目的 對(duì)細(xì)菌來(lái)源的胞外囊泡(extracellular vesicles,EVs)所含生物活性物質(zhì)及其在介導(dǎo)細(xì)菌-細(xì)菌間和細(xì)菌-宿主間相互作用中的機(jī)制進(jìn)行綜述,并分析其對(duì)臨床植入物感染防治的指導(dǎo)意義。 方法 廣泛查閱近年來(lái)國(guó)內(nèi)外細(xì)菌來(lái)源 EVs 相關(guān)的文獻(xiàn),并進(jìn)行分析和總結(jié)。 結(jié)果 無(wú)論是革蘭陰性菌(G– 菌)還是革蘭陽(yáng)性菌(G+ 菌)都能分泌包含了多種生物活性物質(zhì)(如蛋白質(zhì)、脂質(zhì)、核酸和毒力因子)的 EVs,可以介導(dǎo)細(xì)菌-細(xì)菌間和細(xì)菌-宿主間的相互作用,并在細(xì)菌的致病機(jī)制和生物膜形成等方面發(fā)揮重要作用。 結(jié)論 細(xì)菌來(lái)源的 EVs 包含的生物活性物質(zhì),在細(xì)菌感染性疾病的致病機(jī)制中發(fā)揮著重要作用,深入研究和理解其致病機(jī)制,可以為臨床早期診斷、預(yù)防和治療植入物感染等提供新思路。但目前該領(lǐng)域研究還處于初級(jí)階段,相關(guān)機(jī)制尚需深入研究。
目的 研究利用海藻酸鈉水凝膠和SIS 復(fù)合作為支架材料,接種軟骨細(xì)胞構(gòu)建組織工程軟骨修復(fù)兔全層關(guān)節(jié)軟骨缺損的效果。 方法 采用機(jī)械法和去垢劑- 酶消化法制備SIS。取8 只2 ~ 3 周齡新西蘭白兔,肱骨頭和股骨髁負(fù)重面全層關(guān)節(jié)軟骨,體外培養(yǎng)軟骨細(xì)胞。將常規(guī)擴(kuò)增培養(yǎng)的第4 代軟骨細(xì)胞用海藻酸鈉稀釋,軟骨細(xì)胞濃度為(5 ~ 7)× 107 個(gè)/mL,均勻涂刷于SIS 表面,制備軟骨細(xì)胞- 海藻酸鈉水凝膠-SIS 復(fù)合體。取6 月齡清潔級(jí)新西蘭白兔40 只,體重3.0 ~ 3.5 kg,根據(jù)處理方法不同隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組(n=20),建立單側(cè)膝關(guān)節(jié)4 mm × 4 mm 全層軟骨缺損模型(左右不限)。實(shí)驗(yàn)組將復(fù)合體通過(guò)逐層疊加法置于缺損處,構(gòu)建組織工程軟骨,表面縫合覆蓋一層SIS 薄膜將缺損完全填充;對(duì)照組以單純海藻酸鈉水凝膠填充軟骨缺損、覆蓋SIS 薄膜縫合。術(shù)后觀察動(dòng)物一般情況,于術(shù)后1、3、5、7、9 個(gè)月,各組分別處死動(dòng)物,行大體和組織學(xué)觀察。 結(jié)果 由于麻醉死亡、切口感染和腹瀉死亡,8 只動(dòng)物被排除實(shí)驗(yàn),兩組分別余16 只動(dòng)物進(jìn)行取材觀察。術(shù)后1、3、5、7、9 個(gè)月,每組分別隨機(jī)處死3、3、3、3、4 只動(dòng)物。大體觀察和組織學(xué)Masson染色結(jié)果顯示:實(shí)驗(yàn)組術(shù)后1 個(gè)月,植入體表面的SIS 與宿主軟骨組織融合,邊界消失;3 個(gè)月,植入體部分軟骨化,界面融合;5 個(gè)月,植入體演變?yōu)槔w維軟骨;7 個(gè)月植入體內(nèi)軟骨組織中纖維排列接近宿主軟骨;9 個(gè)月植入體內(nèi)軟骨纖維排列紊亂,細(xì)胞代謝增生活躍。對(duì)照組觀察9 個(gè)月內(nèi)缺損無(wú)明顯修復(fù)。