目的 探討外源性促紅細胞生成素（erythropoietin，EPO）對失神經(jīng)骨骼肌萎縮的影響。 方法 取雄性SD 大鼠24 只，體重200 ～ 220 g，于右側(cè)梨狀肌下緣切斷坐骨神經(jīng)，制備小腿三頭肌失神經(jīng)支配模型。模型制備后隨機分為兩組（n=12），EPO 組：術(shù)后每天右小腿腓腸肌注射rhEPO（2 500 U/kg）；對照組：注射等體積生理鹽水。術(shù)后觀察動物一般情況，于第2、4 周檢測肌濕重、肌肉蛋白含量，行HE及TUNEL染色，測量肌細胞直徑、橫切面積及細胞凋亡率，并測定肌肉Na+-K+-ATP 酶和Ca2+-ATP 酶活性。 結(jié)果 術(shù)后兩組動物右后肢均拖膝行走，切口無感染，動物均存活至實驗完成，4 周時對照組5 只及EPO組2 只大鼠發(fā)生足跟潰瘍。術(shù)后2、4 周EPO組肌濕重分別為（885.59 ± 112.35）、（697.62 ±94.74） g，均明顯重于對照組（760.63 ± 109.05）、（458.71 ± 58.76） g （P lt; 0.01） ；肌肉蛋白含量分別為（77.37 ± 5.24）、（66.37 ± 4.87）mg/mL，明顯高于對照組（65.39 ± 4.97）、（54.62 ± 6.32）mg/mL（P lt; 0.01）。術(shù)后2、4 周EPO 組肌纖維形態(tài)基本正常；對照組肌纖維萎縮變細，部分斷裂，肌束間結(jié)締組織增生較明顯；EPO 組肌細胞直徑和橫切面積明顯大于對照組（P lt; 0.01）。術(shù)后2、4 周，EPO 組骨骼肌細胞凋亡數(shù)明顯少于對照組，EPO 組腓腸肌細胞凋亡率分別為11.80% ±1.74%、28.47% ± 1.81%，明顯低于對照組21.48% ± 2.21%、55.89% ± 2.88%（P lt; 0.01）。術(shù)后2、4 周EPO 組Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP 酶活性均高于對照組（P lt; 0.01）。 結(jié)論 EPO 具有明顯延緩大鼠失神經(jīng)骨骼肌萎縮的作用。
目的 研究神經(jīng)營養(yǎng)因子 3（neurotrophic factor 3，NT-3）基因修飾的SC 對坐骨神經(jīng)缺損后促進神經(jīng)再生的作用。 方法 取3 d 齡Wistar 幼鼠雙側(cè)坐骨神經(jīng)，采用雙酶消化法及貼壁法分離、培養(yǎng)及純化SC。取第3 代SC 進行實驗。采用陽離子脂質(zhì)體將NT-3 質(zhì)粒轉(zhuǎn)入SC，于轉(zhuǎn)染后1、2、4、8 周ELISA 雙抗體夾心法測定NT-3 蛋白的表達；采用DNA 酶切鑒定轉(zhuǎn)染后NT-3 的DNA；免疫組織化學S-100 染色檢測轉(zhuǎn)染色前后SC 純度。分別將3 × 107 個/mLSC、3 × 107 個/mL NT-3 基因修飾SC、NT-3 基因與等體積的ECM 凝膠混合，取20 μL 注入長15.0 mm、內(nèi)徑1.5 mm、壁厚0.3 mm 的PLGA 管，制備神經(jīng)移植復合體。取48 只成年SD 大鼠，雌雄不拘，切除右側(cè)坐骨神經(jīng)10 mm 制備神經(jīng)缺損模型。根據(jù)橋接神經(jīng)缺損的不同神經(jīng)復合體隨機分為4 組（n=12）。A 組：PLGA 管含ECM 凝膠；B 組：PLGA 管含SC及ECM凝膠；C 組：PLGA 管含NT-3 基因及ECM凝膠；D 組：PLGA 管含NT-3 基因修飾SC 和ECM凝膠。術(shù)后2、4、6、8、12 周觀察各組大鼠一般情況，術(shù)后12 周大體觀察神經(jīng)再生情況，行神經(jīng)電生理檢測、組織學及透射電鏡觀察。 結(jié)果 轉(zhuǎn)染后1、2、4、8 周NT-3 蛋白表達量分別為0.39 ± 0.25、0.76 ± 0.22、1.06 ± 0.38、1.61 ± 0.35，比較差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。轉(zhuǎn)染后NT-3 的DNA酶切鑒定結(jié)果與NT-3 基因片段相符。轉(zhuǎn)染前后SC 純度分別為94.7% ± 2.1%及95.6% ± 2.5%，比較差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。動物實驗觀察，術(shù)后2 周各組大鼠足底開始紅腫、潰瘍；A組潰瘍逐漸加重，無愈合；B、C 組足底潰瘍8 周開始愈合，但12 周仍殘留創(chuàng)面；D 組6 周潰瘍開始愈合，12 周已完全愈合。