目的 綜述原位3D生物打印技術在骨和軟骨損傷修復方面的研究進展。方法 查閱近年國內(nèi)外原位3D生物打印技術用于骨和軟骨損傷修復的相關文獻，并進行分析和總結(jié)。結(jié)果 原位3D生物打印作為一種新興的組織工程技術，主要應用于骨、軟骨和皮膚等組織損傷修復。通過將生物材料、生物活性物質(zhì)與細胞相結(jié)合，在損傷或缺損部位直接打印移植體修復缺損。目前關于打印技術的研究主要集中于打印模式、生物墨水和打印技術等方面；骨及軟骨領域應用研究主要集中在預血管化，調(diào)整生物墨水組成，改善支架結(jié)構、打印技術，負載藥物、細胞和生物活性因子等，以促進組織損傷修復。結(jié)論 原位3D生物打印可以實時快速并且微創(chuàng)化構建骨和軟骨組織移植體，未來需要繼續(xù)研制適合特定組織移植體的生物墨水，以及與機器人技術、融合成像、計算機輔助醫(yī)療相結(jié)合，提升打印效率。
目的 觀察激素性股骨頭壞死骨組織中骨保護素（osteoprotegerin，OPG）/NF-κB 受體活化因子配基（receptor activator of NF-κB ligand，RANKL）mRNA 表達情況，探討長期應用激素導致股骨頭壞死的另一病理機制。 方 法 2007 年3 月－ 2008 年3 月，取35 例激素性股骨頭壞死患者的股骨頭骨組織和21 例股骨頸骨折患者股骨頭骨組織，分別作為實驗組和對照組。兩組男女比例均為4 ∶ 3；年齡41 ～ 70 歲，其中實驗組平均55.34 歲，對照組平均55.33 歲。實驗組最近2 年內(nèi)接受皮質(zhì)激素治療超過3 周或超過1 周的大劑量沖擊治療，對照組未接受過超過1 周的激素治療。所有標本行多聚甲醛固定后石蠟包埋，HE 染色及總RNA 提取，采用實時定量PCR（real-time quantitativePCR，RTQ-PCR）技術檢測OPG mRNA 和RANKL mRNA 的表達水平，并計算OPG mRNA 和RANKL mRNA 的比值。 結(jié) 果 HE 染色結(jié)果顯示，實驗組未見完整骨小梁和骨單位，可見不連續(xù)的骨碎片，碎片骨陷窩內(nèi)骨細胞大部分消失，周圍有大量炎性肉芽組織；對照組可見完整骨單位由板層骨構成，板層骨連續(xù)完整，圍繞血管呈同心圓排列，小梁骨陷窩內(nèi)可見骨細胞。RTQ-PCR 檢測顯示，實驗組OPG mRNA 及RANKL mRNA 分別為1.35 ± 0.42 及4.36 ± 1.35，OPG mRNA/RANKL mRNA 為0.34 ± 0.16；對照組分別為1.78 ± 0.63 及3.49 ± 1.02，OPG mRNA/RANKL mRNA 為0.54 ± 0.20；實驗組OPG mRNA 表達水平明顯低于對照組，而RANKL mRNA 表達明顯高于對照組，OPG mRNA/RANKL mRNA 較對照組明顯降低，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 長期應用皮質(zhì)激素致股骨頭壞死可能與其調(diào)控OPG mRNA和RANKL mRNA 表達有關。
目的?觀察長期應用糖皮質(zhì)激素對大鼠股骨頭骨組織中骨保護素（osteoprotegerin，OPG）/NF-κB受體活化因子配基（receptor activator of NF-κB ligand，RANKL）-基質(zhì)金屬蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）/基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑（tissue inhibitor of matrix metalloproteinase，TIMP）系統(tǒng)的影響，探討其導致股骨頭缺血性壞死（avascular necrosis of femoral head，ANFH）的相關機制。?方法?健康SD大鼠40只，雌雄各半，體重250～300 g；隨機分為高、中、低劑量激素組和對照組，每組10只。高、中、低劑量激素組動物分別給予肌肉注射醋酸潑尼松龍25.0、12.5、7.0 mg/ kg，每周2次，共4周；對照組給予等量生理鹽水。注射期間觀察大鼠一般情況，于4周注射完畢后取各組大鼠左側(cè)股骨頭行組織學觀察，鑒定骨壞死情況；取右側(cè)股骨頭骨組織提取總RNA，RT-PCR檢測OPG、RANKL、MMP-2、MMP-9、TIMP-1、TIMP-2 mRNA表達水平。?