華西醫(yī)學(xué)期刊出版社
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找到 作者 包含"郝立松" 1條結(jié)果
  • 鼠胚胎干細胞誘導(dǎo)分化內(nèi)皮樣細胞

    目的 采用簡單貼壁培養(yǎng)方法誘導(dǎo)胚胎干細胞(embryonic stem cell,ESC)分化為內(nèi)皮樣細胞,為組織工程血管及細胞替代治療提供新的種子細胞。 方法 小鼠ESC 株SV129 按2 × 104 個/cm2 密度傳代培養(yǎng),采用ESC培養(yǎng)基添加1 000 U/mL 白血病抑制因子(leukaemia inhibitory factor,LIF)維持其未分化狀態(tài)。撤除LIF,ESC 懸浮培養(yǎng)形成擬胚體(embryoid body,EB),將培養(yǎng)第4 天的EB 置于含VEGF 的培養(yǎng)基中貼壁培養(yǎng),誘導(dǎo)分化。采用免疫組織化學(xué)染色、流式細胞儀分析、DiI 標(biāo)記的乙酰化低密度脂蛋白(1,1-dioctadecyl-3,3,3,3-tetramethylindocarbocyanine-labeled acetylated low density lipoprotein,DiI-Ac-LDL)攝取實驗以及透射電鏡檢查鑒定分化細胞的性質(zhì)。 結(jié)果 分化產(chǎn)生的內(nèi)皮樣細胞具有內(nèi)皮細胞形態(tài)特征,能攝取DiI-Ac-LDL。ESC 誘導(dǎo)分化培養(yǎng)產(chǎn)生的第15 代細胞免疫組織化學(xué)染色呈Flk-1 和CD31 陽性;流式細胞儀檢測ESC 傳至9 代后CD31 陽性細胞gt; 90%;透射電鏡可見懷布爾- 帕拉德體及內(nèi)皮細胞間緊密連接。 結(jié)論 采用簡單貼壁培養(yǎng)的方法,單獨使用VEGF 即可誘導(dǎo)ESC 分化為內(nèi)皮樣細胞。誘導(dǎo)培養(yǎng)方法操作簡便,經(jīng)濟實用,可為組織工程血管及細胞替代治療提供所需內(nèi)皮樣細胞

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:05 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
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