目的 人參皂苷Rg1 可增強神經元對缺氧缺血應激的耐受能力，在缺氧缺血性腦損傷（hypoxia ischemia brain damage，HIBD）中發(fā)揮一定的抗凋亡作用。觀察人參皂苷Rg1 對新生鼠HIBD 后神經元凋亡及神經功能恢復的影響，并探討其可能機制。 方法 10 天齡SPF 級SD 大鼠54 只，體重16 ～ 22 g，隨機分為假手術對照組（假手術組，n=6）、HIBD 模型組（模型組，n=24）和人參皂苷Rg1 組（Rg1 組，n=24）。模型組及Rg1 組大鼠采用結扎右側頸總動脈并低氧通氣制備HIBD 模型；假手術組僅分離右側頸總動脈，不結扎，不進行低氧通氣。Rg1 組于術后即刻腹腔內注射0.1 mL 含人參皂苷Rg1（40 mg/kg）的生理鹽水，此后每隔24 h 按相同劑量注射人參皂苷Rg1；模型組和假手術組相同時間點腹腔內注射0.1 mL 生理鹽水。術后觀察大鼠一般情況，于術后4、8、24、72 h 采用Longa 評分法行神經行為學評價后，處死大鼠取右側腦組織，采用Western blot 及免疫組織化學染色檢測缺氧誘導因子1α（hypoxia inducible factor 1α，HIF-1α）和活化的半胱天冬氨酸酶3（cleaved caspase 3，CC3）蛋白表達；TUNEL 法檢測原位神經元凋亡情況。 結 果 術后大鼠均存活至實驗完成。與假手術組比較，模型組和Rg1 組大鼠均出現不同程度的神經行為學異常；兩組Longa 評分與假手術組比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）；術后72 h 時Rg1 組與模型組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。Western blot 檢測顯示，各組各時間點均有HIF-1α、CC3 蛋白表達；模型組及Rg1 組各時間點HIF-1α 蛋白表達均較假手術組有明顯增加（P lt; 0.05），Rg1 組均較同一時間點模型組有明顯上調（P lt; 0.05）。模型組各時間點CC3 蛋白表達均較假手術組明顯增加（P lt; 0.05），Rg1 組僅術后4 h 與假手術組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）；Rg1 組各時間點均較模型組明顯下調（P lt; 0.05）。免疫組織化學染色可見HIF-1α 蛋白、CC3 蛋白定位主要集中在胞核及胞漿，各組各時間點蛋白表達強度與Western blot 觀察結果一致。TUNEL 染色各組術后各時間點均見陽性細胞；模型組各時間點凋亡細胞數均較假手術組明顯增加（P lt; 0.05），Rg1 組術后4、8 h 與假手術組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）；Rg1 組在8、24 及72 h 凋亡細胞數目較模型組明顯減少（P lt; 0.05）。 結論 Rg1 通過增強并穩(wěn)定HIF-1α 信號途徑，從而抑制半胱天冬氨酸酶3 的活化，在新生鼠HIBD 中發(fā)揮抗凋亡作用。
目的探討人參皂苷Rg1在新生鼠缺氧缺血性腦損傷（hypoxia ischemia brain damage，HIBD）中的抗凋亡作用，分析可能的信號通路機制。 方法10日齡SPF級SD大鼠48只，體質量17～21 g，隨機分為4組（n=12），假手術組、模型組（HI組）、模型+人參皂甙Rg1組（HI+Rg1組）、模型+人參皂甙Rg1+U0126干預組（HI+Rg1+U0126組）。HI組、HI+Rg1組及HI+Rg1+U0126組大鼠采用結扎單側頸總動脈并低氧通氣方法制備HIBD模型；假手術組僅分離右側頸總動脈。HI+Rg1+U0126組于造模前1 h右側腦室注射5 μL含U0126（25 μg/kg）的PBS，其余3組同法注射5 μL PBS。HI+Rg1組及HI+Rg1+U0126組于術后即刻腹腔內注射0.1 mL含Rg1（40 mg/kg）的生理鹽水；HI組和假手術組注射0.1 mL生理鹽水。術后4、24 h處死各組大鼠，取右側半球皮層和海馬腦組織，采用Western blot及免疫組織化學染色檢測胞外信號相關蛋白激酶1/2（extracellular signalrelated protein kinase 1/2，Erk1/2）及磷酸化Erk1/2（phospho-Erk1/2，p-Erk1/2）、缺氧誘導因子1α（hypoxia induciblefactor 1α，HIF-1α）和活化的半胱天冬氨酸酶3（cleaved Caspase-3，CC3）蛋白表達；TUNEL法檢測原位神經元凋亡情況。 結果Western blot檢測示，各時間點各組均有Erk1/2、p-Erk1/2、HIF-1α、CC3蛋白表達；術后4、24 h，HI組HIF-1α、CC3蛋白表達均較假手術組明顯增加（P＜0.05）；術后4 h，HI組p-Erk1/2蛋白表達較假手術組明顯增加（P＜0.05）；術后4、24 h，HI+Rg1組p-Erk1/2及HIF-1α蛋白表達較HI組明顯上調（P＜0.05），CC3蛋白表達則明顯下調（P＜0.05）；術后4、24 h，HI+Rg1+U0126組p-Erk1/2及HIF-1α蛋白表達較HI+Rg1組明顯下調（P＜0.05），CC3蛋白表達則明顯上調（P＜0.05）。各時間點各組間Erk1/2蛋白表達比較，差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。免疫組織化學染色可見HIF-1α蛋白、CC3蛋白定位主要集中在細胞核及細胞質，Erk1/2、p-Erk1/2蛋白定位主要集中在細胞質，蛋白表達強度與Western blot結果一致。TUNEL染色示術后4、24 h，HI組神經元凋亡指數較假手術組明顯上升（P＜0.05）；術后24 h，HI+Rg1組神經元凋亡指數較HI組及HI+Rg1+U0126組明顯降低（P＜0.05）。 結論Rg1通過Erk1/2信號通路增強并穩(wěn)定HIBD誘導的HIF-1α表達，從而抑制Caspase-3活化，減輕新生鼠HIBD后神經元凋亡。