華西醫(yī)學期刊出版社
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找到 作者 包含"洪光祥" 13條結(jié)果
  • 外源性促紅細胞生成素對失神經(jīng)骨骼肌萎縮的影響

    目的 探討外源性促紅細胞生成素(erythropoietin,EPO)對失神經(jīng)骨骼肌萎縮的影響。 方法 取雄性SD 大鼠24 只,體重200 ~ 220 g,于右側(cè)梨狀肌下緣切斷坐骨神經(jīng),制備小腿三頭肌失神經(jīng)支配模型。模型制備后隨機分為兩組(n=12),EPO 組:術(shù)后每天右小腿腓腸肌注射rhEPO(2 500 U/kg);對照組:注射等體積生理鹽水。術(shù)后觀察動物一般情況,于第2、4 周檢測肌濕重、肌肉蛋白含量,行HE及TUNEL染色,測量肌細胞直徑、橫切面積及細胞凋亡率,并測定肌肉Na+-K+-ATP 酶和Ca2+-ATP 酶活性。 結(jié)果 術(shù)后兩組動物右后肢均拖膝行走,切口無感染,動物均存活至實驗完成,4 周時對照組5 只及EPO組2 只大鼠發(fā)生足跟潰瘍。術(shù)后2、4 周EPO組肌濕重分別為(885.59 ± 112.35)、(697.62 ±94.74) g,均明顯重于對照組(760.63 ± 109.05)、(458.71 ± 58.76) g (P lt; 0.01) ;肌肉蛋白含量分別為(77.37 ± 5.24)、(66.37 ± 4.87)mg/mL,明顯高于對照組(65.39 ± 4.97)、(54.62 ± 6.32)mg/mL(P lt; 0.01)。術(shù)后2、4 周EPO 組肌纖維形態(tài)基本正常;對照組肌纖維萎縮變細,部分斷裂,肌束間結(jié)締組織增生較明顯;EPO 組肌細胞直徑和橫切面積明顯大于對照組(P lt; 0.01)。術(shù)后2、4 周,EPO 組骨骼肌細胞凋亡數(shù)明顯少于對照組,EPO 組腓腸肌細胞凋亡率分別為11.80% ±1.74%、28.47% ± 1.81%,明顯低于對照組21.48% ± 2.21%、55.89% ± 2.88%(P lt; 0.01)。術(shù)后2、4 周EPO 組Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP 酶活性均高于對照組(P lt; 0.01)。 結(jié)論 EPO 具有明顯延緩大鼠失神經(jīng)骨骼肌萎縮的作用。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:05 導出 下載 收藏 掃碼
  • 神經(jīng)營養(yǎng)因子3 基因修飾的SC 促進神經(jīng)再生的研究