組織學(xué)染色結(jié)果經(jīng)圖像量化分析顯示,實(shí)驗(yàn)組各時(shí)間點(diǎn)缺損內(nèi)修復(fù)組織單位面積染色強(qiáng)度均較對(duì)照組顯著升高(P lt; 0.05);術(shù)后3、5、7 個(gè)月,實(shí)驗(yàn)組軟骨化程度逐漸增大(P lt; 0.05),9 個(gè)月較7 個(gè)月有所降低(P lt; 0.05)。 結(jié)論 利用軟骨細(xì)胞- 海藻酸鈉水凝膠-SIS 復(fù)合體表層縫合SIS 薄膜術(shù)構(gòu)建的組織工程軟骨原位修復(fù)兔軟骨缺損,能促進(jìn)軟骨組織再生,符合關(guān)節(jié)軟骨的生理性修復(fù)過(guò)程。
【摘 要】 目的 研究以聚-DL- 乳酸(poly-D,L-lactic acid,PDLLA)為載體復(fù)合rhBMP-2 接骨板的制備,并觀察其生物相容性,為臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。 方法 將rhBMP-2 以0.05 mg/ 板與PDLLA 真空負(fù)壓抽吸復(fù)合,制備復(fù)合rhBMP-2 的PDLLA 接骨板。新西蘭大白兔32 只,雌雄不限,體重(3.0 ± 0.5) kg。制備雙側(cè)尺骨中段2.5 mm 骨及骨膜缺損模型。取右側(cè)為實(shí)驗(yàn)組(n=32),采用復(fù)合rhBMP-2 的PDLLA 接骨板固定尺骨骨折處;左側(cè)為對(duì)照組(n=32),采用普通PDLLA 接骨板固定。于術(shù)后2、4、8 和12 周行大體、X 線片和組織學(xué)觀察,比較復(fù)合rhBMP-2 的PDLLA 接骨板與普通PDLLA 接骨板的生物相容性。 結(jié)果 復(fù)合rhBMP-2 的PDLLA 接骨板孔隙率為90%,孔徑150 μm,拉伸強(qiáng)度gt; 50 MPa,三點(diǎn)抗彎強(qiáng)度gt; 90 MPa,特性黏度1.6 dL/g(氯仿溶劑)。動(dòng)物切口均于1 ~ 2 周Ⅰ期愈合,動(dòng)物飲食及活動(dòng)恢復(fù)正常,無(wú)肢體活動(dòng)受限及跛行。兩種接骨板均固定牢固,骨折端無(wú)移位,材料逐步降解,實(shí)驗(yàn)組接骨板降解較對(duì)照組快。X 線片:實(shí)驗(yàn)組術(shù)后2、4、8 及12 周骨折修復(fù)的X 線阻射密度值分別為39.22 ± 2.48、48.79 ± 1.26、63.78 ± 1.78 及78.60 ± 1.25;對(duì)照組分別為33.83 ± 1.13、41.28 ± 1.25、55.23 ± 0.68 及66.54 ± 1.33,兩組各時(shí)間點(diǎn)比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.01)。組織學(xué)觀察,實(shí)驗(yàn)組接骨板與周圍組織的相容性、成骨速度、骨再生量、再生髓腔結(jié)構(gòu)等方面均優(yōu)于對(duì)照組;實(shí)驗(yàn)組術(shù)后2、4、8 及12 周骨缺損區(qū)新骨形成面積百分比分別為0.106% ± 0.015%、0.292% ± 0.019%、0.457% ± 0.048%及0.601% ± 0.037%;對(duì)照組分別為0、0.193% ± 0.019%、0.339% ± 0.029% 及0.574% ± 0.047%;不同時(shí)間點(diǎn)兩組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P lt; 0.05)。 結(jié)論 復(fù)合 rhBMP-2 的PDLLA 接骨板生物相容性良好,較之普通PDLLA 接骨板具有更良好骨誘導(dǎo)性和骨折修復(fù)能力。