目的 觀察人工關(guān)節(jié)磨損產(chǎn)物 Co2+、Cr3+ 刺激下人單核細胞生物反應過程中TNF-α 的表達，以及人單核細胞凋亡與Caspase-3 的變化，探討Co2+、Cr3+ 引發(fā)假體周圍骨溶解的作用機制。 方法 將CoCl2 粉末與CrCl3 粉末溶于無菌注射用水，分別配制成濃度為10 mg/L 和500 mg/L 的CoCl2 溶液和CrCl3 溶液。從健康志愿者外周血分離培養(yǎng)單核細胞，調(diào)整濃度為4 × 106 個/ 培養(yǎng)皿，根據(jù)培養(yǎng)液不同，分為3 組。A 組生理鹽水作為對照，B 組CoCl2 溶液，C 組CrCl3 溶液。于培養(yǎng)12、24 及48 h 后吸取細胞上清液，ELISA 法檢測TNF-α 含量，TUNEL 檢測細胞凋亡情況，比色法測定Caspase-3 活性。 結(jié)果 各時間點B、C 組TNF-α 含量及Caspase-3 活性均高于A 組（P lt; 0. 05），分別于24 h 及48 h達峰值。各時間點3 組均存在TUNEL 染色陽性細胞，細胞核固縮深染，細胞體積皺縮，胞膜完整。各時間點B、C 組細胞凋亡率與A 組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。Caspase-3 活性與細胞凋亡率成正相關(guān)（r=0.765）。 結(jié)論 Co2+、Cr3+均能刺激人單核細胞釋放TNF-α 并誘導其凋亡；細胞凋亡參與了假體周圍骨溶解的病理過程，且可能與Casepase-3的激活有關(guān)。
目的 金屬磨損產(chǎn)物對人工關(guān)節(jié)的無菌性松動有影響，通過觀察Co2+、Cr3+ 對小鼠成骨細胞凋亡、細胞周期以及在離子刺激下對成骨細胞分泌ALP 的影響，為防治人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后假體周圍骨溶解提供實驗依據(jù)。 方 法 體外培養(yǎng)小鼠顱骨成骨細胞MC3T3-E1 至第3 ～ 5 代，調(diào)整細胞密度至5 × 105 個/mL，根據(jù)干預方法不同將細胞分為兩組。實驗組：成骨細胞于含10%FBS 的α-MEM 培養(yǎng)基中培養(yǎng)，待細胞完全貼壁后，加入CoCl2 與CrCl3 混合溶液；對照組：成骨細胞于含10%FBS 的α-MEM 培養(yǎng)基中培養(yǎng)。于培養(yǎng)12、24、48 h 后，采用流式細胞儀檢測細胞凋亡率及周期分布，ELISA 法檢測培養(yǎng)上清液中ALP 含量。 結(jié)果 培養(yǎng)12、24、48 h，實驗組凋亡率分別為13.90% ± 0.52%、14.80% ± 0.41%、13.40% ± 0.26%，對照組分別為8.56% ± 0.31%、8.19% ± 0.24%、2.15% ± 0.11%，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。各時間點實驗組細胞G2M期分布比例明顯較對照組降低，G0G1 期分布比例較對照組增多，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。培養(yǎng)12、24、48 h，實驗組ALP 含量檢測吸光度（A）值分別為0.955 ± 0.052、0.624 ± 0.041、0.498 ± 0.026，對照組分別為1.664 ± 0.041、1.986 ± 0.024、2.192 ± 0.041，兩組比較差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 Co2+、Cr3+ 對成骨細胞的細胞周期分布有明顯影響，抑制其增殖，使細胞大部分處于G0G1 期，同時增加其凋亡率，抑制成骨細胞釋放ALP。