目的 總結(jié)關(guān)節(jié)鏡技術(shù)在踝關(guān)節(jié)融合術(shù)中的應(yīng)用。 方法 2005 年4 月－ 2009 年4 月，采用關(guān)節(jié)鏡下踝關(guān)節(jié)融合術(shù)治療12 例踝關(guān)節(jié)病變患者。男9 例，女3 例；年齡21 ～ 56 歲，平均38.6 歲。創(chuàng)傷性關(guān)節(jié)炎10 例，感染性關(guān)節(jié)炎2 例。左足4 例，右足8 例。病程5 個月～ 14 年。 結(jié)果 術(shù)后切口均Ⅰ期愈合。12 例均獲隨訪，隨訪時間14 ～ 36 個月，平均19 個月。術(shù)后患者行走恢復(fù)正常，踝關(guān)節(jié)無腫脹及明顯疼痛。術(shù)后3 ～ 7 個月X 線片示踝關(guān)節(jié)均骨性融合。 結(jié)論 關(guān)節(jié)鏡下行踝關(guān)節(jié)融合術(shù)具有微創(chuàng)的優(yōu)點，且術(shù)后關(guān)節(jié)融合率高。
目的探討 p38 絲裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase，MAPK）通路在 TGF-β1/結(jié)締組織生長因子（connective tissue growth factor，CTGF）調(diào)控人腰椎黃韌帶增生肥厚中的作用機制。方法取腰椎間盤突出髓核摘除術(shù)中獲得的黃韌帶組織，采用膠原酶預(yù)消化組織塊培養(yǎng)法分離培養(yǎng)黃韌帶細(xì)胞。分別用細(xì)胞外調(diào)節(jié)蛋白激酶通路阻斷劑 PD98059、c-Jun 氨基末端激酶通路阻斷劑 SP600125、p38 通路阻斷劑 SB203580 處理黃韌帶細(xì)胞，實時熒光定量PCR（real-time fluorescence quantitative PCR，qRT-PCR）檢測 CTGF、Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原 mRNA 相對表達(dá)量。然后取黃韌帶細(xì)胞分為 A、B、C、D 組，分別以小干擾 RNA（small interfering RNA，siRNA）、p38 siRNA、siRNA+3 ng/mL TGF-β1、p38 siRNA+3 ng/mL TGF-β1 轉(zhuǎn)染細(xì)胞，轉(zhuǎn)染 24 h 后行免疫熒光染色觀察 p38 和磷酸化 p38（phosphorylation p38，p-p38）表達(dá)，qRT-PCR 檢測各組 CTGF、Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原 mRNA 相對表達(dá)量，Western blot 檢測各組 CTGF 蛋白表達(dá)。結(jié)果p38 通路阻斷劑 SB203580 可明顯降低黃韌帶細(xì)胞 CTGF、Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原 mRNA 相對表達(dá)量（P<0.05）。轉(zhuǎn)染 24 h 后，免疫熒光染色顯示 A、C、D 組細(xì)胞呈陽性反應(yīng)，有 p38、p-p38 表達(dá)，且 C、D 組強于 A 組；B 組細(xì)胞呈陰性反應(yīng)，無 p38、p-p38 表達(dá)。與 A 組相比，B 組 CTGF、Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原 mRNA 相對表達(dá)量以及 CTGF 蛋白相對表達(dá)量顯著減少，C、D 組顯著增加，C 組較 D 組進(jìn)一步增加，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。結(jié)論p38 MAPK 通路介導(dǎo) TGF-β1/CTGF 表達(dá)，在人腰椎黃韌帶細(xì)胞增生肥厚過程中具有重要作用。
目的探討 TGF-β1 誘導(dǎo)的黃韌帶細(xì)胞增生效應(yīng)及其對結(jié)締組織生長因子（connective tissue growth factor，CTGF）表達(dá)的影響。方法取腰椎椎間盤突出髓核摘除術(shù)中的黃韌帶組織，采用膠原酶預(yù)消化組織塊培養(yǎng)法分離培養(yǎng)黃韌帶細(xì)胞。采用形態(tài)學(xué)觀察、免疫熒光染色觀察、MTT 法檢測細(xì)胞增殖情況進(jìn)行細(xì)胞鑒定。取第 3 代黃韌帶細(xì)胞分為 5 組，A、B、C、D 組分別于細(xì)胞中加入 3 ng/mL TGF-β1、50 ng/mL CTGF、3 ng/mL TGF-β1+CTGF 中和抗體（1∶500）封閉、50 ng/mL CTGF+CTGF 中和抗體（1∶500）封閉，E 組加入無血清 DMEM 作為對照。采用 MTT 法檢測 TGF-β1 和 CTGF 對黃韌帶細(xì)胞增殖的影響，Western blot 檢測 CTGF 蛋白表達(dá)，實時熒光定量 PCR（real-time fluorescence quantitative PCR，qRT-PCR）檢測Ⅰ型膠原、Ⅲ型膠原、CTGF 基因表達(dá)。結(jié)果培養(yǎng)的黃韌帶細(xì)胞形態(tài)呈多樣性，均表現(xiàn)出典型的黃韌帶成纖維細(xì)胞表型；所有細(xì)胞均表達(dá)Ⅰ型膠原蛋白及波形蛋白，部分細(xì)胞表達(dá)Ⅲ型膠原蛋白；MTT 鑒定示隨培養(yǎng)時間延長，各代細(xì)胞吸光度（A）值均逐漸增加，同代細(xì)胞各時間點間 A 值比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05），相同時間點各代細(xì)胞間 A 值比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。培養(yǎng) 24 h MTT 法檢測示 A、B 組細(xì)胞 A 值顯著高于 E 組（P<0.05）；而加入 CTGF 中和抗體后，C、D 組 A 值降低，但仍高于 E 組（P<0.05）；A、C 組間及 B、D 組間比較差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。Western blot 檢測示 A、B 組 CTGF 蛋白相對表達(dá)量明顯高于 E 組（P<0.05）；而加入 CTGF 中和抗體后，C、D 組 CTGF 蛋白相對表達(dá)量顯著降低，但仍高于 E 組（P<0.05）；A、C 組間及 B、D 組間比較差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。qRT-PCR 檢測示，與 E 組比較，A 組 CTGF、Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原 mRNA 相對表達(dá)量均顯著增高（P<0.05）；加入 CTGF 中和抗體后，C 組各基因表達(dá)受到抑制，mRNA 相對表達(dá)量顯著低于 A 組，但仍顯著高于 E 組（P<0.05）。B 組Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原 mRNA 相對表達(dá)量顯著高于 E 組（P<0.05），但 CTGF mRNA 相對表達(dá)量與 E 組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）；加入 CTGF 中和抗體后，D 組Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原 mRNA 相對表達(dá)量受到抑制，低于 B 組，但仍顯著高于 E 組（P<0.05），CTGF mRNA 相對表達(dá)量與 B、E 組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。結(jié)論TGF-β1 可促進(jìn)黃韌帶細(xì)胞的 CTGF、Ⅰ型膠原和Ⅲ型膠原基因及蛋白表達(dá)水平增加，TGF-β1 通過 CTGF 協(xié)同促進(jìn)黃韌帶細(xì)胞增生。