目的研究胃癌組織中CD44v6的表達(dá)以及與腫瘤轉(zhuǎn)移和預(yù)后的關(guān)系。方法應(yīng)用流式細(xì)胞免疫技術(shù)對(duì)52例胃癌組織中CD44v6的表達(dá)進(jìn)行檢測(cè),分析CD44v6的表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果新鮮胃癌組織及距癌灶3 cm遠(yuǎn)處的正常胃黏膜組織（經(jīng)病理檢查證實(shí)）中CD44v6的表達(dá)陽(yáng)性率分別為67.31%(35/52)和25.00（13/52），前者明顯高于后者（P＜0.01)。CD44v6的表達(dá)陽(yáng)性率與胃癌浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及pTNM分期有關(guān)（P＜0.05）。結(jié)論檢測(cè)胃癌組織中CD44v6的表達(dá)對(duì)判斷胃癌的浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移及病期進(jìn)展情況有一定的價(jià)值，CD44v6可作為一個(gè)預(yù)測(cè)胃癌轉(zhuǎn)移潛能和胃癌患者預(yù)后的病理生物學(xué)指標(biāo)之一。
目的 探討CD44v6與胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及預(yù)后的關(guān)系。 方法 采用免疫組化二步法對(duì)100例進(jìn)展期胃癌標(biāo)本進(jìn)行標(biāo)記，分析CD44v6與臨床病理及預(yù)后的關(guān)系。 結(jié)果 胃癌原發(fā)灶CD44v6表達(dá)陽(yáng)性率為64%（64/100）； CD44v6的表達(dá)隨胃癌浸潤(rùn)深度、周圍淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移而升高。 結(jié)論 CD44v6在胃癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中起著重要作用，可用于早期預(yù)測(cè)胃癌的轉(zhuǎn)移潛能和預(yù)后。
目的探討CD44v6和bcl2蛋白在原發(fā)性膽囊癌組織中的表達(dá)及其與癌組織類型、病理分級(jí)和轉(zhuǎn)移狀況的關(guān)系,以及CD44v6表達(dá)與bcl2表達(dá)的相關(guān)性。方法應(yīng)用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)50例原發(fā)性膽囊癌、20例膽囊腺瘤和10例慢性膽囊炎組織中CD44v6和bcl2蛋白的表達(dá)。結(jié)果膽囊癌組織中CD44v6和bcl2表達(dá)陽(yáng)性率分別為82.0%和60.0%，均明顯高于膽囊腺瘤(分別為45.0%和30.0%,P＜0.05)，并隨著膽囊癌細(xì)胞分化程度的減低、病理分級(jí)的增高和轉(zhuǎn)移而明顯增高(P＜0.05)。同時(shí)，CD44v6的表達(dá)與bcl2表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.36,P＜0.05)。結(jié)論CD44v6和bcl2均是膽囊癌高度惡性和預(yù)后不良的重要指標(biāo)。膽囊癌CD44v6表達(dá)與bcl2蛋白表達(dá)可能具有相互協(xié)同作用。
目的 探討唾液酸化路易斯X(sialyl LewisX,SLeX)抗原和CD44v6表達(dá)與膽管癌生物學(xué)行為的關(guān)系。方法用催化信號(hào)放大(catalyzed signal amplification，CSA)免疫組化方法，檢測(cè)43例膽管癌組織及10例慢性膽管炎組織中SLeX抗原和CD44v6蛋白的表達(dá)，分析SLeX和CD44v6蛋白的表達(dá)與膽管癌臨床病理特征的關(guān)系。結(jié)果在膽管癌組織中，SLeX和CD44v6表達(dá)陽(yáng)性率分別為67.4%和62.8%,顯著高于對(duì)照組的20.0%（P＜0.05）。SLeX和CD44v6表達(dá)陽(yáng)性率與膽管癌的TNM分期、分化程度、淋巴結(jié)和臟器轉(zhuǎn)移密切相關(guān)（P＜0.05）。SLeX表達(dá)與CD44v6表達(dá)呈正相關(guān)(r=0.49，P＜0.001)。結(jié)論檢測(cè)SLeX和CD44v6的基因表達(dá)可作為評(píng)估膽管癌生物學(xué)行為和預(yù)后的參考指標(biāo)。
