目的 探討預(yù)存糖原對(duì)肝部分切除術(shù)中熱缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。方法 將38 例Child A-B 級(jí)擬行肝部分切除的原發(fā)性肝癌患者按入院順序分為試驗(yàn)組及對(duì)照組，每組19 例。試驗(yàn)組于術(shù)前24 h 內(nèi)靜脈滴注高濃度葡萄糖，對(duì)照組不做特殊處理。兩組患者均采用阻斷第一肝門方法行病變肝臟切除術(shù)。抽血檢驗(yàn)所有患者術(shù)前及術(shù)后第1、5 天的肝功能情況。分別于缺血前、缺血后及再灌注2 h 獲取正常肝組織，檢測(cè)所有患者肝組織糖原含量、缺血前、缺血后及再灌注2 h 肝組織超氧化物歧化酶（SOD）活性。采用實(shí)時(shí)定量PCR 方法檢測(cè)肝門阻斷前及再灌注2 h 后肝組織Bcl- 2 mRNA 轉(zhuǎn)錄水平。結(jié)果 試驗(yàn)組肝組織糖原含量明顯高于對(duì)照組（Plt;0.01），術(shù)后第1、5 天肝臟功能優(yōu)于對(duì)照組（Plt;0.05），在缺血后、再灌注2 h 其SOD 活性高于對(duì)照組（Plt;0.05），再灌注2 h 后試驗(yàn)組Bcl-2 mRNA 表達(dá)上調(diào)高于對(duì)照組。結(jié)論 術(shù)前預(yù)存糖原可顯著減輕患者肝切除術(shù)中因?qū)嵤└伍T阻斷所導(dǎo)致的缺血再灌注損傷，其機(jī)制可能與預(yù)存糖原上調(diào)肝臟Bcl-2 mRNA 轉(zhuǎn)錄有關(guān)。
目的 研究?jī)?nèi)皮素-3(endothelin-3,ET-3)mRNA的表達(dá)水平與急性胰腺炎時(shí)胰腺炎癥程度的關(guān)系。方法 將54只SD大鼠編號(hào)后隨機(jī)分為4組，其中假手術(shù)組9只，胰腺炎組、動(dòng)脈給藥組和靜脈給藥組〔多巴胺： 5 μg/（kg·min）〕各15只，按Aho法用4.5%?；悄懰徕c膽胰管逆行注射制作急性胰腺炎模型，分別在1、6及24 h取胰腺組織,采用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)檢測(cè)ET-3基因的轉(zhuǎn)錄水平，并觀察各組胰腺組織病理變化，確定ET-3 mRNA的表達(dá)水平與胰腺炎炎癥程度的關(guān)系。結(jié)果 模型制作后1、6及24 h均可見到ET-3 mRNA表達(dá)，各組（除假手術(shù)組外）均以6 h時(shí)ET-3 mRNA表達(dá)最強(qiáng)。除1 h外，動(dòng)脈給藥組ET-3 mRNA表達(dá)量明顯低于靜脈給藥組及胰腺炎組（P＜0.05，P＜0.01）； 而假手術(shù)組在任何時(shí)相均明顯低于另外3組（P＜0.05，P＜0.01）。各組胰腺組織病理學(xué)評(píng)分按假手術(shù)組→動(dòng)脈給藥組→靜脈給藥組→胰腺炎組的順序逐漸升高。結(jié)論 ET-3 mRNA的表達(dá)與胰腺炎炎癥程度有一定關(guān)系，ET-3 mRNA表達(dá)量隨胰腺炎嚴(yán)重程度的加重而增加； 急性胰腺炎中，多巴胺動(dòng)脈給藥比靜脈給藥有效。
目的 探討大腸癌患者外周血CK20 mRNA的表達(dá)及其意義。 方法 用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）方法檢測(cè)42例大腸癌患者術(shù)前、術(shù)后外周血及20例大腸癌患者新鮮癌組織標(biāo)本中CK20 mRNA的表達(dá)，另以20例健康成年自愿者作對(duì)照。 結(jié)果 42例大腸癌患者外周血CK20 mRNA呈陽(yáng)性表達(dá)者術(shù)前為19例（45.24%），術(shù)后為14例（33.33%）； 20例大腸癌患者新鮮癌組織中CK20 mRNA表達(dá)均為陽(yáng)性。而正常對(duì)照組20例外周血CK20 mRNA表達(dá)均為陰性。且大腸癌外周血CK20 mRNA陽(yáng)性表達(dá)與組織學(xué)類型無(wú)關(guān)（Pgt;0.05），但與有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、肝轉(zhuǎn)移及Dukes分期有關(guān)（P＜0.05）。 結(jié)論 檢測(cè)外周血中CK20 mRNA表達(dá)將有助于大腸癌的早期診斷、預(yù)后的判斷及治療方案的制定。
