【摘 要】 目的 探討脫細胞軟骨基質(zhì)三維多孔支架的制備方法以及將其應(yīng)用于關(guān)節(jié)軟骨組織工程的可行性。 方法 取天然人軟骨粉碎后，采用梯度離心法取100 nm ～ 5 μm 軟骨微絲，脫細胞處理后制備為質(zhì)量體積比為3%的懸液，采用冷凍凍干法制備脫細胞軟骨基質(zhì)三維多孔支架。254 nm 紫外線和碳化二亞胺/ N- 羥基琥珀酰亞胺對支架進行交聯(lián)。冷凍凍干后，對支架材料進行組織學(xué)及掃描電鏡觀察，測定支架孔徑和孔隙率、吸水率，并采用MTT 法分析支架浸提液毒性。分離培養(yǎng)犬BMSCs，用TGF-β1 成軟骨誘導(dǎo)后種植至支架，倒置顯微鏡、電鏡觀察細胞在支架上的生長、分化情況。 結(jié)果 組織學(xué)觀察顯示，三維多孔支架中無軟骨細胞碎片殘留，甲苯胺藍染色、番紅O 染色、Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色均呈陽性。掃描電鏡顯示支架內(nèi)孔洞相互連通，孔徑為（155 ± 34）μm，孔隙率為91.3% ± 2.0%，吸水率為451% ± 155%。MTT 法顯示不同濃度支架浸提液與對照DMEM 培養(yǎng)液吸光度值比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05），支架無細胞毒性。倒置顯微鏡觀察，細胞在支架上黏附良好；掃描電鏡下細胞在支架上均勻分布，細胞呈圓形或橢圓形，并有基質(zhì)分泌。 結(jié)論 制備的脫細胞軟骨基質(zhì)三維多孔支架去細胞徹底，保留了軟骨ECM 主要成分，無毒，具備合適的孔徑和孔隙率，生物相容性良好，是軟骨組織工程良好的支架載體。
目的 利用牛膝關(guān)節(jié)透明軟骨進行脫細胞處理，制備新型可塑形生物材料，探討脫細胞軟骨基質(zhì)作為組織工程載體材料的可行性。 方法 采集新鮮牛膝關(guān)節(jié)，切取關(guān)節(jié)表面透明軟骨，凍干后低溫粉碎為軟骨微粒，胰酶、Triton X-100 及低張Tris-HCl 溶液聯(lián)合作用進行脫細胞處理，冷凍干燥塑形，紫外線交聯(lián)后制備脫細胞軟骨基質(zhì)材料。采用組織學(xué)、免疫組織化學(xué)、掃描電鏡、孔隙率測定及生物力學(xué)檢測等對材料的理化性狀進行觀察分析。取4 只成年新西蘭白兔骨髓制備BMSCs，傳至第3 代進行實驗。觀察濃度分別為100%、10% 及1% 的材料浸提液培養(yǎng)BMSCs 0、24、48 及72 h 后相對乳酸脫氫酶（lactate dehydrogenase，LDH）釋放率，以含5%FBS 的DMEM 培養(yǎng)基作為陰性對照，觀察細胞毒性作用；并將濃度為1 × 107 個/mL 的BMSCs 單細胞懸液與材料復(fù)合培養(yǎng)，觀察細胞黏附情況。 結(jié)果 制備的脫細胞軟骨基質(zhì)材料呈白色多孔狀結(jié)構(gòu)。HE 染色示材料由纖維狀的軟骨微粒形成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，基質(zhì)內(nèi)無細胞成分殘留；阿爾新藍染色示微顆粒呈藍色。材料Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色呈陽性。掃描電鏡材料為多孔狀海綿結(jié)構(gòu)，孔徑30 ～ 150 μm。壓汞法測定材料平均孔隙率為89.37%，平均孔徑為90.8 μm。力學(xué)分析示脫細胞軟骨基質(zhì)材料的壓縮模量為（17.91 ±0.98） MPa，未經(jīng)脫細胞處理的軟骨微粒材料壓縮模量為（15.12 ± 0.77）MPa，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）；與正常牛關(guān)節(jié)軟骨的（26.30 ± 1.98）MPa 比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。細胞毒性實驗顯示，培養(yǎng)0、24、48 及72 h，100%、10%、1% 濃度材料浸提液條件培養(yǎng)基和陰性對照DMEM 培養(yǎng)基相對LDH 釋放率差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）。細胞黏附實驗顯示細胞可黏附于材料上，生長狀態(tài)良好。 結(jié)論 牛關(guān)節(jié)軟骨經(jīng)脫細胞處理后，制成的多孔狀脫細胞軟骨基質(zhì)材料，既保持了軟骨基質(zhì)中的主要成分，又具有良好的理化性質(zhì)和生物相容性，可作為組織工程研究的一種新型載體材料。
