目的 制備WO-1膠原生物衍生骨復(fù)合支架材料，檢測(cè)其理化性質(zhì)及力學(xué)強(qiáng)度，為骨組織工程研究和應(yīng)用提供可選擇的支架材料。方法 將同種異體骨、I型膠原、WO-1進(jìn)行系列理化處理，制成單純生物衍生骨材料、膠原生物衍生骨復(fù)合材料及WO-1膠原生物衍生骨復(fù)合材料。制備后的材料行大體及掃描電鏡觀察其形貌特征，X線衍射分析材料成分，并對(duì)材料的力學(xué)性能進(jìn)行分析測(cè)定。結(jié)果 單純生物衍生骨材料具有天然骨的網(wǎng)狀孔隙系統(tǒng)；膠原生物衍生骨復(fù)合材料具有天然骨的網(wǎng)狀孔隙系統(tǒng)，微孔表面覆蓋膠原膜；WO-1膠原生物衍生組織工程骨復(fù)合支架材料具有骨組織的天然網(wǎng)狀孔隙系統(tǒng)，微孔表面可見(jiàn)膠原膜覆蓋。3種材料的孔徑依次為90～700 μm、75～600 μm、80～600 μm；孔隙率依次為87.96%、80.47%、84.29%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；其主要成分為羥基磷灰石，彎曲強(qiáng)度和壓縮強(qiáng)度無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。結(jié)論 WO.1膠原生物衍生骨復(fù)合材料與其它兩種材料相同，可作為一種有效的天然組織工程骨支架材料。
目的采用低溫沉積技術(shù) 3D 打印制備聚己內(nèi)酯（polycaprolactone，PCL）/Ⅰ型膠原組織工程半月板支架（以下簡(jiǎn)稱 PCL/Ⅰ型膠原半月板支架），探討其理化特性。方法制備 15%PCL/4%Ⅰ型膠原溶液及 15%PCL 溶液，利用低溫沉積技術(shù) 3D 打印制備 PCL/Ⅰ型膠原半月板支架及 PCL 半月板支架。大體及掃描電鏡觀察支架形態(tài)及微觀結(jié)構(gòu)，生物力學(xué)試驗(yàn)測(cè)量支架壓縮模量及拉伸模量，紅外光譜分析支架成分，測(cè)量支架表面接觸角；將兩種支架及其浸提液分別與兔半月板細(xì)胞復(fù)合培養(yǎng)，細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒 8（cell counting kit 8，CCK-8）檢測(cè)細(xì)胞增殖，并以正常培養(yǎng)細(xì)胞作對(duì)照；掃描電鏡觀察支架-細(xì)胞復(fù)合物中細(xì)胞黏附及生長(zhǎng)情況。結(jié)果大體及掃描電鏡觀察顯示，兩種支架均具有取向的三維微觀結(jié)構(gòu)及孔隙，但 PCL/Ⅰ型膠原半月板支架表面更粗糙。生物力學(xué)測(cè)試，兩種支架壓縮模量及拉伸模量比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。紅外光譜分析提示，PCL/Ⅰ型膠原半月板支架中 PCL 和Ⅰ型膠原成功混合。PCL/Ⅰ型膠原半月板支架表面接觸角為（83.19±7.49）°，較 PCL 半月板支架（111.13±5.70）° 顯著減小（t=6.638，P=0.000）。CCK-8 檢測(cè)顯示，隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，兩種支架浸提液培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量呈遞增趨勢(shì)，與對(duì)照組比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。支架-細(xì)胞復(fù)合物掃描電鏡觀察示，PCL/Ⅰ型膠原半月板支架表面黏附細(xì)胞多于 PCL 半月板支架。結(jié)論低溫沉積技術(shù) 3D 打印制備的 PCL/Ⅰ型膠原半月板支架具有優(yōu)良的理化學(xué)性能，無(wú)細(xì)胞毒性，有望作為半月板組織工程支架材料。
目的采用低溫沉積 3D 打印技術(shù)制備聚乳酸-羥基乙酸共聚物［poly（lactic-co-glycolic acid），PLGA］支架，復(fù)合脫細(xì)胞軟骨細(xì)胞外基質(zhì)（decellularized articular cartilage extracellular matrix，DACECM）制備 PLGA/DACECM 組織工程軟骨支架，探討其理化特性。方法利用低溫沉積 3D 打印技術(shù)制備 PLGA 支架。采用改良式物理、化學(xué)脫細(xì)胞方法制備 DACECM 混懸液。利用冷凍干燥和物理化學(xué)法交聯(lián)技術(shù)制備 DACECM 取向支架，同法將 DACECM 混懸液與 PLGA 支架復(fù)合制備 PLGA/DACECM 取向支架。通過(guò)大體觀察、掃描電鏡觀察 3 種支架宏觀、微觀結(jié)構(gòu)，組織學(xué)及免疫組織化學(xué)染色定性分析 DACECM 取向支架成分，生物力學(xué)試驗(yàn)檢測(cè) 3 種支架壓縮模量。于 SD 大鼠皮下包埋 3 種支架，HE 染色觀察免疫排斥反應(yīng)。分離培養(yǎng)新西蘭大白兔軟骨細(xì)胞，制備 3 種細(xì)胞-支架復(fù)合物，掃描電鏡觀察細(xì)胞在支架上的生長(zhǎng)黏附情況。取鼠 L-929 成纖維細(xì)胞分別于 3 種支架浸提液進(jìn)行培養(yǎng)，以 DMEM 培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞作為對(duì)照，細(xì)胞計(jì)數(shù)試劑盒 8（cell counting kit 8，CCK-8）法檢測(cè)細(xì)胞增殖情況。 結(jié)果大體觀察和掃描電鏡觀察示，PLGA 支架表面較光滑，可見(jiàn)大孔；DACECM 取向支架表面粗糙，為疏松多孔相互連通的三維立體結(jié)構(gòu)；PLGA/DACECM 取向支架表面粗糙，大孔與小孔相互連通，具有垂直三維立體結(jié)構(gòu)。組織學(xué)及免疫組織化學(xué)定性分析顯示，DACECM 脫細(xì)胞完全，保留了軟骨基質(zhì)的糖胺聚糖和Ⅱ型膠原蛋白成分。生物力學(xué)檢測(cè)示，DACECM 取向支架壓縮模量顯著低于其余 2 種支架（P<0.05），PLGA 支架和 PLGA/DACECM 取向支架間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。SD 大鼠皮下包埋實(shí)驗(yàn)示，DACECM 取向支架和 PLGA/DACECM 取向支架的免疫排斥反應(yīng)明顯低于 PLGA 支架。細(xì)胞-支架復(fù)合物掃描電鏡觀察示，軟骨細(xì)胞在 PLGA 支架上未見(jiàn)明顯黏附，大量軟骨細(xì)胞在 PLGA/DACECM 取向支架和 DACECM 取向支架表面黏附、生長(zhǎng)。CCK-8 檢測(cè)示，隨培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)，各組細(xì)胞數(shù)量均呈遞增趨勢(shì)，各時(shí)間點(diǎn)組間吸光度（A）值比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論P(yáng)LGA/DACECM 取向支架具有無(wú)細(xì)胞毒性、優(yōu)良的理化性能，有望成為一種組織工程軟骨支架材料。