【摘要】腫瘤多藥耐藥（multidrug resistance，MDR） 是制約腫瘤成功化療的重要因素之一，逆轉(zhuǎn)MDR治療惡性腫瘤是腫瘤治療的有效策略，但由于腫瘤MDR機(jī)制復(fù)雜，耐藥逆轉(zhuǎn)藥物作用靶點(diǎn)及機(jī)制單一，其治療效果并不理想。中藥抗腫瘤及耐藥逆轉(zhuǎn)具有高效低毒、多靶點(diǎn)、多階段性等作用特點(diǎn)及其他優(yōu)點(diǎn)，可針對腫瘤多藥耐藥的多種機(jī)制進(jìn)行有效逆轉(zhuǎn)。MDR亦是骨肉瘤化療的主要障礙，骨肉瘤及其耐藥有其特殊性，根據(jù)骨肉瘤耐藥機(jī)理及中藥耐藥逆轉(zhuǎn)機(jī)理，中藥有潛力開發(fā)成為低毒高效的骨肉瘤耐藥逆轉(zhuǎn)劑，可能成為骨肉瘤治療的理想藥物。
肺轉(zhuǎn)移(pulmonary metastasis, PM)切除術(shù)是治療骨與軟組織肉瘤術(shù)后肺轉(zhuǎn)移患者的重要方法之一。外科治療的徹底性與預(yù)后密切相關(guān)，但是也需要考慮多種因素。在制定治療方案時(shí)需要思量如下問題：術(shù)前評估手術(shù)指征與禁忌證，手術(shù)方式的選擇，保留肺組織的理念及淋巴結(jié)清掃的地位。關(guān)于隨著影像學(xué)技術(shù)改進(jìn)、化療和靶向藥物問世、放療方法革新，骨與軟組織肉瘤肺轉(zhuǎn)移的診療理念正在發(fā)生著轉(zhuǎn)變。
目的探討保留骨骺的轉(zhuǎn)移性骨生長術(shù)在兒童骨肉瘤保肢手術(shù)中的應(yīng)用及早期療效。 方法2010年3月－2011年3月，采用保留骨骺的轉(zhuǎn)移性骨生長術(shù)治療3例骨肉瘤患兒。其中男1例，女2例；年齡 10～14歲。病程2周～3個(gè)月。腫瘤位于股骨遠(yuǎn)端1例，脛骨近端2例。按照San-Julian影像學(xué)腫瘤分型均為Ⅱ型，Enneking骨腫瘤外科分型均為ⅡB型。行新輔助化療，手術(shù)截除部分骨骺，保留關(guān)節(jié)面下部分骨骺，予以Ilizarov支架外固定并進(jìn)行轉(zhuǎn)移性骨生長治療。術(shù)后病理學(xué)檢查確認(rèn)手術(shù)邊界是否安全，觀察傷口愈合情況，有無局部復(fù)發(fā)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移，骨轉(zhuǎn)移生長長度、速度、軸線、骨愈合，患肢長度、功能。 結(jié)果術(shù)后病理檢查示3例患兒均獲得安全手術(shù)邊界。1例股骨遠(yuǎn)端傷口Ⅰ期愈合；2例脛骨近端傷口愈合不良，換藥4周愈合。3例均獲隨訪，隨訪時(shí)間分別為12、18、24個(gè)月。隨訪期間無局部復(fù)發(fā)及遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移發(fā)生。2例外支架固定10個(gè)月后出現(xiàn)針道感染，經(jīng)換藥、抗感染治愈。轉(zhuǎn)移性骨生長長度分別是18.0、9.5、16.0 cm，延長速度分別是2.57、2.07、1.20 cm/月。1例出現(xiàn)延長偏移，給予麻醉下調(diào)整。2例于停止延長8個(gè)月后獲骨性愈合，拆除外固定支架；1例轉(zhuǎn)移性骨生長欠佳，給予回縮促進(jìn)骨痂生長。末次隨訪時(shí)，3例患兒下肢全長較健側(cè)短縮1.0～1.5 cm，骨盆取骨區(qū)無異常；2例膝關(guān)節(jié)屈曲度分別達(dá)90°和120°，1例仍有外支架，功能測量不滿意。 結(jié)論采用保留骨骺的骨轉(zhuǎn)移性生長術(shù)治療兒童骨肉瘤，通過自體骨段延長的方式修復(fù)骨缺損，為兒童保肢治療提供了新的選擇。
目的 分析骨骺牽開保骺術(shù)在兒童股骨骨肉瘤保肢術(shù)中的療效及應(yīng)用價(jià)值。 方法 2007年1月－2011年1月，收治6例股骨遠(yuǎn)端骨肉瘤患兒。男4例，女2例；年齡9～14歲，平均11.4歲。病程1～9個(gè)月，平均4.8個(gè)月。術(shù)前經(jīng)穿刺或切開活檢證實(shí)為骨肉瘤，其中成骨型骨肉瘤1例，軟骨母細(xì)胞型骨肉瘤1例，骨母細(xì)胞型骨肉瘤1例，未明確細(xì)胞分類的骨肉瘤3例。根據(jù)Enneking提出的外科分期系統(tǒng)，其中ⅡA期1例，ⅡB期5例。