    目的 研究神經(jīng)營養(yǎng)因子 3(neurotrophic factor 3,NT-3)基因修飾的SC 對坐骨神經(jīng)缺損后促進神經(jīng)再生的作用。 方法 取3 d 齡Wistar 幼鼠雙側(cè)坐骨神經(jīng),采用雙酶消化法及貼壁法分離、培養(yǎng)及純化SC。取第3 代SC 進行實驗。采用陽離子脂質(zhì)體將NT-3 質(zhì)粒轉(zhuǎn)入SC,于轉(zhuǎn)染后1、2、4、8 周ELISA 雙抗體夾心法測定NT-3 蛋白的表達;采用DNA 酶切鑒定轉(zhuǎn)染后NT-3 的DNA;免疫組織化學S-100 染色檢測轉(zhuǎn)染色前后SC 純度。分別將3 × 107 個/mLSC、3 × 107 個/mL NT-3 基因修飾SC、NT-3 基因與等體積的ECM 凝膠混合,取20 μL 注入長15.0 mm、內(nèi)徑1.5 mm、壁厚0.3 mm 的PLGA 管,制備神經(jīng)移植復合體。取48 只成年SD 大鼠,雌雄不拘,切除右側(cè)坐骨神經(jīng)10 mm 制備神經(jīng)缺損模型。根據(jù)橋接神經(jīng)缺損的不同神經(jīng)復合體隨機分為4 組(n=12)。A 組:PLGA 管含ECM 凝膠;B 組:PLGA 管含SC及ECM凝膠;C 組:PLGA 管含NT-3 基因及ECM凝膠;D 組:PLGA 管含NT-3 基因修飾SC 和ECM凝膠。術(shù)后2、4、6、8、12 周觀察各組大鼠一般情況,術(shù)后12 周大體觀察神經(jīng)再生情況,行神經(jīng)電生理檢測、組織學及透射電鏡觀察。 結(jié)果 轉(zhuǎn)染后1、2、4、8 周NT-3 蛋白表達量分別為0.39 ± 0.25、0.76 ± 0.22、1.06 ± 0.38、1.61 ± 0.35,比較差異有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.05)。轉(zhuǎn)染后NT-3 的DNA酶切鑒定結(jié)果與NT-3 基因片段相符。轉(zhuǎn)染前后SC 純度分別為94.7% ± 2.1%及95.6% ± 2.5%,比較差異有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.05)。動物實驗觀察,術(shù)后2 周各組大鼠足底開始紅腫、潰瘍;A組潰瘍逐漸加重,無愈合;B、C 組足底潰瘍8 周開始愈合,但12 周仍殘留創(chuàng)面;D 組6 周潰瘍開始愈合,12 周已完全愈合。術(shù)后12 周大體觀察A 組再生神經(jīng)蒼白,粗細不均勻,彈性差;B、C 組再生神經(jīng)呈乳白色,質(zhì)韌,彈性可;D 組再生神經(jīng)呈淡紅色,粗細均勻,彈性佳。B、C、D 組肌肉動作電位潛伏期、波幅、運動神經(jīng)傳導速度及再生神經(jīng)軸突數(shù)、髓鞘厚度、神經(jīng)纖維直徑、神經(jīng)組織面積百分比與A 組比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.05);B、C 組各指標與D 組比較,差異有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.05);B、C 組比較, 差異無統(tǒng)計學意義(P gt; 0.05)。術(shù)后12 周透射電鏡觀察示D 組見有髓神經(jīng)髓鞘成熟最好,板層清晰規(guī)則;B、C 組神經(jīng)髓鞘成熟次之;A 組最差。 結(jié)論 NT-3 基因修飾的SC 與PLGA 管構(gòu)建的神經(jīng)移植復合體能促進大鼠坐骨神經(jīng)缺損再生,其再生效果明顯優(yōu)于單純NT-3 基因和SC。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:08 導出 下載 收藏 掃碼
  • 轉(zhuǎn)化生長因子β1不同作用時間對體外培養(yǎng)小鼠失神經(jīng)骨骼肌肌源性干細胞內(nèi)結(jié)締組織生長因子的影響

    目的 觀察轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)對失神經(jīng)骨骼肌肌源性干細胞(muscle derived stem cell, MDSC)內(nèi)結(jié)締組織生長因子(connective tissue growth factor, CTGF)的影響,探討TGF-β1CTGF通路致失神經(jīng)骨骼肌纖維化的作用及機制。方法 采用差速貼壁法分離培養(yǎng)并鑒定小鼠失神經(jīng)骨骼肌MDSC,用濃度為10 ng/ml的TGF-β1培養(yǎng)24 h前、后分別作表型鑒定。體外MDSC分別在TGF-β1濃度為10 ng/ml的培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)0、3、6、12、24和48 h,按時間點分為A~F組,Western blot檢測CTGF蛋白表達,實時熒光定量 RTPCR檢測CTGF mRNA水平。結(jié)果 免疫組織化學觀察示,加入TGF-β1干預前MDSC高度表達Sca-1,陽性率96%;TGF-β1干預后Sca-1表達陽性率明顯降低,陰性率>99%。Western blot檢測A~F組CTGF與β-actin的平均吸光度(A)值比值分別為0.788±0.123、1.063±0.143、2.154±0.153、2.997±0.136、3.796±0.153和3.802±0.175,A~D組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05), D~F組間兩兩比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。A~F組RTPCR 的ΔCt值分別為1.659±0.215、1.897±0.134、2.188±0.259、2.814±0.263、2.903±0.126和3.101±0.186,A~D組組間比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),E組和F組比較差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。結(jié)論 TGF-β1能促進體外培養(yǎng)小鼠MDSC生成CTGF,在3~12 h時間范圍內(nèi)呈時間依賴關(guān)系。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:23 導出 下載 收藏 掃碼
  • 肌腱愈合過程中轉(zhuǎn)化生長因子β1基因表達的變化

