目的 研究擔載抗腫瘤藥物5-氟尿嘧啶（5-FU）的左旋聚乳酸（PLLA）共混羊毛蛋白納米纖維藥膜的緩釋功能及其對結腸癌細胞的體外抑制效果。方法 將PLLA與羊毛蛋白共混交聯，并加入抗腫瘤藥物5-FU，利用高壓靜電紡絲技術將共混溶液制作成具有緩釋效果的納米纖維薄膜。通過掃描電鏡（SEM）觀察其形貌。以高效液相色譜法（HPLC）測定5-FU/PLLA羊毛蛋白藥膜中5-FU的緩釋效果。采用噻唑藍（MTT）比色法，檢測藥膜對結腸癌細胞HCT116的體外殺傷效果。同時采用倒置相差顯微鏡、透射電子顯微鏡（TEM）觀測實驗組細胞的生長情況。結果 由SEM可以看出5-FU能夠均勻分布在納米纖維藥膜中，HPLC顯示5-FU能夠緩慢釋放并基本符合零級動力學規(guī)律。采用不同處理因素后，通過顯微鏡觀察，藥膜浸泡時間越長的實驗組細胞出現腫脹、凋亡、壞死的情況越明顯。MTT檢測納米藥膜實驗組的細胞存活率為（47.5±2.8）%，而不含藥物的純膜組對細胞基本無影響，其存活率為（93.9±2.8）%，差異具有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）。結論 5-FU/PLLA羊毛蛋白納米藥膜有明顯緩釋效果，具有較好的腫瘤細胞抑制作用和潛在的醫(yī)療應用價值。
目的探討具有開放孔結構的左旋聚乳酸 ［poly（L-lactic acid），PLLA］/卵磷脂多孔支架的制備方法及成骨性能。方法采用熱致相分離法制備含不同比例卵磷脂（0、5%、10%、20%、30%、40%、50%）的 PLLA/卵磷脂多孔支架（分別對應為 A、B、C、D、E、F、G 組）。掃描電鏡觀察各支架表面形貌；廣角 X 射線衍射（X-ray diffraction，XRD）和差示掃描量熱法（differential scanning calorimetry，DSC）檢測各支架結晶度；測量各組支架吸水率；采用細胞計數試劑盒 8（cell counting kit 8，CCK-8）法檢測小鼠 BMSCs 在各支架表面的增殖情況；通過檢測 ALP 活性觀察小鼠 BMSCs 在各組支架上的成骨分化能力。最后使用 SD 大鼠顱骨缺損模型觀察含不同比例卵磷脂的支架在動物體內的骨修復情況，采用 Micro-CT 對缺損處進行三維模型重建，并對缺損處的新生骨體積和骨礦物密度進行定量分析。結果掃描電鏡觀察示，卵磷脂會導致支架孔徑略微縮??；當卵磷脂含量為 50% 時，支架表面會出現片狀結構。廣角 XRD 和 DSC 檢測示，支架結晶度隨卵磷脂含量的升高而逐漸降低。親水性測試示，隨著卵磷脂含量增加，支架的親水性逐漸增強。CCK-8 法檢測示，隨培養(yǎng)時間增加，BMSCs 在各組支架上均有明顯增殖；培養(yǎng) 7 d 時，C、D、E、F 組吸光度（A）值顯著高于 A、B、G 組（P<0.05），C、D、E、F 組間比較差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。成骨誘導 14 d 時，隨卵磷脂含量增加，各組 ALP 活性出現了顯著差異，D、E、F、G 組 ALP 活性顯著高于 A、B、C 組（P<0.05）。大鼠顱骨缺損修復實驗中，Micro-CT 檢測及新生骨體積和骨礦物密度結果均顯示，含 30% 卵磷脂支架修復效果最佳。結論通過熱致相分離法制備的 PLLA/卵磷脂多孔支架的細胞相容性、成骨分化性能及骨修復能力顯著強于單純 PLLA 支架；卵磷脂含量適宜的 PLLA/卵磷脂多孔支架有望作為骨組織工程支架材料。
目的探討絲素蛋白-左旋聚乳酸（silk fibroin-poly-L-lactic acid，SF-PLLA）微載體對脂肪來源干細胞（adipose-derived stem cells，ADSCs）的擴增作用及對其分化能力的影響。方法使用脂肪抽吸術患者自愿捐贈脂肪組織，經酶消化法提取 ADSCs。取第 3 代 ADSCs 分別接種于 CultiSpher G 和 SF-PLLA 微載體（分別設為 A、B 組），細胞-微載體復合物應用旋轉生物反應器培養(yǎng)，并采用正常二維平面?zhèn)鞔囵B(yǎng)的 ADSCs 作為對照組（C 組）。應用掃描電鏡觀察兩種微載體結構及細胞生長狀況；Live/Dead 染色觀察細胞在兩種微載體上分布及成活情況；DNA 定量法檢測兩種微載體上細胞增殖情況；培養(yǎng) 18 d 實時熒光定量 PCR（real-time fluorescence quantitative PCR，qRT-PCR）檢測 3 組 ADSCs 成軟骨、成骨、成脂相關基因表達，行流式細胞術鑒定 MSCs 表面標志物，并行成軟骨、成骨、成脂三系分化鑒定。結果ADSCs 在兩種微載體上均可黏附并實現高效擴增，擴增 18 d 時兩種微載體上 ADSCs 總擴增量差異無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。對擴增所得 ADSCs 行 qRT-PCR 檢測示，與 C 組比較，B 組成軟骨相關基因（蛋白聚糖、軟骨寡聚基質蛋白、軟骨特異性基因 SOX9）呈顯著上調，A 組成脂相關基因（過氧化物酶體增殖物激活受體 γ、脂蛋白酯酶、脂聯素基因）呈顯著上調，差異均有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。流式細胞術檢測與三系分化鑒定顯示兩種微載體擴增后細胞仍為 ADSCs，仍具有三系分化能力。結論SF-PLLA 微載體可用于擴增 ADSCs，且擴增所得細胞成軟骨分化趨勢顯著提高，成脂分化趨勢降低。