yù)處理GES-1細(xì)胞，檢測PDTC對IL-1β誘導(dǎo)的CDX1 mRNA和MUC2 mRNA表達(dá)水平的影響。結(jié)果 正常情況下人胃黏膜上皮GES-1細(xì)胞不表達(dá)CDX1 mRNA和MUC2 mRNA，而IL-1β可以誘導(dǎo)GES-1細(xì)胞中CDX1 mRNA和MUC2 mRNA的表達(dá)，該作用在一定濃度范圍內(nèi)呈現(xiàn)劑量依賴性（P＜0.05）； IL-1β作用8 h時，CDX1 mRNA和MUC2 mRNA的表達(dá)達(dá)到峰值（P＜0.05），隨后表達(dá)逐漸降低。經(jīng)NF-κB抑制劑PDTC預(yù)處理后的GES-1細(xì)胞，CDX1 mRNA和MUC2 mRNA的表達(dá)水平明顯下降（P＜0.05）。 結(jié)論 IL-1β可能通過NF-κB信號通路促進(jìn)人胃黏膜上皮細(xì)胞中CDX1 mRNA和MUC2 mRNA的表達(dá)，在胃黏膜腸上皮化生中發(fā)揮作用。
目的 觀察表皮生長因子（EGF）對胰腺癌細(xì)胞增殖、黏附及侵襲力的影響及其對核因子-κB（NF-κB）和細(xì)胞基質(zhì)金屬蛋白酶（MMPs）表達(dá)的影響，探討EGF促進(jìn)胰腺癌侵襲的相關(guān)機理。方法 通過細(xì)胞增殖、黏附及侵襲實驗，觀察在EGF影響下胰腺癌細(xì)胞黏附、增殖及侵襲能力變化; 通過RT-PCR、MMPs明膠酶譜分析、Western blot及EMSA，檢測胰腺癌細(xì)胞的MMP-2和MMP-9 mRNA及其蛋白表達(dá)以及NF-κB活性變化; 并觀察NF-κB抑制物吡咯烷二硫代氨基甲酸鹽（PDTC）對EGF誘導(dǎo)的胰腺癌細(xì)胞NF-κB活性、MMP-9 mRNA及其蛋白表達(dá)以及腫瘤細(xì)胞侵襲力的變化。結(jié)果 EGF能夠增強胰腺癌細(xì)胞的侵襲能力，具有劑量依賴性（P＜0.05）。EGF對胰腺癌細(xì)胞的黏附力及增殖力無明顯影響。EGF處理后，腫瘤細(xì)胞的MMP-9蛋白和mRNA表達(dá)明顯升高，EGF濃度為50 ng/ml時，腫瘤細(xì)胞的MMP-9表達(dá)最強，但對MMP-2蛋白和mRNA的表達(dá)則無影響。隨著EGF濃度的增加，NF-κB活性增強，具有濃度依賴性（P＜0.05）。與EGF單獨處理相比，經(jīng)PDTC和EGF共同處理后的胰腺癌細(xì)胞NF-κB活性與MMP-9蛋白和mRNA表達(dá)均降低; PDTC和EGF共同處理后的胰腺癌細(xì)胞侵襲力較EGF單獨處理和對照均減弱（P＜0.05）。結(jié)論 EGF通過激活NF-κB的活性，誘導(dǎo)MMP-9表達(dá)，促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞的侵襲，而這一過程可以被PDTC抑制。
【摘要】目的 探討表皮生長因子(epidermal growth factor, EGF)促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移的分子機理。方法EGF對胰腺癌細(xì)胞系NOR-P1的增殖、黏附及侵襲能力的影響分別用WST-1細(xì)胞增殖實驗、細(xì)胞黏附實驗和Transwell體外侵襲實驗檢測；MMP-9和MMP-2的活性及表達(dá)分別用明膠酶譜分析和Western 印跡、RT-PCR檢測；NF-κB 活性用凝膠電泳遷移實驗檢測。結(jié)果EGF能夠明顯促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞的侵襲能力，但對胰腺癌細(xì)胞的黏附力及增殖并無明顯影響；EGF明顯上調(diào)胰腺癌細(xì)胞的NF-κB和MMP-9的活性及表達(dá)，但對MMP-2活性及表達(dá)無影響；NF-κB抑制物四氫化吡咯二硫代氨基甲酸鹽(PDTC)能夠明顯抑制EGF所誘導(dǎo)的NF-κB活性，同時也抑制EGF所誘導(dǎo)的MMP-9表達(dá)及胰腺癌細(xì)胞的侵襲力。結(jié)論EGF通過活化NF-κB促進(jìn)胰腺癌細(xì)胞的MMP-9的表達(dá)和侵襲力，采用NF-κB抑制劑PDTC阻斷NF-κB通路能夠降低胰腺癌細(xì)胞的侵襲力。
目的 觀察高轉(zhuǎn)移性人肝癌細(xì)胞系HCC9204轉(zhuǎn)染抑制性κB基因（IκB-α)后核因子-κB(NF-κB)和基質(zhì)金屬蛋白酶-9（MMP-9)表達(dá)的改變。方法 采用脂質(zhì)體法將IκB-α基因轉(zhuǎn)染HCC9204細(xì)胞，應(yīng)用Western-blot及RT-PCR法檢測MMP-9和NF-κB的表達(dá)； 通過基底膜侵襲實驗檢測腫瘤細(xì)胞的浸潤和轉(zhuǎn)移能力。結(jié)果 HCC9204細(xì)胞轉(zhuǎn)染pcDNA3-IκB-α后，細(xì)胞內(nèi)NF-κB蛋白表達(dá)下降，同時伴隨MMP-9 mRNA表達(dá)水平和細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移能力的明顯下降。結(jié)論 NF-κB活性被抑制后引起細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移能力的下降可能是由于MMP-9表達(dá)下降所致。