結(jié)果?注射醋酸潑尼松龍后高劑量激素組4只、中劑量激素組1只于第23～26天因飲食減少、體重下降最終致全身衰竭死亡。HE染色可見各激素組骨小梁和骨單位完整性不同程度破壞，形成不連續(xù)的骨碎片，部分骨陷窩內(nèi)骨細胞消失，被炎性肉芽組織取代；對照組可見骨單位完整，板層圍繞血管呈同心圓排列，大多數(shù)骨小梁陷窩內(nèi)可見骨細胞。高、中、低劑量激素組及對照組ANFH發(fā)生率分別為83.3%（5/6）、66.7%（6/9）、30.0%（3/10）、0（0/10）。RT-PCR檢測示，各激素組與對照組比較，OPG、TIMP-1、TIMP-2 mRNA表達均降低，差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05），并且隨激素用量增加呈下降趨勢；各激素組間OPG mRNA表達差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）；中、低劑量激素組間TIMP-1、TIMP-2 mRNA表達比較差異無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05），但明顯高于高劑量激素組（P lt; 0.05）。各激素組與對照組比較，RANKL、MMP-2、MMP-9 mRNA表達均增高，并且隨激素用量增加呈上升趨勢，其中高、中劑量激素組顯著高于對照組（P lt; 0.05）；高、中劑量激素組間RANKL mRNA表達差異無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05），但顯著高于低劑量激素組（P lt; 0.05）；中、低劑量激素組間MMP-2、MMP-9 mRNA比較差異無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05），但均低于高劑量激素組（P lt; 0.05）。?結(jié) 論?長期應用糖皮質(zhì)激素致ANFH壞死的效應可能與其調(diào)控OPG/RANKL-MMP/TIMP系統(tǒng)表達有關。
目的 觀察激素性股骨頭壞死患者BMSCs 骨保護素（osteoprotegerin，OPG）/ NF-κB 受體活化因子配基（receptor activator of nuclear factor kappa B ligand，RANKL）mRNA 表達情況，探討長期應用激素導致股骨頭壞死的另一病理機制。 方法 取2007 年3 月－ 2008 年3 月激素性股骨頭壞死患者自愿捐贈的骨髓及股骨頭骨組織35 例（實驗組）和股骨頸骨折患者自愿捐贈的骨髓及股骨頭骨組織21 例（對照組）。兩組男女比例均為4 ∶ 3；年齡41 ～ 70 歲，其中實驗組平均55.34 歲，對照組平均55.33 歲。實驗組患者最近2 年內(nèi)接受糖皮質(zhì)激素治療超過3 周或大劑量沖擊治療超過1 周，對照組患者從未接受超過1 周的激素治療。骨組織標本行多聚甲醛固定后石蠟包埋，HE 染色。所取骨髓采用貼壁法分離培養(yǎng)BMSCs，采用實時定量聚合酶鏈反應（real-time quantitative polymerase chain reaction，RTQ-PCR）技術檢測BMSCs OPG mRNA 和RANKL mRNA 的表達水平，并計算OPG mRNA/RANKL mRNA 比值。 結(jié)果 HE 染色示實驗組未見完整的骨小梁和骨單位，可見不連續(xù)骨碎片，碎片骨陷窩內(nèi)骨細胞大部分消失，周圍有大量炎性肉芽組織。對照組可見完整骨單位由板層骨構成，板層骨連續(xù)完整，圍繞血管呈同心圓排列，小梁骨陷窩內(nèi)可見骨細胞。BMSCs RTQ-PCR檢測：實驗組OPG mRNA表達量為0.37 ± 0.12，RANKL mRNA 1.12 ± 0.39，OPG mRNA/RANKL mRNA比值為0.37 ± 0.17；對照組OPG mRNA 0.47 ± 0.13，RANKL mRNA 0.84 ± 0.24，OPG mRNA/RANKL mRNA 比值為0.61 ± 0.26；兩組比較差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 長期應用糖皮質(zhì)激素致股骨頭壞死可能與其調(diào)控BMSCs OPG 和RANKL 表達有關。