【摘要】 目的 觀察t(4; 22)致血小板源性生長(zhǎng)因子受體α（the platelet-derived growth factor receptor alpha， PDGFRA）異常的髓系/淋巴系腫瘤的臨床特點(diǎn)?！》椒ā?duì)2010年6月收治的1例t(4; 22)致PDGFRA異常的髓系/淋巴系腫瘤患者的臨床資料進(jìn)行回顧性分析，并對(duì)其臨床特點(diǎn)、實(shí)驗(yàn)室檢查、診斷、治療進(jìn)行總結(jié)。 結(jié)果 該疾病臨床表現(xiàn)及骨髓涂片檢查類(lèi)似慢性粒細(xì)胞白血?。╟hronic myelogenous leukemia，CML），但無(wú)CML特征性Ph染色體和（或）BCR/ABL融合基因，而細(xì)胞遺傳學(xué)檢測(cè)顯示4號(hào)與22號(hào)染色體易位，診斷為t(4; 22)致PDGFRA異常的髓系/淋巴系腫瘤。采用羥基脲及干擾素治療后可獲得完全血液學(xué)緩解。 結(jié)論 t(4; 22)致PDGFRA異常的髓系/淋巴系腫瘤是一類(lèi)罕見(jiàn)疾病，臨床表現(xiàn)與CML相似，t(4; 22)及BCR/PDGFRA融合基因陽(yáng)性是診斷該類(lèi)疾病的關(guān)鍵?！続bstract】 Objective To observe the clinical features of myeloid and lymphoid neoplasms with t (4; 22) induced abnormalities of the platelet-derived growth factor receptor alpha (PDGFRA) to increase the identification and reduce the misdiagnosis. Methods The clinical data of one patient with myeloid and lymphoid neoplasm with t (4; 22) induced abnormalities of PDGFRA diagnosed in June 2010 was retrospectively analyzed. We summarized the clinical features, morphology, genetics, diagnostic criteria and therapy about this kind of disease. Results The patient had a clinical manifestation and bone marrow smear result of chronic myelogenous leukemia (CML). But the result of genetic analysis found no translocation of chromosomes 9 and 22 juxtaposing BCR and ABL gens. Cytogenetic analysis showed an abnormal karyotype with rearrangement of chromosomes 4 and 22. So the patient was diagnosed myeloid and lymphoid neoplasms with t (4; 22) induced abnormalities of PDGFRA. After receiving interferon and hydroxyurea, the patient achieved complete hematologic remission. Conclusion Myeloid and lymphoid neoplasms with t (4; 22) induced abnormalities of PDGFRA is a rare kind of disease. Its clinical feature is similar to that of CML. The key of diagnosis is genetics.
目的:研究丹參酮ⅡA(Tan ⅡA)對(duì)急性早幼粒細(xì)胞白血病(APL)細(xì)胞株NB4細(xì)胞誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞株(ECV304)促凝活性(PCA)的影響,并對(duì)其機(jī)制作初步探討。方法:(1)分別用1.0μg/mL TanⅡA、0.3μg/mLATRA、0.01%DMSO、PRMI1640處理NB4細(xì)胞24、48和72h,取其上清液作為條件培養(yǎng)基(hNB4-CM)。將這些CM分別與ECV304細(xì)胞在37oC共同孵育0、4、8和12h,用反復(fù)凍融法制備ECV304細(xì)胞裂解液,采用一期凝血法測(cè)定其PCA;采用ELISA法測(cè)定條件培養(yǎng)基中的TNF-α 。