目的 構(gòu)建重組人BMP-2（recombinant human BMP-2，rhBMP-2）修飾的β 磷酸三鈣（β tricalcium phosphate，β-TCP）/ 膠原生物支架材料，初步探討其在牙組織工程中發(fā)揮的作用，評價(jià)其作為牙組織工程支架材料的可行性。 方法 將納米級β-TCP 粉末與膠原在強(qiáng)堿性水溶液中復(fù)合，制備β-TCP/ 膠原生物支架材料，并與rhBMP-2 復(fù)合，制備牙組織工程支架材料。SPF 級8 ～ 10 周齡SD 大鼠46 只，雄性34 只，雌性12 只，體重250 ～ 300 g。體視顯微鏡下分離新生SD 大鼠的下頜骨，取牙胚消化成細(xì)胞懸液，與支架材料復(fù)合培養(yǎng)制備組織工程牙胚。通過掃描電鏡觀察、細(xì)胞黏附率測定和MTT 測定細(xì)胞增殖情況評價(jià)支架材料對牙胚細(xì)胞體外生長的影響。將組織工程牙胚植入SD 大鼠腎被膜下作為實(shí)驗(yàn)組（n=12），另分別植入單獨(dú)牙胚細(xì)胞團(tuán)塊（細(xì)胞對照組，n=12）及單獨(dú)支架材料（材料對照組，n=4）作為對照，4、8 周時(shí)取出標(biāo)本行大體及組織學(xué)觀察。 結(jié)果 掃描電鏡示β-TCP/ 膠原生物支架材料呈疏松多孔狀，質(zhì)地柔軟，親水性良好；復(fù)合培養(yǎng)3 d 后牙胚細(xì)胞可緊密貼附于支架材料，生長狀態(tài)良好。牙胚細(xì)胞接種至支架材料上經(jīng)4、8、12 h 孵育后，細(xì)胞黏附率分別為27.20% ± 2.37%、44.52% ± 1.87%、73.81% ± 4.15%。MTT 檢測示牙胚細(xì)胞在β-TCP/ 膠原生物支架材料上的增殖情況與未放置支架材料相似，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。各組植入物移植于大鼠腎被膜下4、8 周后大體觀察可見白色鈣化物形成；植入后4 周，實(shí)驗(yàn)組鏡下可見明顯牙樣形態(tài)及典型的釉質(zhì)和牙本質(zhì)樣結(jié)構(gòu)形成，細(xì)胞對照組可見釉質(zhì)和牙本質(zhì)樣結(jié)構(gòu)，但排列相對紊亂；植入后8 周，實(shí)驗(yàn)組釉質(zhì)及牙本質(zhì)樣結(jié)構(gòu)較4 周成熟，層次也更加清晰，細(xì)胞對照組也可見較為成熟的釉質(zhì)和牙本質(zhì)樣結(jié)構(gòu)；植入后4、8 周，材料對照組均未見牙樣結(jié)構(gòu)形成。 結(jié) 論 rh BMP-2 修飾的β-TCP/ 膠原生物支架材料與牙胚細(xì)胞生物相容性良好，可作為牙組織工程支架材料的良好選擇。
目的 探討改良胸鎖乳突肌皮瓣修復(fù)口腔頜面部腫瘤切除術(shù)后軟組織缺損的臨床效果及預(yù)后。 方 法 2001 年4 月－ 2007 年1 月，對43 例頜面部惡性腫瘤根治術(shù)后軟組織缺損患者采用同期改良胸鎖乳突肌皮瓣修復(fù)。其中男31 例，女12 例；年齡25 ～ 76 歲，平均58.5 歲。病程25 d ～ 14 個(gè)月，平均4.5 個(gè)月。其中高分化鱗癌27 例，中、低分化鱗癌14 例，橫紋肌肉瘤1 例，腺樣囊性癌1 例。發(fā)病部位：舌25 例，口底11 例，下牙齦4 例，頰黏膜3 例。腫瘤臨床分期：Ⅰ期3 例，Ⅱ期13 例，Ⅲ期7 例，Ⅳ期20 例。腫瘤切除后軟組織缺損范圍及術(shù)中切取皮瓣范圍均為4 cm ×3 cm ～ 8 cm × 6 cm。觀察術(shù)后皮瓣的生長及傷口愈合情況，并隨訪術(shù)后患者吞咽、張口功能恢復(fù)情況。 結(jié)果 術(shù)后1 周3 例患者出現(xiàn)遠(yuǎn)端皮瓣1/4 缺血性壞死，經(jīng)抗炎治療及局部沖洗換藥后Ⅱ期愈合；其余皮瓣成活良好。