術(shù)后12 周大體觀察A 組再生神經(jīng)蒼白，粗細不均勻，彈性差；B、C 組再生神經(jīng)呈乳白色，質(zhì)韌，彈性可；D 組再生神經(jīng)呈淡紅色，粗細均勻，彈性佳。B、C、D 組肌肉動作電位潛伏期、波幅、運動神經(jīng)傳導速度及再生神經(jīng)軸突數(shù)、髓鞘厚度、神經(jīng)纖維直徑、神經(jīng)組織面積百分比與A 組比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）；B、C 組各指標與D 組比較，差異有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）；B、C 組比較， 差異無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05）。術(shù)后12 周透射電鏡觀察示D 組見有髓神經(jīng)髓鞘成熟最好，板層清晰規(guī)則；B、C 組神經(jīng)髓鞘成熟次之；A 組最差。 結(jié)論 NT-3 基因修飾的SC 與PLGA 管構(gòu)建的神經(jīng)移植復合體能促進大鼠坐骨神經(jīng)缺損再生，其再生效果明顯優(yōu)于單純NT-3 基因和SC。
目的 觀察轉(zhuǎn)化生長因子β1（transforming growth factor β1，TGF-β1）對失神經(jīng)骨骼肌肌源性干細胞（muscle derived stem cell, MDSC）內(nèi)結(jié)締組織生長因子（connective tissue growth factor, CTGF）的影響，探討TGF-β1CTGF通路致失神經(jīng)骨骼肌纖維化的作用及機制。方法 采用差速貼壁法分離培養(yǎng)并鑒定小鼠失神經(jīng)骨骼肌MDSC，用濃度為10 ng/ml的TGF-β1培養(yǎng)24 h前、后分別作表型鑒定。體外MDSC分別在TGF-β1濃度為10 ng/ml的培養(yǎng)基內(nèi)培養(yǎng)0、3、6、12、24和48 h，按時間點分為A～F組，Western blot檢測CTGF蛋白表達，實時熒光定量 RTPCR檢測CTGF mRNA水平。結(jié)果 免疫組織化學觀察示，加入TGF-β1干預前MDSC高度表達Sca-1，陽性率96%；TGF-β1干預后Sca-1表達陽性率明顯降低，陰性率＞99%。Western blot檢測A～F組CTGF與β-actin的平均吸光度（A）值比值分別為0.788±0.123、1.063±0.143、2.154±0.153、2.997±0.136、3.796±0.153和3.802±0.175，A～D組間兩兩比較差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)， D～F組間兩兩比較差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。A～F組RTPCR 的ΔCt值分別為1.659±0.215、1.897±0.134、2.188±0.259、2.814±0.263、2.903±0.126和3.101±0.186，A～D組組間比較差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），E組和F組比較差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結(jié)論 TGF-β1能促進體外培養(yǎng)小鼠MDSC生成CTGF，在3～12 h時間范圍內(nèi)呈時間依賴關(guān)系。
目的 研究兔屈趾肌腱Ⅱ區(qū)傷口愈合過程中轉(zhuǎn)化生長因子β1（transforming growth factor β1，TGF-β1）基因表達的變化。 方法 取成年新西蘭大白兔60只，體重4.0～4.5 kg，將左前中趾屈趾深肌腱切斷并采用標準Kessler縫合法修復作為實驗組，分別于術(shù)后1、7、14、21、28及56 d獲取肌腱及腱鞘進行觀察，每個時間點取10只；同一動物的右前肢正常肌腱及腱鞘作為對照組。采用原位雜交和免疫組織化學染色分析TGF-β1的表達情況。結(jié)果 原位雜交結(jié)果示：實驗組TGF-β1 mRNA在術(shù)后1 d開始上調(diào)，14～21 d達高峰，56 d保持較高水平；對照組存在TGF-β1 mRNA的表達，但表達水平較低；實驗組各時間點TGF-β1 mRNA表達與對照組比較，差異均有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。免疫組織化學染色：實驗組術(shù)后1 d，TGF-β1蛋白信號的表達增加，14～21 d達高峰，56 d仍保持一定水平；對照組術(shù)后各時間點存在TGF-β1蛋白信號表達，但表達水平較低。 結(jié)論 正常無損傷的肌腱和腱鞘能產(chǎn)生TGF-β1，當肌腱損傷后，細胞因子被激活，增加的細胞因子主要由肌腱細胞與腱鞘細胞產(chǎn)生，與肌腱的內(nèi)、外源性愈合機制是一致的。
