目的研究乳腺癌細(xì)胞株MDA-MB-231、MDA-MB-468、SK-BR-3、MCF-7中人平衡型核苷載體（hENTs）的表達(dá)及其對(duì)5-氟尿嘧啶（5-FU）細(xì)胞毒性的影響。 方法MDA-MB-231、MDA-MB-468、SK-BR-3、MCF-7細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)于含10%小牛血清的高糖DMEM培養(yǎng)液中。逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)4種細(xì)胞株中hENT1 mRNA及hENT2 mRNA的表達(dá)。每種細(xì)胞分別在含有一定濃度序列（1.28×104 ng/L～2.00×108 ng/L）5-FU的培養(yǎng)液中培養(yǎng)48 h。MTT法檢測(cè)4種細(xì)胞株增殖，并計(jì)算其5-FU的半數(shù)抑制濃度（IC50）。 結(jié)果①hENT1及hENT2 mRNA在MDA-MB-231、MDA-MB-468、SK-BR-3細(xì)胞中的表達(dá)均較其在MCF-7細(xì)胞中高（P＜0.05），但其表達(dá)在MDA-MB-231、MDA-MB-468、SK-BR-3細(xì)胞中差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。hENT2 mRNA表達(dá)在4種細(xì)胞中均較hENT1 mRNA表達(dá)低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。2 MTT結(jié)果顯示，5-FU的IC50在MDAMB-231、MDA-MB-468、SK-BR-3細(xì)胞株中均較在MCF-7細(xì)胞株中低（P＜0.05），在MDA-MB-231、MDA-MB-468、SK-BR-3細(xì)胞株之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。③在5-FU的IC50較低的乳腺癌細(xì)胞株（MDA-MB-231、MDAMB-468、SK-BR-3）中高表達(dá)hENTs，而在5-FU的IC50較高的乳腺癌細(xì)胞株（MCF-7）中，低表達(dá)hENTs或無(wú)表達(dá)。 結(jié)論在乳腺癌細(xì)胞株中，細(xì)胞膜上hENTs的表達(dá)情況能顯著影響5-FU的作用效果，其結(jié)果提示，在臨床上可能需要依據(jù)hENTs的表達(dá)情況來(lái)選擇核苷類抗癌藥物。
目的研究應(yīng)用潘生丁(DP)阻斷平衡型核苷轉(zhuǎn)運(yùn)載體(hENTs)后，5-氟尿嘧啶(5-FU)對(duì)胰腺癌細(xì)胞株P(guān)anc-1凋亡及細(xì)胞周期的影響。方法將Panc-1細(xì)胞分為hENTs未阻斷組和hENTs阻斷組，hENTs阻斷組再根據(jù)DP濃度分為5 μmol/L DP組和10 μmol/L DP組。各組細(xì)胞分別在含有1.5×106 ng/L 5-FU或不含5-FU的培養(yǎng)液中培養(yǎng)24 h后，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞的凋亡率和細(xì)胞周期改變。結(jié)果①各組細(xì)胞凋亡檢測(cè)結(jié)果： 在含有1.5×106 ng/L 5-FU培養(yǎng)液中培養(yǎng)24 h后，5 μmol/L 及10 μmol/L DP組的細(xì)胞凋亡率明顯高于未阻斷組(Plt;0.05)，10 μmol/L DP組又明顯高于5 μmol/L DP組(Plt;0.05); 在不含5-FU的培養(yǎng)液中培養(yǎng)24 h后，各組之間細(xì)胞凋亡率比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt;0.05)。②各組細(xì)胞周期檢測(cè)結(jié)果： 在含有1.5×106 ng/L 5-FU培養(yǎng)液中培養(yǎng)24 h后，未阻斷組細(xì)胞進(jìn)入合成期(S期)的比例減少，停滯在合成前期(G1期),5 μmol/L DP組及10 μmol/L DP組的細(xì)胞進(jìn)入合成期(S期)的比例較未阻斷組進(jìn)一步減少(Plt;0.05)，且隨著DP濃度的增加，細(xì)胞進(jìn)入合成期(S期)的比例減少得更多(Plt;0.05)，5 μmol/L DP組和10 μmol/L DP組進(jìn)入合成期（S期）的比例分別是未阻斷組的87.09%和74.06%。5-FU對(duì)細(xì)胞合成后期(G2期)的影響較小，除5 μmol/L DP組較未阻斷組G2期細(xì)胞數(shù)量增加有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05)外，其余各組之間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt;0.05); 在不含5-FU的培養(yǎng)液中培養(yǎng)24 h后，各組細(xì)胞周期中各期無(wú)明顯改變，各組之間比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt;0.05)。結(jié)論在胰腺癌細(xì)胞株P(guān)anc-1中，DP阻斷細(xì)胞膜上hENTs后，能顯著增強(qiáng)5-FU對(duì)胰腺癌細(xì)胞促凋亡作用及抑制胰腺癌細(xì)胞分裂增殖的作用，這種增強(qiáng)作用可能與阻斷hENTs后細(xì)胞內(nèi)5-FU濃度提高有關(guān)，而與DP本身作用無(wú)關(guān)。