目的 構(gòu)建受甲胎蛋白（AFP）增強(qiáng)子和白蛋白（Alb）啟動(dòng)子調(diào)控的含有血管抑制素（angiostatin）K5序列的真核表達(dá)載體，通過基因轉(zhuǎn)染，將angiostatin K5基因?qū)敫伟┘?xì)胞，觀察angiostatin K5的表達(dá)。方法 用RTPCR法從正常人真核細(xì)胞擴(kuò)增出angiostatin K5基因，將AFP增強(qiáng)子和Alb啟動(dòng)子調(diào)控序列定向克隆入真核表達(dá)載體pcDNA3.1，并將angiostatin K5 cDNA置于上述調(diào)控序列之下，從而構(gòu)建得到重組真核表達(dá)載體pcDNA3.1AFABangiostatin K5His。利用細(xì)胞培養(yǎng)、脂質(zhì)體介導(dǎo)的細(xì)胞轉(zhuǎn)染，將angiostatin K5基因?qū)敫伟┘?xì)胞。利用SDSPAGE和Western blot法檢測(cè)肝癌細(xì)胞中angiostatin K5的表達(dá)。結(jié)果 通過酶切鑒定及DNA測(cè)序證實(shí)目的真核表達(dá)載體pcDNA3.1AFABangiostatin K5His與預(yù)期的結(jié)果相同。SDSPAGE及Western blot分析證明，angiostatin K5在肝癌細(xì)胞中得以表達(dá)。結(jié)論 構(gòu)建的肝癌特異性重組真核表達(dá)載體可增加對(duì)AFP陽(yáng)性肝癌細(xì)胞的治療的特異性，并用于實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的特異性血管抑制作用。
目的觀察玻璃體腔注射雷珠單抗(IVR)對(duì)增生型糖尿病視網(wǎng)膜病變(PDR)患眼微創(chuàng)玻璃體切割手術(shù)及手術(shù)后視力的影響。 方法前瞻性隨機(jī)對(duì)照研究。臨床確診為PDR并行微創(chuàng)玻璃體切割手術(shù)治療的92例患者92只眼納入研究。手術(shù)前7~14 d行IVR治療者48只眼作為藥物聯(lián)合治療組;未行IVR治療者44只眼作為單純手術(shù)治療組。兩組患眼均由同一醫(yī)生完成微創(chuàng)玻璃體切割手術(shù)。觀察記錄兩組患眼手術(shù)中電凝及眼內(nèi)填充物使用率、醫(yī)源性裂孔發(fā)生率以及手術(shù)時(shí)間。手術(shù)后平均隨訪時(shí)間(14.3±5.2)個(gè)月。對(duì)比分析兩組患眼手術(shù)后最小分辨角對(duì)數(shù)(logMAR)最佳矯正視力(BCVA)和并發(fā)癥的發(fā)生情況。 結(jié)果藥物聯(lián)合治療組、單純手術(shù)治療組手術(shù)時(shí)間分別為(59.4±18.5)、(74.6±16.2) min。藥物聯(lián)合治療組手術(shù)時(shí)間較單純手術(shù)治療組明顯縮短,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=-2.703,P<0.05)。藥物聯(lián)合治療組手術(shù)中電凝使用率(χ2=8.039)、硅油(χ2=4.619)及惰性氣體(χ2=4.290)填充率、醫(yī)源性裂孔發(fā)生率(χ2=4.330)均較單純手術(shù)治療組明顯下降,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。藥物聯(lián)合治療組、單純手術(shù)治療組手術(shù)后平均logMAR BCVA分別為0.83±0.44、1.37±0.53;均較手術(shù)前明顯提高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=3.257、3.012,P<0.05)。藥物聯(lián)合治療組手術(shù)后平均logMAR BCVA較單純手術(shù)治療組明顯提高,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=2.972,P<0.05)。藥物聯(lián)合治療組、單純手術(shù)治療組手術(shù)后玻璃體再積血發(fā)生率分別為2.1%、9.1%。兩組間手術(shù)后玻璃體再積血發(fā)生率比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.741,P<0.05)。所有患眼均未發(fā)生脈絡(luò)膜脫離、視網(wǎng)膜脫離、眼內(nèi)炎等并發(fā)癥。 結(jié)論P(yáng)DR患眼微創(chuàng)玻璃體切割手術(shù)前IVR可縮短手術(shù)時(shí)間,減少手術(shù)中電凝、眼內(nèi)填充物的使用率和醫(yī)源性損傷,提高患眼視力。