探討全反式維甲酸（all-trans-retinoic acid，ATRA）體外促神經(jīng)干細(xì)胞（neural stem cells，NSCs）分化為神經(jīng)元過(guò)程中Wnt-1 表達(dá)的變化，及Wnt-1 對(duì)NSCs 分化的作用。 方法 取孕12 ～ 16 d SD 大鼠，分離和培養(yǎng)鼠胚NSCs。取第3 代NSCs 調(diào)整密度為1 × 106 個(gè)/mL，分別用0.5、1.0、5.0、10.0 μmol/L 濃度的ATRA 干預(yù)，通過(guò)熒光雙標(biāo)染色技術(shù)和流式細(xì)胞儀檢測(cè)各組細(xì)胞神經(jīng)元分化率，確定1.0 μmol/L 濃度為ATRA 促NSCs 分化的最佳濃度。實(shí)驗(yàn)組用1.0 μmol/L ATRA 誘導(dǎo)體外培養(yǎng)第3 代NSCs，培養(yǎng)3、5、7、9 d 后用免疫細(xì)胞化學(xué)染色、實(shí)時(shí)熒光定量PCR、Westernblot 檢測(cè)Wnt-1 表達(dá)的變化；對(duì)照組不加ATRA 培養(yǎng)。 結(jié)果 免疫細(xì)胞化學(xué)染色示對(duì)照組Wnt-1 蛋白表達(dá)極少；實(shí)驗(yàn)組3 d 時(shí)表達(dá)最強(qiáng)，陽(yáng)性細(xì)胞多；培養(yǎng)5 d 仍可見(jiàn)Wnt-1 陽(yáng)性表達(dá)；3、5 d 時(shí)積分吸光度（IA）值與對(duì)照組比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05）；7、9 d Wnt-1 陽(yáng)性表達(dá)明顯減少，IA 值與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。實(shí)時(shí)熒光定量PCR 檢測(cè)示對(duì)照組Wnt-1 mRNA 相對(duì)表達(dá)量為0.021 7 ± 0.072 1；實(shí)驗(yàn)組相對(duì)表達(dá)量隨時(shí)間增加逐漸降低，3、5 d 時(shí)分別為0.512 2 ± 0.280 0、 0.216 4 ± 0.887 0，與對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05） ；7、9 d 分別為0.038 5 ± 0.299 4、0.035 5 ± 0.309 5，與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。Western blot 印跡檢測(cè)可見(jiàn)特異染色條帶，對(duì)照組Wnt-1蛋白表達(dá)量為0.005 1 ± 0.558 3；實(shí)驗(yàn)組表達(dá)量隨時(shí)間增加逐漸降低，3、5 d 時(shí)分別為0.451 7 ± 0.071 3、0.311 7 ± 0.080 5，與對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05） ；7、9 d 分別為0.007 3 ± 0.052 7、0.004 7 ± 0.931 4，與對(duì)照組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。 結(jié)論 在濃度為1.0 μmol/L 的ATRA 誘導(dǎo)下，Wnt-1 與NSCs 的分化早期成正調(diào)控，可能與激活包括經(jīng)典的Wnt 信號(hào)途徑等信號(hào)有關(guān)，表明Wnt-1 與NSCs 向神經(jīng)元的分化有關(guān)。
目的通過(guò)建立宣威地區(qū)非小細(xì)胞肺癌的裸鼠移植瘤模型，探討阻斷Wnt-1信號(hào)傳導(dǎo)通路對(duì)非小細(xì)胞肺癌的抑制作用。 方法將21只重量16～18 g的荷瘤小鼠分為三組：空白組（n=7）、對(duì)照組（n=7）和實(shí)驗(yàn)組（n=7）?？瞻捉M注入生理鹽水，對(duì)照組注入多西他賽，實(shí)驗(yàn)組注入Wnt-1抗體。待6次注射干預(yù)后，處死所有裸鼠獲取腫瘤標(biāo)本，比較其體積大小，比較空白組、對(duì)照組及實(shí)驗(yàn)組對(duì)腫瘤的抑瘤率。 結(jié)果腫瘤體積在第21天和27天時(shí)空白組分別與實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.002，P=0.000）。體內(nèi)實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，多西他賽和Wnt-1抗體對(duì)非小細(xì)胞肺癌均有抑制作用，多西他賽的抑制作用更強(qiáng)。 結(jié)論阻斷Wnt信號(hào)通路對(duì)腫瘤的生長(zhǎng)有抑制作用，多西他賽和Wnt-1抗體對(duì)非小細(xì)胞肺癌的抑制有積極的效果。