供區(qū)2 例感染伴積液，給予切開引流后Ⅱ期愈合；其余供區(qū)切口Ⅰ期愈合。術(shù)后48 h 未見皮瓣出現(xiàn)動(dòng)、靜脈危象。39 例獲隨訪，隨訪時(shí)間6 個(gè)月～ 6 年。3 例頰黏膜癌患者的張口度均恢復(fù)到2 指以上。術(shù)后24 例舌癌患者吞咽及發(fā)音功能良好；3 例需進(jìn)軟食，余均可進(jìn)普食。26 例隨訪超過2 年者可見皮瓣上皮化生為口腔黏膜。4 例術(shù)后6 個(gè)月、2 例術(shù)后1 年腫瘤復(fù)發(fā)死亡。2 例術(shù)后6 個(gè)月同側(cè)頸部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移復(fù)發(fā)，再次手術(shù)治療后存活至今。術(shù)后2 年生存率為85%。 結(jié)論 改良胸鎖乳突肌皮瓣修復(fù)口腔頜面部腫瘤切除術(shù)后軟組織缺損，可及時(shí)恢復(fù)口腔頜面部功能，提高患者生存質(zhì)量。
目的 比較采用兩種不同方法接種的hBMSCs 在生物珊瑚支架中的三維空間分布和基因表達(dá)。 方法 采用傳統(tǒng)接種法（A 組）和纖維蛋白凝膠接種法（B 組）構(gòu)建hBMSCs 和生物珊瑚支架復(fù)合體。A 組孵育3 h，B 組孵育30 min 后檢測兩組細(xì)胞接種效率。培養(yǎng)后2、7、14、21 d，兩組分別取材行DAPI 染色后，熒光顯微鏡觀察，采用AxioVision 圖像分析軟件測量每個(gè)切片10 倍物鏡視野中的細(xì)胞數(shù)量，以切片的不同水平區(qū)域（從表面到底部為L1 ～ L5）和垂直區(qū)域（從中心到邊緣）比較兩組細(xì)胞分布情況；采用實(shí)時(shí)熒光RT-PCR 檢測成骨分化基因骨凝集素（osteonectin，ON）、核心結(jié)合因子α1（core binding factor α1，Cbfα1）和骨鈣素（osteocalcin，OC）表達(dá)。 結(jié)果 B 組細(xì)胞接種效率為88.32% ± 4.20%，明顯高于A組66.51% ± 12.33%（P lt; 0.01）。培養(yǎng)后2 d，兩組細(xì)胞水平區(qū)域分布由L1 ～ L4 逐漸減少（P lt; 0.05）；垂直區(qū)域細(xì)胞數(shù)目比較，A 組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05），B 組差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；兩組間各成骨分化基因表達(dá)比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。培養(yǎng)后 7 d，A 組細(xì)胞數(shù)目較2 d 時(shí)逐步減少，各水平區(qū)域間細(xì)胞數(shù)目比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05），而B 組細(xì)胞數(shù)目和各成骨分化基因表達(dá)量迅速增加，各水平區(qū)域細(xì)胞數(shù)目趨于平衡，細(xì)胞分布均勻（P gt; 0.05），ON 和Cbfα1 基因表達(dá)量明顯高于A 組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt; 0.05）。培養(yǎng)后14 d，A 組各水平及垂直區(qū)域內(nèi)的細(xì)胞數(shù)目均較7 d 時(shí)急速減少（P lt; 0.05），B 組細(xì)胞增殖良好且細(xì)胞總數(shù)與7 d 時(shí)相近；B 組OC 基因表達(dá)量達(dá)峰值，兩組間各基因表達(dá)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Plt; 0.05）。