    目的 研究兔屈趾肌腱Ⅱ區(qū)傷口愈合過程中轉(zhuǎn)化生長因子β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)基因表達的變化。 方法 取成年新西蘭大白兔60只,體重4.0~4.5 kg,將左前中趾屈趾深肌腱切斷并采用標準Kessler縫合法修復作為實驗組,分別于術(shù)后1、7、14、21、28及56 d獲取肌腱及腱鞘進行觀察,每個時間點取10只;同一動物的右前肢正常肌腱及腱鞘作為對照組。采用原位雜交和免疫組織化學染色分析TGF-β1的表達情況。結(jié)果 原位雜交結(jié)果示:實驗組TGF-β1 mRNA在術(shù)后1 d開始上調(diào),14~21 d達高峰,56 d保持較高水平;對照組存在TGF-β1 mRNA的表達,但表達水平較低;實驗組各時間點TGF-β1 mRNA表達與對照組比較,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。免疫組織化學染色:實驗組術(shù)后1 d,TGF-β1蛋白信號的表達增加,14~21 d達高峰,56 d仍保持一定水平;對照組術(shù)后各時間點存在TGF-β1蛋白信號表達,但表達水平較低。 結(jié)論 正常無損傷的肌腱和腱鞘能產(chǎn)生TGF-β1,當肌腱損傷后,細胞因子被激活,增加的細胞因子主要由肌腱細胞與腱鞘細胞產(chǎn)生,與肌腱的內(nèi)、外源性愈合機制是一致的。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:23 導出 下載 收藏 掃碼
  • 一氧化氮合酶抑制劑對失神經(jīng)肌萎縮的延緩作用

    目的 研究一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)競爭性抑制劑L-硝基精氨酸甲酯(NG-nitro-L-arginine methyl ester, L-NAME)對失神經(jīng)肌萎縮的延緩作用,為失神經(jīng)肌萎縮的預防與治療提供新手段。方法 制備36只成年SD大鼠右下肢腓腸肌失神經(jīng)支配模型,隨機分為L-NAME組(A組)和對照組(B組)。A組:腓腸肌注射L-NAME,于5個不同位點分別注射20 μl,總注射劑量為10 mg/kg;B組:注射同等體積的生理鹽水。于術(shù)后2、4和8 周測定肌濕重維持率、肌細胞橫切面積、肌肉蛋白含量、細胞凋亡數(shù),并觀察超微結(jié)構(gòu)的改變。結(jié)果 術(shù)后2、4周A組的肌濕重維持率、肌細胞橫切面積、肌肉蛋白含量均明顯高于B組,但細胞凋亡數(shù)低于B組,差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。超微結(jié)構(gòu)顯示,術(shù)后2周,肌細胞線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及細胞核改變不明顯,兩組間無顯著性差異;術(shù)后4周,A 組退變的細胞核較B組少,核質(zhì)染色均勻。術(shù)后8周兩組各參數(shù)間差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。結(jié)論 NOS抑制劑L-NAME能在短期內(nèi)延緩失神經(jīng)肌萎縮。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:26 導出 下載 收藏 掃碼
  • 上肢功能評定表