(2)ECV304細(xì)胞與1.0μg/mL TanⅡA及TanⅡA 72h-NB4-CM 在37oC共同分別孵育6、12、24和48h,并以ATRA和DMSO分別作為陽(yáng)性和陰性對(duì)照,用上述相同方法測(cè)定ECV304細(xì)胞裂解液的PCA。結(jié)果:(1)1.0 μg/mL Tan ⅡA可以誘導(dǎo)NB4細(xì)胞分化,其作用NB4細(xì)胞的培養(yǎng)基有一定的升高ECV304細(xì)胞PCA的作用,該作用在孵育4h時(shí)達(dá)高峰,之后ECV304細(xì)胞PCA逐漸下降。與0.3μg/mL ATRA的作用無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(Pgt;0.05)。(2)1.0 μg/mL的TanⅡA對(duì)TanⅡA72h-NB4-CM促ECV304細(xì)胞PCA有抑制作用,其強(qiáng)度隨作用時(shí)間增加而增加,與1.0μmol/L ATRA比較,Pgt;0.05。(3)TanⅡA作用NB4細(xì)胞的培養(yǎng)基中TNF-α濃度,在作用前7h內(nèi)隨作用時(shí)間增加而增加,與0.3μg/mL ATRA比較無(wú)差異(Pgt;0.05)。結(jié)論:Tan ⅡA能誘導(dǎo)NB4細(xì)胞分化,后者在分化過(guò)程中釋放的TNF-α可能與ECV304細(xì)胞PCA活性升高有關(guān);Tan-ⅡA又能抑制Tan-ⅡA-NB4-CM增強(qiáng)ECV304細(xì)胞PCA的作用。
目的 比較使用流式細(xì)胞儀355 nm和407 nm激光器激發(fā)Hochest33342檢測(cè)細(xì)胞凋亡。 方法 通過(guò)ATO藥物誘導(dǎo)急性早幼粒白血病細(xì)胞（NB4）及血清饑餓法誘導(dǎo)人肺癌細(xì)胞（NCl-H292）細(xì)胞凋亡，取24、48 h時(shí)間點(diǎn)收集細(xì)胞，進(jìn)行Hoechst33342-碘化丙啶（PI）雙染，分別在配置有兩種激光器的流式細(xì)胞儀上檢測(cè)細(xì)胞凋亡。 結(jié)果 細(xì)胞經(jīng)處理后24 h，355 nm激光器檢測(cè)NB4細(xì)胞凋亡率Hoechst33342+/PI-：（28.20 ± 4.80）%；NCl-H292細(xì)胞凋亡率Hoechst33342+/PI-：（22.47 ± 2.78）%。407 nm激光器檢測(cè)NB4細(xì)胞凋亡率Hoechst33342+/PI-：（25.10 ± 6.19）%。NCl-H292細(xì)胞凋亡率Hoechst33342+/PI-：20.47 ± 1.46%。處理后48 h，355 nm激光器檢測(cè)NB4細(xì)胞凋亡率Hoechst33342+/PI-：（33.60 ± 3.75）%。NCl-H292細(xì)胞凋亡率Hoechst33342+/PI-：（26.77 ± 1.16）%。407 nm激光器檢測(cè)NB4細(xì)胞凋亡率Hoechst33342+/PI-：（29.47 ± 2.33）%。NCl-H292細(xì)胞凋亡率Hoechst33342+/PI-：（31.47 ± 3.05）%。兩種細(xì)胞處理后比處理前凋亡率明顯升高，但355 nm激光器與407 nm激光器檢測(cè)的凋亡結(jié)果差異不明顯（P＞0.05）。 結(jié)論 407 nm激光器激發(fā)Hoechst33342可檢測(cè)細(xì)胞凋亡。
【摘要】 目的 分析異基因造血干細(xì)胞移植術(shù)（allogeneic hematopoietic stem cell transplantation，allo-HSCT）后出血性膀胱炎（hemorrhagic cystitis，HC）相關(guān)的危險(xiǎn)因素，動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)受者尿BK病毒（BK virus，BKV），分析其與HC發(fā)病的關(guān)系?！》椒ā』仡櫺苑治?003年3月-2008年1月期間接受allo-HSCT的121例患者的資料，選擇8個(gè)臨床參數(shù)[年齡、性別、疾病類(lèi)型、移植時(shí)疾病狀態(tài)、供者類(lèi)型、預(yù)處理方案、急性移植物抗宿主病（acute graft-versus-host disease，aGVHD）、aGVHD的預(yù)防方案]作COX回歸分析。采用SYBR Green染料實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)法對(duì)2006年9月-2008年1月42例allo-HSCT患者尿BKV載量進(jìn)行動(dòng)態(tài)監(jiān)測(cè)，分析被檢查者尿液BKV基因載量與HC發(fā)生以及嚴(yán)重程度的關(guān)系?！〗Y(jié)果 121例患者中有24例發(fā)生HC，發(fā)病時(shí)間為術(shù)后0~63 d，中位時(shí)間40 d；持續(xù)時(shí)間7~150 d，中位時(shí)間22 d。