術(shù)前采用新輔助化療2個(gè)周期；首先行Cantilde;adell骨骺牽開保骺術(shù)，牽開時(shí)間4～7 d，平均5.7 d；骨骺牽開保骺術(shù)完成1～2 d后行骨腫瘤切除，采用大段同種異體骨移植重建；術(shù)后進(jìn)一步化療并定期隨訪了解骨折愈合、下肢發(fā)育及局部和全身并發(fā)癥等情況，并根據(jù)美國肌肉骨骼腫瘤學(xué)會（MSTS）評分系統(tǒng)評分及雙膝關(guān)節(jié)活動度（range of motion，ROM）進(jìn)行功能評定。 結(jié)果術(shù)后發(fā)生切口淺表感染1例，經(jīng)換藥治療后愈合；其余患兒切口均Ⅰ期愈合。6例均獲隨訪，隨訪時(shí)間1～5年，平均2.5年；無明顯肢體腫脹及疼痛等癥狀，未發(fā)生同種異體骨排斥反應(yīng)及內(nèi)固定物松動、斷裂等。術(shù)后隨訪無腫瘤轉(zhuǎn)移及局部復(fù)發(fā)等并發(fā)癥發(fā)生。術(shù)后6～9個(gè)月干骺端骨性愈合5例，14個(gè)月1例；骨干部位均發(fā)生延遲愈合，術(shù)后12～48個(gè)月骨折端均有不同程度骨痂形成，但骨折線仍清晰可見。末次隨訪時(shí)患肢短縮1～3 cm 4例，3～5 cm 2例；發(fā)生代償性脊柱側(cè)彎3例，行走明顯跛行2例； MSTS評分為（27.20 ± 1.92）分，與術(shù)前（19.60 ± 2.74）分比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t= —4.12，P=0.00）；患側(cè)膝關(guān)節(jié)ROM為（127.00 ± 17.89）°，與術(shù)前（109.00 ± 12.45）°比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t= —1.84，P=0.10），與健側(cè)膝關(guān)節(jié)ROM（126.00 ± 9.62）°比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t= —0.11，P=0.92）。 結(jié)論骨骺牽開保骺術(shù)可應(yīng)用于骨骺尚未閉合的兒童股骨骨肉瘤保肢術(shù)中，具有操作簡便、臨床療效好、術(shù)后并發(fā)癥少等優(yōu)點(diǎn)。
目的探討采用外固定架行骨骺牽開術(shù)保留兒童股骨骨肉瘤遠(yuǎn)端骨骺及關(guān)節(jié)功能的可行性。 方法2007年7月－2011年5月，對6例股骨下段成骨性骨肉瘤患兒行外固定架牽引分離股骨遠(yuǎn)端骨骺，配合瘤骨切除、大段同種異體骨重建術(shù)治療。男 4 例，女 2 例；年齡9～14歲，平均 10.5歲。骨肉瘤按照Enneking外科分期：ⅡA期4例，ⅡB期2例。干骺端骨腫瘤侵襲情況按照San-Julian等的影像學(xué)分型標(biāo)準(zhǔn)分型：Ⅰ型3例，Ⅱ型3例。腫瘤范圍6 cm × 4 cm～12 cm × 9 cm。術(shù)前行 2 個(gè)周期、術(shù)后行4個(gè)周期COSS 86化療。 結(jié)果術(shù)后1例因同種異體骨排斥反應(yīng)導(dǎo)致切口愈合不良，經(jīng)對癥治療后愈合；其余患兒切口均Ⅰ期愈合。6例均獲隨訪，隨訪時(shí)間11～56個(gè)月，平均37.5個(gè)月。1 例因肺部轉(zhuǎn)移于術(shù)后2年死亡。X線片示，隨訪期間未發(fā)生內(nèi)固定物松動、斷裂及骨不愈合等并發(fā)癥。末次隨訪時(shí)，按照國際保肢協(xié)會（ISOLS）評估標(biāo)準(zhǔn)評估，獲優(yōu) 3 例、良 2 例、可 1 例，優(yōu)良率 83.3%?；紓?cè)肢體長度為（62.97 ± 7.51） cm，與健側(cè)（64.03 ± 7.47）cm相似，比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=0.246 6，P=0.813 4）。 結(jié)論在嚴(yán)格把握適應(yīng)證、規(guī)范化療和徹底切除瘤骨前提下，骨骺牽開術(shù)可較好地保留股骨成骨性骨肉瘤患兒的患肢生長機(jī)能及關(guān)節(jié)功能。
