目的 明確萎縮性骨不連組織中表達(dá)上調(diào)的數(shù)種微小RNA（micro RNA，miRNA）與其相應(yīng)靶基因mRNA、蛋白在hBMSCs 成骨分化過程中的表達(dá)變化趨勢(shì)和生物學(xué)功能。 方法 取自體髂骨植骨手術(shù)患者的髂骨骨髓血，采用密度梯度離心法分離培養(yǎng)hBMSCs。取第4 代hBMSCs 以成骨誘導(dǎo)培養(yǎng)液誘導(dǎo)成骨分化，分別提取0、12 h，1、2、4、7、14 d 時(shí)的細(xì)胞總RNA 和蛋白，進(jìn)行miRNA 的實(shí)時(shí)定量PCR（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）、相應(yīng)靶基因mRNA 的qRT-PCR 和蛋白Western blot 檢測(cè)。 結(jié)果 誘導(dǎo)hBMSCs 成骨分化時(shí)，成骨性靶基因堿性磷酸酶（alkaline phosphatase liver/bone/kidney，ALPL）、PDGF-α 多肽（PDGF-α polypeptide，PDGF-A）和BMP-2 的mRNA 和蛋白表達(dá)在多數(shù)時(shí)間點(diǎn)同對(duì)照（0 h）相比增加（BMP-2 在12 h 和1 d 時(shí)下降），1 ～ 7 d 變化最為顯著。不同時(shí)間點(diǎn)的miRNA、靶基因mRNA 和蛋白表達(dá)水平存在差異，其中hsa-miRNA-149 和hsa-miRNA-654-5p miRNA 含量的變化趨勢(shì)與各自靶基因ALPL 和BMP-2 的mRNA 及蛋白表達(dá)水平總體上成負(fù)相關(guān)（P lt; 0.05），hsa-miRNA-221 與其靶基因PDGF-A 的變化趨勢(shì)無明顯負(fù)相關(guān)關(guān)系（P gt; 0.05）。 結(jié)論 誘導(dǎo)hBMSCs 成骨分化過程中，hsa-miRNA-149 和hsa-miRNA-654-5p 對(duì)其相應(yīng)靶基因ALPL 和BMP-2 的mRNA 及蛋白存在密切調(diào)控關(guān)系。
目的探討微小RNA（microRNA,miRNA）在人脂肪來源干細(xì)胞（human adipose-derived stem cells,hADSCs）誘導(dǎo)成軟骨分化過程中的表達(dá)規(guī)律及其影響軟骨分化的可能機(jī)制。 方法取行抽脂術(shù)或其他腹部手術(shù)患者自愿捐贈(zèng)的脂肪組織，分離、培養(yǎng)hADSCs并鑒定。取第3代細(xì)胞成軟骨分化，倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，于誘導(dǎo)21 d行阿爾新藍(lán)染色觀察軟骨形成情況，誘導(dǎo)0、7、14、21 d行ELISA檢測(cè)成軟骨相關(guān)蛋白Ⅱ型膠原蛋白（collagen type Ⅱ,Col2a1）、蛋白聚糖（Aggrecan）、Col10a1以及硫酸軟骨素表達(dá)。采用基因芯片技術(shù)篩選hADSCs成軟骨誘導(dǎo)前及誘導(dǎo)后21 d差異性表達(dá)miRNA，并預(yù)測(cè)篩選出的miRNA靶基因。 結(jié)果實(shí)驗(yàn)成功培養(yǎng)hADSCs，經(jīng)成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)后，隨時(shí)間延長(zhǎng)可形成軟骨球；21 d阿爾新藍(lán)染色呈陽性；hADSCs成軟骨誘導(dǎo)后7、14、21d，Col2a1、Aggrecan、Col10a1及硫酸軟骨素表達(dá)水平均較成軟骨誘導(dǎo)前hADSCs顯著增高，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）?；蛐酒夹g(shù)共篩選出11個(gè)差異性表達(dá)miRNA，其中7個(gè)miRNA表達(dá)上調(diào)，4個(gè)miRNA表達(dá)下調(diào)。篩選出的成軟骨相關(guān)miRNAs預(yù)測(cè)靶基因可能參與了干細(xì)胞成軟骨分化、增殖、凋亡、細(xì)胞周期調(diào)控，以及介導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)級(jí)聯(lián)反應(yīng)和自我更新等。 結(jié)論實(shí)驗(yàn)篩選出11個(gè)成軟骨分化差異性表達(dá)超過2倍的miRNAs，并對(duì)其靶基因進(jìn)行預(yù)測(cè)，加深了對(duì)hADSCs成軟骨分化機(jī)制的理解，為定向控制hADSCs成軟骨分化及篩選組織工程改良種子細(xì)胞提供了理論依據(jù)。
目的 從微小 RNA-203（microRNA-203，miR-203）的生成、組織分布以及其與腫瘤的關(guān)系方面對(duì)其做一綜述。 方法 通過查閱并篩選國(guó)內(nèi)外的相關(guān)文獻(xiàn)，歸納并總結(jié)有關(guān) miR-203 的生成、組織分布及其與腫瘤關(guān)系的最新研究情況。 結(jié)果 盡管目前有關(guān) miR-203 在惡性腫瘤中的作用的研究結(jié)果令人振奮，但是只有 miR-203 的少部分生物學(xué)功能得到了鑒定，與之相對(duì)應(yīng)的下游靶基因的調(diào)控機(jī)制亦尚未完全闡明。 結(jié)論 隨著相關(guān)研究的不斷深入，miR-203 有可能在腫瘤的分級(jí)、分類、診斷、治療及預(yù)后方面起到更加積極的作用。
微 RNA-92a（microRNA-92a, miR-92a）是在進(jìn)化中高度保守的致病微 RNA，屬于微 RNA-17-92 基因簇成員，參與調(diào)控細(xì)胞增殖、凋亡及分化等生物學(xué)活動(dòng)。最近研究發(fā)現(xiàn)，miR-92a 表達(dá)紊亂與疾病發(fā)生相關(guān)，主要通過調(diào)控靶基因或靶蛋白發(fā)揮致病作用。目前與 miR-92a 相關(guān)的研究主要集中在惡性腫瘤領(lǐng)域，且已發(fā)現(xiàn)其高表達(dá)與癌細(xì)胞惡性及腫瘤對(duì)放化療敏感性降低相關(guān)。miR-92a 靶向靶基因或靶蛋白致病及其與放化療的關(guān)系，是近年來的研究熱點(diǎn)?；诖?，該文將 miR-92a 靶向靶基因或靶蛋白致病及其對(duì)化學(xué)治療影響的最新研究進(jìn)行了綜述，以期對(duì)臨床疾病診療提供靶標(biāo)。