目的 通過研究大鼠股骨干骨折合并腦外傷時骨痂組織內(nèi)PDGF 表達(dá)水平的變化，探討腦外傷對骨折愈合的影響及作用機(jī)制。 方法 取12 周雄性SD 大鼠64 只，體重（356 ± 25）g，隨機(jī)分成8 組，每組8 只。A1、B1、C1、D1 組分別為骨折合并腦外傷1、2、3、4 周組，制作腦外傷和股骨干骨折模型；A2、B2、C2、D2 組分別為單純骨折1、2、3、4 周組，制作單純股骨干骨折模型作對照。各組攝CR 片后截取骨痂，行HE 染色觀察骨痂生長情況及其組織形態(tài)，免疫組織化學(xué)染色測定PDGF 表達(dá)，原位雜交檢測PDGF mRNA 表達(dá)。 結(jié)果 CR 片示在同一時間點(diǎn)A1、B1、C1、D1 組較A2、B2、C2、D2 組骨折端骨痂形成早，骨痂多，骨折愈合快。HE 染色示A1 組可見較多早期軟骨細(xì)胞、成纖維細(xì)胞，A2組骨折間隙可見成纖維細(xì)胞，僅夾雜有少量的早期軟骨細(xì)胞；B1 組骨折端有新生骨小梁長入，B2 組未見骨小梁形成；C1組骨折端有大量編織骨形成且骨小梁間有少量成熟軟骨細(xì)胞，C2 組少量骨小梁向骨折端長入；D1 組編織骨向板層骨轉(zhuǎn)化，D2 組骨折端為不成熟骨小梁。免疫組織化學(xué)染色和原位雜交實(shí)驗均可見成纖維細(xì)胞、間充質(zhì)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、早期軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞胞漿出現(xiàn)廣泛的強(qiáng)陽性反應(yīng)，A1、B1、C1、D1 組PDGF 和PDGF mRNA 陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)均高于同一時間點(diǎn)A2、B2、C2、D2 組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 腦外傷對骨折愈合有促進(jìn)作用，可能與腦外傷后PDGF 表達(dá)水平升高有關(guān)。
目的觀察比較人正常和退變髓核的細(xì)胞學(xué)和生物學(xué)差異，并研究 IFG-1 和 PDGF 對人退變髓核的修復(fù)作用。方法取患者自愿捐贈的人退變及正常髓核組織，一部分制作成組織切片，進(jìn)行 HE 染色觀察髓核退變前后形態(tài)變化，免疫組織化學(xué)染色觀察Ⅰ型膠原、Ⅱ型膠原、B 淋巴細(xì)胞瘤 2（B-cell lymphoma 2，Bcl-2）、Bcl-2 相關(guān) X（Bcl-2 associate X，Bax）蛋白表達(dá)；另一部分髓核組織進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)，倒置顯微鏡觀察細(xì)胞形態(tài)，Western blot 檢測Ⅱ型膠原蛋白表達(dá)。然后進(jìn)行基因轉(zhuǎn)染實(shí)驗，分為 4 組，A 組為退變髓核細(xì)胞；B、C、D 組分別用 IGF-1 基因慢病毒顆粒、PDGF 基因慢病毒顆粒和攜帶 IGF-1、PDGF 雙基因的慢病毒顆粒轉(zhuǎn)染退變髓核細(xì)胞。轉(zhuǎn)染 21 d，倒置顯微鏡觀察各組細(xì)胞形態(tài)，流式細(xì)胞儀測定各組細(xì)胞 IGF-1 和 PDGF 陽性率，免疫組織化學(xué)染色和 Western blot 檢測各組細(xì)胞Ⅱ型膠原蛋白表達(dá)。結(jié)果HE 染色示，正常組中央髓核組織可見大量脊索細(xì)胞和少量類軟骨細(xì)胞；而退變組髓核細(xì)胞明顯減少，且髓核組織內(nèi)可見大量纖維軟骨組織。免疫組織化學(xué)染色示，退變組Ⅰ型膠原、Bax 蛋白陽性細(xì)胞百分比顯著高于正常組，Ⅱ型膠原、Bcl-2 蛋白陽性細(xì)胞百分比顯著低于正常組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。Western blot 檢測示，退變組Ⅱ型膠原蛋白相對表達(dá)量顯著低于正常組（t=65.493，P=0.000）?；蜣D(zhuǎn)染后 21 d，與 A 組比較，B、C、D 組細(xì)胞活性增加，形態(tài)變得較為規(guī)則。流式細(xì)胞儀檢測示 B、D 組 IGF-1 陽性率較 A 組明顯增高，C、D 組PDGF 陽性率較 A 組明顯增高（P<0.05）。免疫組織化學(xué)染色觀察示，A、B、C、D 組Ⅱ型膠原蛋白陽性染色情況依次為（±）、（+）、（+）、（++）。Western blot 檢測示，A、B、C、D 組Ⅱ型膠原蛋白相對表達(dá)量依次增加，各組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論IGF-1 與 PDGF 均能逆轉(zhuǎn)椎間盤髓核細(xì)胞的退變且二者具有協(xié)同作用，為其今后應(yīng)用于臨床治療椎間盤退變性疾病提供了實(shí)驗依據(jù)。