目的 探討希羅達(dá)（Xeloda）對(duì)人肝癌組織AFP mRNA表達(dá)的影響。方法 抽提所收集的希羅達(dá)治療組及對(duì)照組肝癌組織標(biāo)本總RNA（共41例），采用逆轉(zhuǎn)錄巢式聚合酶鏈反應(yīng)（RTnested PCR）技術(shù)檢測(cè)希羅達(dá)治療組及對(duì)照組AFP mRNA的表達(dá)情況。結(jié)果 以RT-nested PCR擴(kuò)增的AFP基因片段為101 bp，與原設(shè)計(jì)一致。在希羅達(dá)治療組中，21例肝癌組織標(biāo)本中有12例AFP mRNA呈陽(yáng)性表達(dá)，陽(yáng)性率為57.14%； 在對(duì)照組中，20例肝癌組織標(biāo)本中有18例AFP mRNA呈陽(yáng)性表達(dá)，陽(yáng)性率為90.00%，兩者間差異有顯著性意義（P＜0.05）。術(shù)后4周,希羅達(dá)治療組血清AFP濃度為（23.2±12.8） μg/L，明顯低于對(duì)照組的（39.6±24.3） μg/L（P＜0.05），而兩者術(shù)前血清AFP濃度差異無(wú)顯著性意義。結(jié)論 希羅達(dá)能有效抑制人肝癌組織AFP mRNA的表達(dá)，并降低其表達(dá)產(chǎn)物血清AFP濃度。其在治療原發(fā)性肝癌的臨床應(yīng)用價(jià)值值得進(jìn)一步研究。
目的探討高強(qiáng)度聚焦超聲治療對(duì)肝癌細(xì)胞血道播散的影響。方法應(yīng)用NestedRTPCR技術(shù)檢測(cè)19例患者高強(qiáng)度聚焦超聲治療前、后外周血AFP mRNA的表達(dá)，觀察其對(duì)肝癌細(xì)胞血道播散的影響。結(jié)果①高強(qiáng)度聚焦超聲治療前，19例肝癌患者外周血檢出AFP mRNA表達(dá)者11例（57.9%），良性疾病對(duì)照組均未檢出。治療前AFP mRNA表達(dá)陽(yáng)性率與血清AFP水平、腫瘤直徑、門靜脈癌栓、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移等臨床參數(shù)明顯相關(guān)(P＜0.05)。②余8例治療前AFP mRNA表達(dá)陰性者，有2例于術(shù)后即刻轉(zhuǎn)為陽(yáng)性，其中1例于72 h后又復(fù)轉(zhuǎn)為陰性； 19例患者于治療后1周時(shí)其AFP mRNA表達(dá)陽(yáng)性率（31.6%）低于治療前，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（Pgt;0.05）。③治療后1周時(shí)，腫瘤直徑≤8 cm者AFP mRNA表達(dá)陽(yáng)性率低于直徑gt;8 cm者(P＜0.05)。結(jié)論高強(qiáng)度聚焦超聲治療可能會(huì)降低肝癌的血道播散，特別是對(duì)于腫瘤直徑≤8 cm的肝癌患者，療效較好。
