華西醫(yī)學(xué)期刊出版社
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找到 作者 包含"魏祥科" 1條結(jié)果
  • BMSCs聯(lián)合去細(xì)胞肌肉生物支架修復(fù)大鼠脊髓半切損傷的實(shí)驗(yàn)研究

    目的 以去細(xì)胞肌肉生物支架(acellular muscle bioscaffolds,AMBS)接種BMSCs,同種異體移植修復(fù)大鼠脊髓半切損傷,觀察兩者聯(lián)合移植對脊髓損傷的修復(fù)作用。 方法取8周齡雌性SD大鼠,采用改良化學(xué)方法制備AMBS,并進(jìn)行復(fù)合冷滅菌;密度梯度離心法提取、貼壁法培養(yǎng)BMSCs,取第3代細(xì)胞用Hoechst 33342熒光標(biāo)記,采用注射法制備BMSCs-AMBS復(fù)合支架,14 d后掃描電鏡及熒光顯微鏡觀察其生物相容性。取成年雌性SD大鼠48只,制備T9~11脊髓半切損傷模型后隨機(jī)分為4組(n=12),A組于缺損處移植BMSCs-AMBS復(fù)合支架,B組單獨(dú)移植BMSCs,C組單獨(dú)移植AMBS,D組注射PBS作為空白對照組,分別于術(shù)后1、2、3、4周行運(yùn)動功能評分,術(shù)后4周行HE染色觀察及免疫熒光檢測。 結(jié)果Masson染色及HE染色示AMBS內(nèi)部呈平行結(jié)構(gòu),主要為膠原纖維,幾乎無肌纖維。BMSCs-AMBS復(fù)合培養(yǎng)14 d后熒光顯微鏡觀察示Hoechst 33342標(biāo)記BMSCs大量存活,掃描電鏡可見BMSCs貼附于支架內(nèi)表面生長。術(shù)后2~4周,大鼠BBB評分A組均高于其余3組(P lt; 0.05),D組明顯低于其余3組(P lt; 0.05);術(shù)后4周B組明顯高于C組(t=10.352,P=0.000)。術(shù)后4周,HE染色示脊髓空洞面積A組明顯小于其余3組,免疫熒光染色示A 組神經(jīng)絲蛋白200、巢蛋白陽性細(xì)胞表達(dá)量高于其余3組,神經(jīng)膠質(zhì)原酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)則明顯低表達(dá)。A、B組熒光示蹤的BMSCs移植到體內(nèi)后主要遷移至對側(cè)灰質(zhì)前角,部分分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞。A、B、C、D組GFAP熒光半定量分析積分吸光度(IA)值分別為733.01 ± 202.04、926.42 ± 59.46、1 069.37 ± 33.42、1 469.46 ± 160.53,A組明顯低于其余3組,D組高于其余3組,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P lt; 0.05)。 結(jié)論AMBS具有相對規(guī)則的內(nèi)部結(jié)構(gòu),與BMSCs有良好生物相容性,能抑制膠質(zhì)瘢痕,促進(jìn)BMSCs存活、遷徙、分化,是細(xì)胞移植理想的天然載體。兩者聯(lián)合移植修復(fù)大鼠脊髓損傷能發(fā)揮協(xié)同作用,促進(jìn)運(yùn)動功能恢復(fù)。

    發(fā)表時間:2016-08-31 04:22 導(dǎo)出 下載 收藏 掃碼
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