目的探討p16基因純和缺失和突變與胃癌發(fā)生的關(guān)系。方法采用PCR、多重PCR、PCRSSCP和DNA測序技術(shù)分析50例胃癌組織中p16基因的表達情況,其中早期胃癌7例,進展期胃癌43例。結(jié)果p16基因總的點突變頻率為8.00%(4/50),早期胃癌為14.29%(1/7),進展期胃癌為6.98%(3/43),兩者比較差異無顯著性意義(P>0.05); p16基因突變與腫瘤的大小、位置、分化程度和有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移無關(guān)(P>0.05)。 p16基因總的純和缺失頻率為16.00%(8/50),早期胃癌為0(0/7),進展期胃癌為18.60%(8/43),兩者比較差異有顯著性意義(P<0.05); p16 基因缺失頻率與腫瘤分化程度和有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有關(guān)(P<0.05)。結(jié)論p16基因點突變是胃癌發(fā)生的早期事件,對胃癌早期診斷有一定幫助; p16基因純和缺失是胃癌的晚期事件,可能與胃癌的轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)有關(guān)。
目的 探討p16、Rb蛋白在甲狀腺癌發(fā)生、發(fā)展中的作用及其相互關(guān)系。方法 采用免疫組織化學(xué)SP法對46例甲狀腺癌中p16、Rb蛋白表達情況進行檢測。結(jié)果 在甲狀腺癌中,p16蛋白的表達隨腫瘤的惡性程度增高而降低,與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、臨床分期及預(yù)后指數(shù)呈負(fù)相關(guān)。Rb蛋白在各型甲狀腺癌中均呈陽性表達,p16、Rb表達無相關(guān)性。結(jié)論 p16基因的異常表達在甲狀腺癌的發(fā)生、發(fā)展中有一定作用,而Rb基因可能無作用。
目的 觀察外源性p16基因質(zhì)粒導(dǎo)入食管癌患者食管鱗癌細(xì)胞系Ec109后的表達及其對Ec109細(xì)胞增殖生長狀況的影響。方法 根據(jù)轉(zhuǎn)染質(zhì)粒的不同或是否行p16 cDNA質(zhì)粒轉(zhuǎn)染分為三組,每組分別為5個樣本。PcDNA3-P16轉(zhuǎn)染組(P16轉(zhuǎn)染組):采用脂質(zhì)體(Lipofectamine)為載體,將PcDNA3-P16表達質(zhì)粒導(dǎo)入Ec109細(xì)胞;空載體轉(zhuǎn)染組:用PcDNA3-neo空載體以上述相同方法轉(zhuǎn)染,作空白對照;未轉(zhuǎn)染組:未用PcDNA3-P16質(zhì)粒轉(zhuǎn)染,作陰性對照。應(yīng)用Northern斑點雜交、免疫組織化學(xué)、免疫熒光檢測轉(zhuǎn)化細(xì)胞的P16蛋白變化;流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期變化,DNA片段化電泳檢測細(xì)胞凋亡。結(jié)果 P16轉(zhuǎn)染組外源性p16基因在Ec109細(xì)胞中表達后,細(xì)胞生長速度減慢,克隆形成能力下降,瞬時表達時有細(xì)胞凋亡發(fā)生,穩(wěn)定表達后細(xì)胞存在G1期阻滯;空載體轉(zhuǎn)染組和未轉(zhuǎn)染組均未觀察到以上結(jié)果。結(jié)論 脂質(zhì)體介導(dǎo)的外源性p16基因轉(zhuǎn)染對Ec109細(xì)胞有生長抑制作用,p16基因瞬時表達可誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。
目的 為了探討p16基因與食管癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系.方法 應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)、單鏈構(gòu)象多態(tài)分析(PCR-SSCP)方法檢測30例食管癌中p16基因的純合性缺失和突變情況,并分析p16基因變異與食管癌的病理關(guān)系.結(jié)果 30例食管癌患者中4例為p16基因純合性缺失,2例存在突變.6例陽性樣品與其它樣品在年齡、飲酒史方面差異有顯著性(P<0.01),與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、病理分期有差異(P<0.05);而與性別、腫瘤長度、腫瘤部位、病理類型無差異(P>0.05).結(jié)論 抑癌基因p16在食管癌中存在基因變異,其在食管癌的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用.
目的研究p16基因甲基化在乳腺癌中的分布情況,并探討其與乳腺癌發(fā)生、發(fā)展的關(guān)系。方法采用甲基化特異的PCR技術(shù)檢測四川省腫瘤醫(yī)院乳腺科2008年3~9月期間收治的38例原發(fā)性乳腺癌組織及距離腫瘤>5 cm以遠(yuǎn)的正常乳腺組織中p16基因啟動子區(qū)CpG島甲基化頻率。結(jié)果乳腺癌組織中p16基因啟動子區(qū)CpG島甲基化頻率〔31.6%(12/38)〕明顯高于其正常乳腺組織〔5.3%(2/38)〕,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.003)。有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的乳腺癌患者中p16基因甲基化頻率〔45.5%(10/22)〕高于無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移患者〔12.5%(2/16)〕,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.044)。結(jié)論p16基因啟動子區(qū)CpG島甲基化可能在乳腺癌發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要作用。