目的探討胃癌患者外周血淋巴細(xì)胞（PBL）CD44變異體5（CD44v5）含量和瘤組織CD44v5表達(dá)情況，及其對(duì)胃癌轉(zhuǎn)移的診斷和進(jìn)展評(píng)價(jià)的意義。方法應(yīng)用流式細(xì)胞儀（FCM）檢測(cè)31例胃癌患者術(shù)前PBL CD44v5含量并與正常對(duì)照組相比較，同時(shí)采用免疫組化SABC法檢測(cè)33例胃癌組織CD44v5表達(dá)情況。結(jié)果胃癌患者術(shù)前PBL CD44v5含量較正常對(duì)照組明顯增高（P＜0.01）。有轉(zhuǎn)移的胃癌患者PBL CD44v5含量明顯高于無(wú)轉(zhuǎn)移者（P＜0.01）。術(shù)前PBL CD44v5含量與腫瘤大小、浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及病理分期呈顯著的正相關(guān)（r=0.486，P＜0.05）。正常胃粘膜無(wú)CD44v5表達(dá)，胃癌組織CD44v5表達(dá)陽(yáng)性率為69.7%，其表達(dá)與腫瘤浸潤(rùn)深度和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移存在顯著相關(guān)性。胃癌原發(fā)灶CD44v5表達(dá)陽(yáng)性者其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移陽(yáng)性率顯著高于陰性者。結(jié)論CD44v5有望作為監(jiān)測(cè)胃癌轉(zhuǎn)移的生物學(xué)指標(biāo)。應(yīng)用FCM定量檢測(cè)胃癌患者術(shù)前外周血CD44v5含量，對(duì)胃癌轉(zhuǎn)移的診斷和進(jìn)展的評(píng)價(jià)可能具有重要的臨床意義。
目的 探討CD44v6和nm23H1的mRNA表達(dá)與乳腺癌臨床病理參數(shù)及預(yù)后的關(guān)系及相關(guān)性。方法 應(yīng)用原位雜交和CSA免疫組化方法，對(duì)94例乳腺癌組織進(jìn)行CD44v6和nm23H1的mRNA檢測(cè)。 結(jié)果 CD44v6 mRNA陽(yáng)性表達(dá)及nm23H1 mRNA陰性表達(dá)均與乳腺癌的組織學(xué)分級(jí)、臨床分期、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、復(fù)發(fā)和預(yù)后呈正相關(guān)。乳腺癌中CD44v6 mRNA表達(dá)與nm23H1 mRNA表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。CD44v6 mRNA陽(yáng)性表達(dá)及nm23H1 mRNA陰性表達(dá)患者淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率高、生存率低。結(jié)論 CD44v6 mRNA表達(dá)與nm23H1 mRNA表達(dá)具有負(fù)調(diào)節(jié)的協(xié)同作用。聯(lián)合檢測(cè)兩種基因，能更準(zhǔn)確地判斷乳腺癌的轉(zhuǎn)移、預(yù)后狀態(tài)。
為減損排斥反應(yīng)性淋巴細(xì)胞克隆，采用異型雙功能試劑SPDP、2-IT連接antiCD4、CD8單克隆抗體與天花粉毒素(TCS)，應(yīng)用Sephacryl S-200分離游離TCS，采用SDS-PAGE電泳及細(xì)胞毒性分析測(cè)定合成的免疫毒素的純度和生物學(xué)活性。電泳結(jié)果顯示，連接混合物中含有連接的免疫毒素、游離的單克隆抗體和TCS，Sephacryl S-200可除去游離的TCS。體外，免疫毒素可特異性殺傷大鼠脾細(xì)胞，其作用具有劑量依賴性。由此提示抗CD4、CD8免疫毒素可以誘導(dǎo)免疫無(wú)反應(yīng)性。
目的 探討CD4+CD25+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（CD4+CD25+ Treg細(xì)胞）在銅綠假單胞菌（PA）慢性肺部感染中的變化及意義。方法 60只雄性SD大鼠隨機(jī)分為PA感染組和空白對(duì)照組。將PA包被的硅膠管置入大鼠一側(cè)主支氣管建立慢性肺部感染模型，對(duì)照組置入無(wú)菌硅膠管。28 d后，熒光激活細(xì)胞分類（FACS）檢測(cè)外周血CD4+CD25+ Treg細(xì)胞數(shù)量，ELISA檢測(cè)血清白細(xì)胞介素-10（IL-10）和轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）水平，RT-PCR檢測(cè)脾臟Foxp3 mRNA表達(dá)，肺組織行HE染色觀察組織病理學(xué)變化。