培養(yǎng)后21 d，兩組各水平區(qū)域細(xì)胞數(shù)目和兩組間各基因表達(dá)比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；兩組各垂直區(qū)域細(xì)胞數(shù)目比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt; 0.05）。培養(yǎng)后714、21 d，B 組大部分區(qū)域細(xì)胞數(shù)目均較A 組多，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 通過纖維蛋白凝膠接種較傳統(tǒng)方法接種可使hBMSCs 在支架中空間分布更均勻，能達(dá)到更快的細(xì)胞增殖和更有效的成骨分化。
【摘 要】 目的 探討B(tài)MP-2 與膠原復(fù)合材料在骨骼肌中異位成骨預(yù)構(gòu)骨肌皮瓣，修復(fù)自體下頜骨和皮膚復(fù)合缺損的可行性。 方法 4 ～ 6 周齡新西蘭白兔24 只，體重2.0 ～ 2.5 kg，雌雄不拘，隨機(jī)分成3 組，即實(shí)驗(yàn)組、對照組和空白組（n=8）。將BMP-2 與膠原復(fù)合，植入兔背闊肌，預(yù)構(gòu)異位新生骨組織，2、4、6 周后行X 線片、ALP、Von Kossa、CD31 免疫組織化學(xué)血管標(biāo)記及組織學(xué)觀察。6 周后，實(shí)驗(yàn)組動(dòng)物于同側(cè)下頜骨體部制備2 cm × 3 cm 皮膚缺損，并形成直徑8 mm 洞穿性骨缺損；以同側(cè)胸背動(dòng)脈體表投影為皮瓣縱軸，設(shè)計(jì)含預(yù)制新骨組織的背闊肌肌皮瓣，帶蒂移位修復(fù)下頜骨及皮膚復(fù)合缺損。對照組和空白組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物下頜骨體部均造成直徑8 mm 的洞穿性骨缺損，對照組將復(fù)合組織瓣中的骨性部分游離移植修復(fù)缺損；空白組缺損不予修復(fù)。術(shù)后6 周，各組取材行四環(huán)素?zé)晒馊旧 線攝片、組織學(xué)觀察以及新骨計(jì)量等，觀察骨和皮膚復(fù)合缺損修復(fù)效果。 結(jié)果 BMP-2 與膠原復(fù)合材料在兔背闊肌中4 ～ 6 周成骨，膠原材料于植入后3 ～ 5 周降解，成骨過程以軟骨成骨為主，新骨形態(tài)為編織骨，可見明顯的微血管分布。修復(fù)自體下頜骨缺損6 周后，實(shí)驗(yàn)組皮膚及骨缺損均愈合良好，對照組缺損修復(fù)區(qū)基本骨化，空白組尚殘留大塊骨缺損；實(shí)驗(yàn)組、對照組及空白組新骨計(jì)量分別為（1.594 ± 0.674）、（0.801 ± 0.036）和（0.079 ± 0.010）mm2，組間兩兩比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié) 論 預(yù)構(gòu)的骨肌皮瓣帶血管蒂移位修復(fù)兔自體下頜骨和皮膚復(fù)合缺損具有可行性和明顯優(yōu)勢，有望成為一種血管化骨移植的供區(qū)預(yù)構(gòu)形式。