目的 綜述骨肉瘤治療的基礎(chǔ)及臨床應(yīng)用研究進(jìn)展，全面了解骨肉瘤治療的現(xiàn)狀及其發(fā)展情況，為臨床治療骨肉瘤提供理論依據(jù)。 方法 廣泛查閱近年來骨肉瘤治療的相關(guān)文獻(xiàn)，并進(jìn)行綜合分析。 結(jié)果 目前骨肉瘤的治療仍以手術(shù)聯(lián)合系統(tǒng)化療為主，基因治療、分子靶向治療等的研究均取得了一定進(jìn)展，有望提高患者生存率，但臨床應(yīng)用前仍需建立可靠的動物模型和進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化的臨床試驗(yàn)。 結(jié)論 化療的發(fā)展改善了骨肉瘤患者的預(yù)后及保肢率，基因治療及分子靶向治療等研究進(jìn)展為骨肉瘤治療帶來希望
目的 報(bào)告2 例原發(fā)軟組織骨肉瘤發(fā)病及治療方法，并對其發(fā)病特點(diǎn)及治療情況作初步總結(jié)。方法 2005 年12 月及2007 年6 月，分別收治2 例原發(fā)軟組織骨肉瘤女性患者，年齡44 歲和65 歲。均因發(fā)現(xiàn)包塊生長迅速入院。腫瘤分別位于左大腿外側(cè)和左肘關(guān)節(jié)。病程分別為2 個(gè)月和6 個(gè)月。行廣泛切除術(shù)后常規(guī)行放化療。 結(jié)果 術(shù)后病理診斷為軟組織骨肉瘤，1 例獲隨訪16 個(gè)月未見復(fù)發(fā)；另1 例于術(shù)后10 個(gè)月因軟組織骨肉瘤復(fù)發(fā)伴肺轉(zhuǎn)移死亡。 結(jié)論 原發(fā)軟組織骨肉瘤惡性度較高，對于化療不敏感；保肢手術(shù)配合輔助性放療是其治療的發(fā)展方向。
目的 設(shè)計(jì)、構(gòu)建并篩選出轉(zhuǎn)染至人骨肉瘤細(xì)胞系OS-9901，對c-myc 沉默效果最佳的復(fù)制缺陷型重組腺病毒質(zhì)粒pAd-c-myc- 短發(fā)夾RNA（short hairpin RNA，shRNA）包裝出表達(dá)c-myc-shRNA 的重組腺病毒，并測定其滴度。 方法 設(shè)計(jì)有shRNA 結(jié)構(gòu)的3 對單鏈寡核苷酸（ss oligos），經(jīng)變性退火為雙鏈寡核苷酸（ds oligos），插入穿梭質(zhì)粒pENTR/U6 載體，測序正確后，經(jīng)LipofectamineTM2000 陽離子脂質(zhì)體介導(dǎo)入人骨肉瘤細(xì)胞系OS-9901，采用RTPCR篩選對c-myc 沉默效果最佳的穿梭質(zhì)粒pENTR/U6-shRNA，然后與腺病毒骨架質(zhì)粒行同源重組，篩選出正確重組子。采用293A 細(xì)胞包裝出表達(dá)c-myc-shRNA 的復(fù)制缺陷型重組腺病毒，觀察其細(xì)胞病變效應(yīng)（cytopathic effect，CPE），采用病毒顆粒法（viral particles，VP）和50% 組織培養(yǎng)感染劑量法（50% tissue culture infective dose，TCID50）測定病毒滴度。 結(jié) 果 電泳驗(yàn)證后的ds oligos 插入穿梭質(zhì)粒pENTR/U6 載體，測序結(jié)果提示構(gòu)建的pENTR/U6-shRNA 質(zhì)粒正確。從3 對ds oligos 通過RT-PCR 方法篩選出對c-myc 沉默效果最佳的穿梭質(zhì)粒pENTR/U6-shRNA，經(jīng)Pac Ⅰ酶切線性化后同源重組成功構(gòu)建了介導(dǎo)c-myc-shRNA 復(fù)制缺陷型重組腺病毒，CPE 和空泡現(xiàn)象 3 d 開始出現(xiàn)，6 d 更加明顯。采用VP法測定的第1 代腺病毒滴度為5.23 × 109 VP/mL，經(jīng)3 ～ 4 代擴(kuò)增后可達(dá)2.26 × 1012 VP/mL。TCID50 證實(shí)病毒滴度為10-3.8/0.1 mL。 結(jié)論 通過RNA 干擾技術(shù)，體外成功構(gòu)建了介導(dǎo)shRNA-c-myc 復(fù)制缺陷型重組腺病毒。
目的 骨肉瘤合并明顯移位病理性骨折保肢治療的近期療效觀察。 方法 2002年10月～2003年1月，2例骨肉瘤合并明顯病理性骨折患者，行動脈化療泵埋置、腫瘤活檢術(shù)后即開始化療, 5次化療后行人工關(guān)節(jié)假體置換保肢手術(shù)，術(shù)后繼續(xù)化療。 結(jié)果 術(shù)后無感染，假體無松動，患肢功能恢復(fù)良好。分別獲隨訪24個(gè)月和21個(gè)月，腫瘤無復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移。 結(jié)論 原發(fā)性骨肉瘤合并病理性骨折患者在有效、敏感的化療及綜合治療下，保肢治療并非其禁忌證。