目的 研究CD15 mRNA表達(dá)與肝細(xì)胞癌（HCC）侵襲轉(zhuǎn)移和預(yù)后關(guān)系，以及與nm23H1 mRNA表達(dá)的相關(guān)性。方法 應(yīng)用原位雜交和免疫組織化學(xué)方法，檢測(cè)分析HCC組織中CD15 mRNA及其蛋白和nm23H1 mRNA表達(dá)。結(jié)果 99例HCC中，CD15 mRNA及其蛋白和nm23H1 mRNA表達(dá)陽(yáng)性率分別為38.4%、36.4%和76.8%。CD15 mRNA表達(dá)與蛋白表達(dá)一致，與nm23H1 mRNA表達(dá)呈負(fù)相關(guān)。CD15 mRNA及其蛋白和nm23H1 mRNA表達(dá)均與HCC侵襲轉(zhuǎn)移傾向和患者預(yù)后相關(guān)。結(jié)論 檢測(cè)CD15表達(dá)有可能成為HCC侵襲轉(zhuǎn)移和預(yù)后判斷的一項(xiàng)新的病理生物學(xué)指標(biāo)。
目的 探討手術(shù)操作是否會(huì)導(dǎo)致肝癌細(xì)胞的血行播散。方法 選擇14例無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移并行肝癌切除術(shù)的肝癌患者，提取患者術(shù)前和術(shù)后外周血標(biāo)本，于術(shù)中腫瘤切除后提取門靜脈和肝靜脈血標(biāo)本。采用巢式RT-PCR方法檢測(cè)血中AFP-mRNA的表達(dá)，觀察手術(shù)前后血液中AFP-mRNA表達(dá)陽(yáng)性率及表達(dá)水平的變化。 結(jié)果 術(shù)前外周血、手術(shù)切除腫瘤后門靜脈血和術(shù)后外周血中AFPmRNA表達(dá)陽(yáng)性率分別為42.9%，42.9%和35.7%，術(shù)中切除腫瘤后肝靜脈血中的表達(dá)陽(yáng)性率為57.1%，雖高于前三者，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，但AFP-mRNA表達(dá)水平明顯高于術(shù)前及術(shù)后外周血和術(shù)中門靜脈血（P＜0.05）。結(jié)論 手術(shù)中有包括肝癌細(xì)胞在內(nèi)的肝臟來(lái)源的細(xì)胞經(jīng)肝靜脈進(jìn)入血循環(huán)。
目的 觀察支氣管哮喘患者外周血CD4 + CD25 + 調(diào)節(jié)性T 細(xì)胞( CD4 + CD25 + Treg) 、Foxp3 mRNA 的水平及吸入糖皮質(zhì)激素對(duì)其的影響。方法 流式細(xì)胞儀檢測(cè)非急性發(fā)作期哮喘患者吸入激素前、后和健康志愿者( 正常對(duì)照組) 外周血單個(gè)核細(xì)胞( PBMCs) 中CD4 + CD25 + Treg 的比例, RT-PCR 檢測(cè)Foxp3 mRNA 表達(dá)變化, 肺功能儀檢測(cè)第1 秒用力呼氣容積占預(yù)計(jì)值百分比( FEV1%pred) 和呼氣峰流量( PEF) 。結(jié)果 哮喘組治療前CD4 + CD25 + Treg 水平及Foxp3 mRNA 的表達(dá)顯著低于正常對(duì)照組( P lt;0. 05) , 治療后CD4 +CD25 + Treg 水平及Foxp3 mRNA 的表達(dá)較治療前顯著升高( P lt; 0. 05) ; 哮喘組治療前FEV1% pred、PEF 顯著低于正常對(duì)照組( P lt; 0. 05) , 治療后FEV1% pred、PEF 較治療前顯著增加( P lt; 0. 05) 。結(jié)論 哮喘患者外周血中具有免疫抑制活性的CD4 + CD25 + Treg 數(shù)量減少, 功能下降, 參與了哮喘的發(fā)病過程; 吸入激素可以上調(diào)哮喘患者外周血CD4 + CD25 + Treg 及Foxp3 mRNA 的水平, 改善哮喘患者的肺功能。