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:33 導出 下載 收藏 掃碼
  • 逆行指動脈島狀皮瓣修復手指皮膚缺損21例

    發(fā)表時間:2016-09-01 11:07 導出 下載 收藏 掃碼
  • 假性動脈瘤的治療

    1965年8月~1992年12月,收治29例假性動脈瘤患者,分別采用四種不同的手術(shù)方法治療:①血管結(jié)扎術(shù)。②動脈修補術(shù)。③瘤體切除,血管直接吻合術(shù)。④瘤體切除或者曠置,血管移植術(shù)。其中,以血管吻合和血管移植修復效果最好。認為:如果病變的局部條件允許時,應(yīng)盡早手術(shù),防止假性動脈瘤逐漸增大,導致手術(shù)更加困難。

    發(fā)表時間:2016-09-01 11:32 導出 下載 收藏 掃碼
  • TGF-β1 中和抗體對TGF-β 誘導的肌腱膠原產(chǎn)生和術(shù)后粘連形成的影響

    觀察TGF-β1 中和抗體對TGF-β 誘導的肌腱細胞膠原產(chǎn)生及術(shù)后粘連形成的影響,探討生物學調(diào)節(jié)在肌腱粘連防治中的作用。 方法 取6 只成年新西蘭大白兔12 條屈趾肌腱分離肌腱成纖維細胞、腱外膜細胞和腱內(nèi)膜細胞,將細胞隨機分成2 組,實驗組加入1 ng/mL TGF-β 后,再加入不同濃度TGF-β1 中和抗體,對照組不添加任何試劑,培養(yǎng)3 d 后ELISA 測定Col Ⅰ的產(chǎn)生。取84 只兔行中趾屈趾肌腱切斷吻合術(shù),隨機分成3 組,腱鞘內(nèi)分別注入生理鹽水(NS 組,n=36)、1.0 μg/mL TGF-β1 中和抗體(1.0 μg/mL TGF-β1 組,n=36)和2.0 μg/mL TGF-β1 中和抗體(2.0 μg/mLTGF-β1 組,n=12)。術(shù)后4、8 周取出肌腱行肌腱粘連檢測、生物力學測定、組織學觀察和掃描電鏡觀察。1、2、4、8 周后取出NS 組及1.0 μg/mL TGF-β1 組肌腱,原位雜交方法測定TGF-β1 和Col Ⅰ mRNA 的表達。 結(jié)果 ELISA 檢測顯示,TGF-β1 能明顯提高肌腱細胞Col Ⅰ的產(chǎn)生;TGF-β1 抗體能降低肌腱成纖維細胞、腱外膜細胞和腱內(nèi)膜細胞Col Ⅰ的產(chǎn)生,且呈劑量依賴關(guān)系。術(shù)后4、8 周,NS 組屈趾肌腱滑動距離較短,模擬主動屈曲度明顯受限,與1.0 μg/mL TGF-β1 組和2.0 μg/ mL TGF-β1 組比較差異均有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.05);最大抗斷裂載荷各組間比較差異無統(tǒng)計學意義(P gt; 0.05)。掃描電鏡和組織學觀察結(jié)果顯示,術(shù)后4、8 周NS 組膠原纖維排列紊亂,1.0 μg/mL TGF-β1 組和2.0 μg/mL TGF-β1 組膠原纖維排列整齊。原位雜交結(jié)果顯示,術(shù)后各時間點1.0 μg/mL TGF-β1 組TGF-β1 mRNA和Col ⅠmRNA表達水平均低于NS組,差異均有統(tǒng)計學意義(P lt; 0.05)。 結(jié)論 TGF-β1 中和抗體能有效抑制TGF-β1 在肌腱損傷修復中的作用,減少粘連形成。

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:07 導出 下載 收藏 掃碼
  • 皮神經(jīng)營養(yǎng)血管蒂復合組織瓣移位術(shù)的應(yīng)用

    發(fā)表時間:2016-09-01 09:28 導出 下載 收藏 掃碼
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