Ⅱ~Ⅳ度aGVHD為HC的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[RR=8.304，95%CI（1.223，56.396），P=0.030]。allo-HSCT受者尿液中BKV檢出率為100%（42/42）。與正常人及未發(fā)生HC的allo-HSCT受者相比，HC患者尿中BKV基因載量具有更高平均峰值。 結(jié)論?、騸Ⅳ度aGVHD，尿中BKV DNA高載量與HC的發(fā)生有相關(guān)性?！続bstract】 Objective To identify the risk factors for hemorrhagic cystitis (HC) after allogeneic hematopoietic stem cell transplantation (allo-HSCT), and define the quantitative relationship between BK virus (BKV) DNA load with HC. Methods The medical records of 121 patients undergoing allo-HSCT from March 2003 to January 2008 were retrospectively analyzed. Eight clinical parameters were selected for COX regression analysis, including age, sex, underlying disease, disease status at transplant, donor type, conditioning regimen, acute graft-versus-host disease (aGVHD), and GVHD prophylaxis. From September 2006 to January 2008, mid-stream urine samples were continuously collected from 42 patients with allo-HSCT. SYBR green real-time polymerase chain reaction, technique was utilized to define the quantitative relationship between BKV DNA load and HC. Results Twenty-four out of 121 patients developed HC. The median time of onset was 40 days after HSCT, ranged from 0 to 63 days. The disease lasted for 7 to 150 days, with a median duration of 22 days. Grade Ⅱ-Ⅳ aGVHD [RR=8.304, 95% CI (1.223,56.396); P=0.030] was identified as an independent risk factor for the occurrence of HC. BKV excretion was detected in 100% (42/42) of the recipients of allo-HSCT. When compared with asymptomatic patients and allo-HSCT recipients without HC, patients with HC had a significantly higher mean peak BKV DNA load. Conclusions Patients are at an increased risk of developing HC if they have grade Ⅱ-Ⅳ aGVHD. A correlation between the load of BKV and incidence of HC may exist.
目的 建立急性白血病（AL）患者八色流式免疫表型分析起始管方案。 方法 用胞膜CD3（CD3）、CD19、CD10、CD34、CD45、胞漿CD79a（cCD79a）、髓過(guò)氧化物酶（MPO)和胞漿CD3（cCD3）等8種抗體建立八色流式染色方案。膜表面抗體直接染色；膜內(nèi)抗體經(jīng)固定破膜，再染色后上機(jī)檢測(cè)。將3個(gè)血小板減少患者骨髓標(biāo)本分別進(jìn)行抗體的單色染色和缺一色染色；最后對(duì)17例確診的AL初發(fā)患者標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)。 結(jié)果 用單色染色來(lái)確定染色方案中各抗體的檢測(cè)電壓及熒光補(bǔ)償；缺一色染色中，陽(yáng)性細(xì)胞群較單色染色變化均＜10%，表明方案中的各抗體相互作用小。17例AL初發(fā)患者中，6例急性B淋巴細(xì)胞白血病原始細(xì)胞均為CD34和CD19陽(yáng)性，5例cCD79a陽(yáng)性和4例CD10陽(yáng)性；4例急性T淋巴細(xì)胞白血病患者均為cCD3陽(yáng)性；6例急性髓細(xì)胞白血病均為CD34和MPO陽(yáng)性；1例B+T混合表型AL患者CD34、cCD3、CD19、cCD79a及CD10均為陽(yáng)性，MPO和CD3為陰性，此檢測(cè)方案能夠確定各類(lèi)AL的細(xì)胞類(lèi)型。 結(jié)論 建立了AL患者八色流式免疫表型分析起始管方案，操作簡(jiǎn)便快速，適用于臨床檢測(cè)。