目的 評(píng)價(jià)肺癌患者外周血中Lunx mRNA表達(dá)用于診斷肺癌微轉(zhuǎn)移的特異性和敏感性，探討肺癌轉(zhuǎn)移的早期診斷方法。 方法 2004年3月～2005年2月，以Lunx mRNA為腫瘤標(biāo)記物，采用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(reverse transcriptionpolymerase chain reaction，RT-PCR)技術(shù)，檢測(cè)60例Ⅰ～Ⅲ期行手術(shù)治療的肺癌患者（肺癌組）外周血Lunx mRNA的表達(dá),并以行手術(shù)治療的20例肺良性病變患者（肺良性病變組）及10例健康人外周血（健康對(duì)照組）作為對(duì)照。結(jié)合病理類型、臨床分期、隨訪，評(píng)價(jià)Lunx mRNA作為肺癌微轉(zhuǎn)移腫瘤標(biāo)記物的臨床意義。 結(jié)果 （1）肺癌組患者外周血中Lunx mRNA的陽(yáng)性表達(dá)率為46.7％（28/60），Lunx mRNA在肺良性病變組（0/20）和健康對(duì)照組外周血中無(wú)表達(dá)（0/10）；（2） Lunx mRNA在肺癌I期患者中陽(yáng)性表達(dá)率為8.3％（1/12），Ⅱ期患者中為333％(5/15)，Ⅲ期患者中為66.7％（22/33），Ⅰ期和Ⅱ期患者的Lunx mRNA表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，Ⅲ期與Ⅰ期、Ⅱ期患者的Lunx mRNA表達(dá)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=15.88， P=0.000)；（3） 在38例腺癌患者中17例Lunx mRNA表達(dá)為陽(yáng)性，在14例鱗癌患者中7例表達(dá)為陽(yáng)性，3例腺鱗癌患者中3例表達(dá)為陽(yáng)性，3例小細(xì)胞肺癌患者中1例表達(dá)為陽(yáng)性，1例大細(xì)胞肺癌和1例肉瘤樣癌患者表達(dá)為陰性。不同病理類型的肺癌患者的Lunx mRNA表達(dá)差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；（4） 截至2005年3月的隨訪發(fā)現(xiàn)，Lunx mRNA 表達(dá)陽(yáng)性的28例患者中有9例發(fā)生轉(zhuǎn)移，Lunx mRNA表達(dá)陰性的32例患者中僅1例發(fā)生轉(zhuǎn)移。 結(jié)論 在肺癌患者外周血微轉(zhuǎn)移的檢測(cè)中，Lunx mRNA表現(xiàn)出較高的敏感性和特異性，有可能成為診斷肺癌外周血微轉(zhuǎn)移較合適的分子標(biāo)記物。
目的研究苯丙酸諾龍對(duì)燒傷大鼠肝細(xì)胞白蛋白影響的分子機(jī)制. 方法將健康成年Wistar大鼠32只(雌雄各半)隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組各16只,制成燙傷大鼠模型.采用隨機(jī)對(duì)照設(shè)計(jì),應(yīng)用苯丙酸諾龍治療大鼠20%體表面積深Ⅱ度燙傷,分別于傷后第4、7、14和21天處死大鼠,留取肝組織,RNA一步法提取肝細(xì)胞總RNA,逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)一步法擴(kuò)增檢測(cè)白蛋白mRNA表達(dá)水平,免疫組織化學(xué)Envision法顯示檢測(cè)肝細(xì)胞雄激素受體表達(dá)水平. 結(jié)果實(shí)驗(yàn)組肝細(xì)胞白蛋白mRNA和雄激素受體表達(dá)水平明顯增高,在各時(shí)間點(diǎn)均明顯高于同期對(duì)照組(P＜0.05),傷后第7和14天為快速增長(zhǎng)時(shí)期(P＜0.05),白蛋白mRNA表達(dá)上調(diào)與雄激素受體表達(dá)上調(diào)有相關(guān)關(guān)系(r=0.936,P＜0.05). 結(jié)論苯丙酸諾龍能有效上調(diào)肝細(xì)胞白蛋白mRNA和雄激素受體的表達(dá)水平,促進(jìn)蛋白質(zhì)合成,有利于逆轉(zhuǎn)負(fù)氮平衡及創(chuàng)面愈合.