目的探討采用口內(nèi)入路切除下頜骨良性腫瘤同期自體骨移植修復(fù)重建術(shù)的臨床療效。 方法2009年1月－2012年9月，收治15例下頜骨良性腫瘤患者。其中男7例，女8例；年齡18～45歲，平均30歲。病理診斷為成釉細(xì)胞瘤11例，牙源性角化囊腫3例，黏液瘤1例。病變?nèi)睋p部位按Urken’s CRBS分類：下頜骨同側(cè)體部（B型）3例，升支（R型）3例，體部+升支（BR型）9例。手術(shù)均采用口內(nèi)入路（1例因病變部位至乙狀切跡平面，在耳前行輔助切口）。分別采用以計(jì)算機(jī)輔助設(shè)計(jì)/計(jì)算機(jī)輔助制造技術(shù)構(gòu)建的下頜骨模型上彎制重建鈦板（9例）或術(shù)中直接按頜骨形狀彎制重建鈦板（6例）。切除下頜骨腫瘤后將彎制重建鈦板原位固定，根據(jù)骨缺損情況分別采用自體髂骨（11例）或血管化腓骨瓣（4例）移植修復(fù)。6例保留下齒槽神經(jīng)。 結(jié)果術(shù)后14例切口Ⅰ期愈合；1例發(fā)生植骨區(qū)感染，經(jīng)相應(yīng)處理后Ⅱ期愈合。15例均獲隨訪，隨訪時(shí)間1～4年，平均2.5年。末次隨訪時(shí)，患者功能均恢復(fù)良好，無面神經(jīng)損傷表現(xiàn)，余留牙列咬合關(guān)系基本維持術(shù)前狀態(tài)；咀嚼功能滿意；開口度30～35 mm，平均33 mm；吞咽及語言功能正常。口外僅有輔助切口及穿頰器輕微瘢痕，患者對面部外形滿意。6例保留下齒槽神經(jīng)患者術(shù)后下唇麻木癥狀緩解。隨訪期間均無復(fù)發(fā)。 結(jié)論經(jīng)口內(nèi)入路切除下頜骨良性腫瘤同期行自體骨植骨修復(fù)重建術(shù)后面部無明顯瘢痕，幾乎不損傷面神經(jīng)，外形恢復(fù)良好，是可靠的美容性手術(shù)入路和手術(shù)重建方案。
目的探討計(jì)算機(jī)輔助導(dǎo)航系統(tǒng)（computer assisted navigation system,CANS）在下頜骨缺損修復(fù)重建中的效果。 方法2012年4月－2014年9月，收治8例下頜骨良性病變切除后一期行修復(fù)重建的患者。男5例，女3例；年齡22～50歲，平均34.5歲。造釉細(xì)胞瘤4例，牙源性角化囊腫3例，髁狀突骨瘤1例。病變切除后缺損部位參照CRABS方法分類：右側(cè)CRAB型、左側(cè)RABS型、左側(cè)CR型、右側(cè)RAB型、左側(cè)C型、右側(cè)RABS+左側(cè)S型各1例，右側(cè)AB型2例。術(shù)前戴預(yù)制的咬合板行頜面部CT及常規(guī)供骨區(qū)CT檢查，應(yīng)用BrainLab Iplan軟件及Surgicase CMF 5.0軟件對頜面部等CT數(shù)據(jù)分割、三維重建、術(shù)前設(shè)計(jì)及虛擬手術(shù)，術(shù)中利用模型外科技術(shù)切除下頜骨腫瘤，采用BrainLab導(dǎo)航系統(tǒng)實(shí)時(shí)驗(yàn)證下頜角和髁狀突等部位的定位。術(shù)后利用Geomagic studio 12.0軟件通過二維測量和三維色譜偏差分析進(jìn)行手術(shù)精確度評價(jià)；隨訪觀察顏面部對稱性、并發(fā)癥和復(fù)發(fā)情況。 結(jié)果8例患者均順利完成術(shù)前設(shè)計(jì)、模擬手術(shù)和實(shí)時(shí)導(dǎo)航手術(shù)。術(shù)后CT復(fù)查和三維色譜偏差分析示截骨部位、切除范圍、重建外形與術(shù)前設(shè)計(jì)基本一致，下頜角點(diǎn)和髁狀突外極點(diǎn)在術(shù)前設(shè)計(jì)復(fù)位點(diǎn)與術(shù)后CT模型上就位點(diǎn)距離分別相差（1.83±0.19）mm和（1.61±0.24）mm。術(shù)后患者均獲隨訪，隨訪時(shí)間2～6個(gè)月，平均3.5個(gè)月。除肋骨移植患者張口度輕度受限外，余未見明顯并發(fā)癥?；颊呙娌繉ΨQ性良好，隨訪期間未見腫瘤復(fù)發(fā)。 結(jié)論CANS可顯著提高下頜骨缺損修復(fù)重建術(shù)的精確性，有效減少并發(fā)癥，恢復(fù)面部對稱性，可有效輔助下頜骨缺損修復(fù)重建手術(shù)。