結(jié)果 PA感染組Treg/CD4+T淋巴細(xì)胞的百分比明顯高于對(duì)照組[（19.79±6.45）%比（5.15±0.47）%，Plt;0.05]。PA感染組血清IL-10和TGF-β水平均顯著高于對(duì)照組[IL-10：（231.52±54.48）pg/mL比（35.43±23.56）pg/mL，Plt;0.05；TGF-β：（121.05±7.98）pg/mL比（36.02±8.94）pg/mL，Plt;0.05]。PA感染組Foxp3 mRNA相對(duì)含量較對(duì)照組顯著升高[（0.80±0.044）比（0.25±0.054），Plt;0.05]。HE染色見PA感染組肺組織有大量淋巴細(xì)胞聚集，纖維增生明顯，膿腫形成。結(jié)論 CD4+CD25+ Treg細(xì)胞在PA慢性肺部感染時(shí)數(shù)量增多、功能增強(qiáng)，對(duì)感染慢性化形成有重要影響。
目的 觀察支氣管哮喘患者外周血CD4 + CD25 + 調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞( CD4 + CD25 + Treg) 、Foxp3 mRNA 的水平及吸入糖皮質(zhì)激素對(duì)其的影響。方法 流式細(xì)胞儀檢測(cè)非急性發(fā)作期哮喘患者吸入激素前、后和健康志愿者( 正常對(duì)照組) 外周血單個(gè)核細(xì)胞( PBMCs) 中CD4 + CD25 + Treg 的比例, RT-PCR 檢測(cè)Foxp3 mRNA 表達(dá)變化, 肺功能儀檢測(cè)第1 秒用力呼氣容積占預(yù)計(jì)值百分比( FEV1%pred) 和呼氣峰流量( PEF) 。結(jié)果 哮喘組治療前CD4 + CD25 + Treg 水平及Foxp3 mRNA 的表達(dá)顯著低于正常對(duì)照組( P lt;0. 05) , 治療后CD4 +CD25 + Treg 水平及Foxp3 mRNA 的表達(dá)較治療前顯著升高( P lt; 0. 05) ; 哮喘組治療前FEV1% pred、PEF 顯著低于正常對(duì)照組( P lt; 0. 05) , 治療后FEV1% pred、PEF 較治療前顯著增加( P lt; 0. 05) 。結(jié)論 哮喘患者外周血中具有免疫抑制活性的CD4 + CD25 + Treg 數(shù)量減少, 功能下降, 參與了哮喘的發(fā)病過(guò)程; 吸入激素可以上調(diào)哮喘患者外周血CD4 + CD25 + Treg 及Foxp3 mRNA 的水平, 改善哮喘患者的肺功能。
目的 在支氣管哮喘大鼠模型中采用siRNA 干擾肺CD4 + T 細(xì)胞β1, 3-N-乙酰糖基轉(zhuǎn)移酶( Fringe) 亞型Rfng 基因的表達(dá), 探討Rfng 對(duì)哮喘T細(xì)胞分化的影響。方法 用卵白蛋白( OVA)致敏并激發(fā)建立哮喘大鼠模型。提取哮喘大鼠肺T 細(xì)胞, 并用免疫磁珠分離純化CD4 + T淋巴細(xì)胞。用Rfng 特異的siRNA 片段干擾哮喘大鼠CD4 + T 淋巴細(xì)胞高表達(dá)的Rfng 基因。定量PCR 和Westernblot 檢測(cè)Rfng 的表達(dá)。定量PCR 檢測(cè)Th1/Th2 型細(xì)胞因子IL-12、IFN-γ、IL-4、IL-5, 以及核轉(zhuǎn)錄因子T-bet、GATA3。ELISA 檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中的Th1 /Th2 型細(xì)胞因子IL-12、IFN-γ、IL-4、IL-5。結(jié)果 siRNA干擾哮喘大鼠肺CD4 + T 淋巴細(xì)胞后, 定量PCR 和Western blot 檢測(cè)發(fā)現(xiàn)siRNA 干預(yù)組中RfngmRNA 和蛋白表達(dá)明顯降低。在siRNA 干預(yù)組中, Th1 型細(xì)胞因子IFN-γ、IL-12 以及上游核轉(zhuǎn)錄因子T-bet 的mRNA 表達(dá)明顯升高, Th2 型細(xì)胞因子IL-4、IL-5 以及上游核轉(zhuǎn)錄因子GATA3 的mRNA 表達(dá)明顯降低。ELISA 檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中IFN-γ、IL-12 明顯升高, IL-4、IL-5 明顯降低。結(jié)論 Rfng基因表達(dá)的改變影響了T細(xì)胞的分化, 可能與支氣管哮喘的發(fā)病有關(guān)。