目的建立九色流式細(xì)胞術(shù)定量檢測(cè)人血漿中不同來(lái)源微粒的實(shí)驗(yàn)方法。 方法用CD235a、CD41a、CD45、CD34、CD66b、CD20、CD3、CD14等8種抗體和Annexin-V建立定量檢測(cè)人血漿中不同來(lái)源微粒九色流式染色方案。用乏血小板血漿標(biāo)本分別進(jìn)行抗體的單色染色和缺一色染色實(shí)驗(yàn)，確定補(bǔ)償和電壓后，2014年12月-2015年1月對(duì)10例正常成人的血漿標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)分析，并進(jìn)行重復(fù)試驗(yàn)及稀釋試驗(yàn)。 結(jié)果缺一色染色中，陽(yáng)性微粒群較單色染色變化均＜15%。系列稀釋血漿中的血小板及紅細(xì)胞來(lái)源微粒具有良好的直線相關(guān)性。重復(fù)試驗(yàn)中，紅細(xì)胞、血小板、粒細(xì)胞來(lái)源微粒的變異系數(shù)均＜10%。檢測(cè)的10例正常成人乏血小板血漿標(biāo)本，能分別檢測(cè)到血小板、紅細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、單核細(xì)胞、粒細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞及T淋巴細(xì)胞來(lái)源微粒，其平均濃度及范圍分別為132.6個(gè)/μL（60.6~288.9個(gè)/μL）、35.4個(gè)/μL（22.0~99.7個(gè)/μL）、21.6個(gè)/μL（3.3~45.5個(gè)/μL）、13.9個(gè)/μL（7.3~35.1個(gè)/μL）、60.0個(gè)/μL（22.5~101.2個(gè)/μL）、21.9個(gè)/μL（6.0~33.4個(gè)/μL）、1.2個(gè)/μL（0.7~2.8個(gè)/μL）。 結(jié)論建立了九色流式細(xì)胞術(shù)定量檢測(cè)人血漿中不同來(lái)源微粒的實(shí)驗(yàn)方案，該方法簡(jiǎn)單實(shí)用，適合臨床推廣應(yīng)用。
目的以胃癌腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物 CD44 和 CD54 為靶點(diǎn)，利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)胃癌患者外周血中 CD45–CD44+CD54+細(xì)胞亞群含量，并結(jié)合臨床病理學(xué)特征分析其臨床意義。方法納入 2016 年 12 月至 2017 年 9 月期間四川大學(xué)華西醫(yī)院胃腸外科 38 例胃癌患者作為研究對(duì)象，利用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)其外周血中 CD45–CD44+CD54+細(xì)胞亞群含量，并分析其臨床意義。結(jié)果38 例患者的 CD45–CD44+CD54+細(xì)胞中位數(shù)為 541.9 個(gè)/mL（71.7～8 057.0 個(gè)/mL），其中 R0 組為 555.9 個(gè)/mL（71.7～8 057.0）個(gè)/mL。CD45–CD44+CD54+細(xì)胞中位數(shù) TNM Ⅰ–Ⅱ期患者為 858.6 個(gè)/mL（183.5～8 057.0 個(gè)/mL），高于 TNM Ⅲ–Ⅳ期患者的 364.6 個(gè)/mL（71.7～2 269.7 個(gè)/mL），P=0.015；N0 組為 941.4 個(gè)/mL（183.5～8 057.0 個(gè)/mL，高于 N+組的 379.3 個(gè)/mL（71.7～2 269.7 個(gè)/mL），P=0.002。T3–4 期（P=0.025）、N+期（P=0.009）和 TNM Ⅲ–Ⅳ期（P=0.012）的患者中 CD45–CD44+CD54+高細(xì)胞量亞組所占比例較低。聯(lián)合 CD45–CD44+CD54+細(xì)胞量和腫瘤大小可以對(duì) N 分期和 TNM 分期做出更準(zhǔn)確的判斷，但其與其他臨床病理學(xué)特征和預(yù)后無(wú)顯著相關(guān)。結(jié)論CD45–CD44+CD54+細(xì)胞亞群數(shù)量與腫瘤進(jìn)展之間有相關(guān)性，可能用于判斷 TNM 分期和 N 分期，但本研究納入樣本較少，仍需擴(kuò)大樣本論證其在胃癌患者中的臨床意義。