肺移植是終末期肺疾病患者唯一的治療手段，該領(lǐng)域也是目前國際范圍內(nèi)的研究熱點。相關(guān)研究既促進了肺移植的進步與發(fā)展，也改善了移植后患者的生活質(zhì)量。隨著肺移植技術(shù)的發(fā)展，適應(yīng)人群相關(guān)指南不斷修訂，供體肺來源也一直是所有移植中心亟待解決的問題。移植期的規(guī)范化管理涉及麻醉誘導(dǎo)、術(shù)中液體管理、氣道管理、重要步驟的處理及術(shù)后疼痛管理等方面。體外生命支持（ECLS）包括體外循環(huán)（CPB）及體外膜肺氧合（ECMO）。隨著 ECLS 技術(shù)的發(fā)展，ECMO 作為肺移植橋梁在術(shù)中及術(shù)后循環(huán)支持中的優(yōu)更加突出，幫助受體患者順利度過肺移植窗口期。雖然肺移植在基礎(chǔ)科學(xué)和臨床研究方面都有許多進展，但要提高移植后的生存率，還須克服包括如何成功完成肺移植、擴大肺供體庫、誘導(dǎo)耐受、預(yù)防移植后并發(fā)癥、原發(fā)性移植物功能障礙（PGD）、細胞和抗體介導(dǎo)的排斥反應(yīng)以及感染等在內(nèi)的諸多問題。
靜脈-靜脈體外膜肺氧合（VV-ECMO）作為一種體外生命支持技術(shù)已經(jīng)證明其在重癥呼吸衰竭患者治療中的作用，其主要優(yōu)點在于能夠維持足夠的氧合和清除多余的 CO2，提高氧輸送、改善組織灌注和代謝，同時實施肺保護策略。臨床醫(yī)生應(yīng)準(zhǔn)確評估和識別患者病情，及時而準(zhǔn)確地進行 VV-ECMO 的植入及管理。本文將綜述 VV-ECMO 應(yīng)用所涉及的患者選擇、插管策略、抗凝和臨床管理以及脫機等環(huán)節(jié)。
心源性休克是由于左、右或雙心室衰竭導(dǎo)致低心輸出量引起循環(huán)的衰竭狀態(tài)，致死率極高。近年來，體外膜肺氧合（extracorporeal membrane oxygenation，ECMO）因其便攜、輔助流量大、專家熟悉度高、可同時提供心肺支持等優(yōu)點，成為維持心源性休克短期血流動力學(xué)穩(wěn)定的首選設(shè)備，幫助器官渡過恢復(fù)期以及移植等待期或作為進一步?jīng)Q策的橋梁。本文就 ECMO 在心源性休克治療中的適應(yīng)證、管理策略及未來應(yīng)用領(lǐng)域進行綜述，為臨床實踐提供相關(guān)參考。
目的 系統(tǒng)評價活化部分凝血活酶時間（APTT）與ECMO治療預(yù)后的相關(guān)性。方法 計算機檢索PubMed、EMbase、MEDLINE、CNKI、WanFang Data和VIP數(shù)據(jù)庫，搜集APTT與ECMO治療預(yù)后相關(guān)性的研究，檢索時限均從建庫至2022年4月11日，由2位評價員獨立篩選文獻、提取資料并評價納入研究的偏倚風(fēng)險后，采用RevMan 5.4軟件進行Meta分析。結(jié)果 共納入22個研究，包括2 913例患者。Meta分析結(jié)果顯示，ECMO支持治療期間出血組患者的APTT水平高于無出血組［MD=10.34，95%CI（1.32，19.37），P=0.02］；血栓組患者的APTT水平較無血栓組更低［MD=?3.58，95%CI（?5.89，?1.27），P=0.002］；死亡組患者的APTT水平明顯高于存活組［MD=8.97，95%CI（5.89，12.06），P<0.000 01］。結(jié)論 ECMO支持治療期間APTT水平可能與患者出血、血栓形成和死亡等ECMO治療預(yù)后相關(guān)。但受納入研究質(zhì)量和數(shù)量的限制，上述結(jié)論尚需開展更多高質(zhì)量研究予以驗證。