目的 探討鈣離子對(duì)肝臟的損傷作用。方法 應(yīng)用含膠原酶保存液灌注大鼠肝臟制成不同細(xì)胞成活率的肝細(xì)胞懸液，低溫保存肝臟細(xì)胞。應(yīng)用Fura-2/AM標(biāo)記測(cè)細(xì)胞內(nèi)鈣。 結(jié)果 ①低溫保存2小時(shí)肝細(xì)胞： 實(shí)驗(yàn)1組（細(xì)胞成活率為5%）肝細(xì)胞內(nèi)鈣值為（1055.0±30.79） nmol/L； 實(shí)驗(yàn)2組（細(xì)胞成活率為10%）肝細(xì)胞內(nèi)鈣值為（853.0±20.42） nmol/L； 實(shí)驗(yàn)3組（細(xì)胞成活率為30%）肝細(xì)胞內(nèi)鈣值為（616.0±13.20） nmol/L； 實(shí)驗(yàn)4組（細(xì)胞成活率為50%）肝細(xì)胞內(nèi)鈣值為（562.0±26.06） nmol/L； 實(shí)驗(yàn)5組（細(xì)胞成活率為70%~80%）肝細(xì)胞內(nèi)鈣值為（318.0±13.01） nmol/L; 實(shí)驗(yàn)6組(細(xì)胞成活率為90%)肝細(xì)胞內(nèi)鈣值為（114.6±6.11） nmol/L。②低溫保存24小時(shí)肝細(xì)胞: 實(shí)驗(yàn)A組(細(xì)胞成活率為10%)肝細(xì)胞內(nèi)鈣值為(1704.0±70.11) nmol/L； 實(shí)驗(yàn)B組(細(xì)胞成活率為50%)肝細(xì)胞內(nèi)鈣值為(1125.0±23.22) nmol/L。隨著細(xì)胞成活率的降低，細(xì)胞內(nèi)鈣值逐漸升高； 在同樣細(xì)胞成活率情況下，隨著保存時(shí)間延長(zhǎng)（2小時(shí)與24小時(shí)）細(xì)胞內(nèi)鈣值增高1倍左右。結(jié)論 在低溫保存過程中，鈣超載是造成肝臟細(xì)胞缺血再灌注損傷的一個(gè)主要因素。
目的 探討5-氟尿嘧啶(5-FU)和柳氮磺胺吡啶(sulfasalazine, SZ)對(duì)裸鼠皮下移植瘤胰腺癌細(xì)胞BxPC-3凋亡基因的作用。方法 用RT-PCR和Western blot法分別檢測(cè)5-FU及SZ單獨(dú)或聯(lián)合作用后裸鼠皮下移植瘤凋亡相關(guān)基因NF-κB (p65)、bcl-2及cyclinD1 mRNA和蛋白表達(dá)水平以及Bax蛋白表達(dá)水平的變化。結(jié)果 5-FU (7.5和15 mg/kg)和SZ(10和20 mg/kg)單獨(dú)或聯(lián)合作用裸鼠皮下移植瘤，其NF-κB (p65) mRNA表達(dá)相對(duì)含量和蛋白表達(dá)水平與各自對(duì)照組比較，除SZ組2個(gè)亞組外，其余各組均明顯降低（P＜0.01）； bcl-2和cyclinD1 在mRNA和蛋白水平以及Bax蛋白表達(dá)量與各自對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）； 上述指標(biāo)經(jīng)多因素方差分析顯示二者間有明顯的交互作用。結(jié)論 Bax水平上調(diào), bcl-2、cyclinD1及NF-κB (p65)水平下調(diào)可能是SZ可協(xié)同增強(qiáng)5-FU誘導(dǎo)裸鼠皮下移植瘤胰腺癌細(xì)胞BxPC-3凋亡的機(jī)理之一。
【摘要】目的 探討保存溫度對(duì)移植胰腺功能的影響，確定大鼠胰腺的最適保存溫度。方法 采用原位灌注、單純低溫保存及建立同系大鼠異位全胰十二指腸移植模型，按不同保存溫度（0 ℃、4 ℃、8 ℃、12 ℃）進(jìn)行分組，保存6 h后進(jìn)行移植，通過光鏡觀察胰腺組織結(jié)構(gòu)變化，高壓液相色譜法檢測(cè)保存6 h后移植物ATP和總腺苷核苷酸（TAN）含量。移植24 h后，檢測(cè)血糖、血清中脂肪酶及淀粉酶含量，測(cè)定移植胰腺組織中髓過氧化酶(MPO)活性，并進(jìn)行組織學(xué)觀察。結(jié)果 4 ℃組保存6 h后和移植24 h后的胰腺組織結(jié)構(gòu)損傷明顯輕于其它組。保存6 h后胰腺組織中ATP和TAN水平在4 ℃組、0 ℃組、8 ℃組和12 ℃組依次降低，差異有顯著性意義（P＜0.05）。移植24 h后血糖、血清脂肪酶及胰腺組織中MPO水平在4 ℃組、0 ℃組、8 ℃組和12 ℃組依次增高，差異均有顯著性意義（P＜0.05）。結(jié)論4 ℃對(duì)大鼠胰腺是最適保存溫度，它能夠明顯減輕大鼠胰腺的冷損傷程度。