目的 研究一氧化氮合酶(nitric oxide synthase, NOS)競爭性抑制劑L-硝基精氨酸甲酯(NG-nitro-L-arginine methyl ester， L-NAME)對失神經(jīng)肌萎縮的延緩作用，為失神經(jīng)肌萎縮的預防與治療提供新手段。方法 制備36只成年SD大鼠右下肢腓腸肌失神經(jīng)支配模型，隨機分為L-NAME組（A組）和對照組（B組）。A組：腓腸肌注射L-NAME，于5個不同位點分別注射20 μl，總注射劑量為10 mg/kg；B組：注射同等體積的生理鹽水。于術(shù)后2、4和8 周測定肌濕重維持率、肌細胞橫切面積、肌肉蛋白含量、細胞凋亡數(shù)，并觀察超微結(jié)構(gòu)的改變。結(jié)果 術(shù)后2、4周A組的肌濕重維持率、肌細胞橫切面積、肌肉蛋白含量均明顯高于B組，但細胞凋亡數(shù)低于B組，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。超微結(jié)構(gòu)顯示，術(shù)后2周，肌細胞線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)及細胞核改變不明顯，兩組間無顯著性差異；術(shù)后4周，A 組退變的細胞核較B組少，核質(zhì)染色均勻。術(shù)后8周兩組各參數(shù)間差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。結(jié)論 NOS抑制劑L-NAME能在短期內(nèi)延緩失神經(jīng)肌萎縮。
１９６５年８月～１９９２年１２月，收治２９例假性動脈瘤患者，分別采用四種不同的手術(shù)方法治療：①血管結(jié)扎術(shù)。②動脈修補術(shù)。③瘤體切除，血管直接吻合術(shù)。④瘤體切除或者曠置，血管移植術(shù)。其中，以血管吻合和血管移植修復效果最好。認為：如果病變的局部條件允許時，應盡早手術(shù)，防止假性動脈瘤逐漸增大，導致手術(shù)更加困難。
觀察TGF-β1 中和抗體對TGF-β 誘導的肌腱細胞膠原產(chǎn)生及術(shù)后粘連形成的影響，探討生物學調(diào)節(jié)在肌腱粘連防治中的作用。 方法 取6 只成年新西蘭大白兔12 條屈趾肌腱分離肌腱成纖維細胞、腱外膜細胞和腱內(nèi)膜細胞，將細胞隨機分成2 組，實驗組加入1 ng/mL TGF-β 后，再加入不同濃度TGF-β1 中和抗體，對照組不添加任何試劑，培養(yǎng)3 d 后ELISA 測定Col Ⅰ的產(chǎn)生。取84 只兔行中趾屈趾肌腱切斷吻合術(shù)，隨機分成3 組，腱鞘內(nèi)分別注入生理鹽水（NS 組,n=36）、1.0 μg/mL TGF-β1 中和抗體（1.0 μg/mL TGF-β1 組，n=36）和2.0 μg/mL TGF-β1 中和抗體（2.0 μg/mLTGF-β1 組，n=12）。術(shù)后4、8 周取出肌腱行肌腱粘連檢測、生物力學測定、組織學觀察和掃描電鏡觀察。1、2、4、8 周后取出NS 組及1.0 μg/mL TGF-β1 組肌腱，原位雜交方法測定TGF-β1 和Col Ⅰ mRNA 的表達。 結(jié)果 ELISA 檢測顯示，TGF-β1 能明顯提高肌腱細胞Col Ⅰ的產(chǎn)生；TGF-β1 抗體能降低肌腱成纖維細胞、腱外膜細胞和腱內(nèi)膜細胞Col Ⅰ的產(chǎn)生，且呈劑量依賴關(guān)系。術(shù)后4、8 周，NS 組屈趾肌腱滑動距離較短，模擬主動屈曲度明顯受限，與1.0 μg/mL TGF-β1 組和2.0 μg/ mL TGF-β1 組比較差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）；最大抗斷裂載荷各組間比較差異無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05）。掃描電鏡和組織學觀察結(jié)果顯示，術(shù)后4、8 周NS 組膠原纖維排列紊亂，1.0 μg/mL TGF-β1 組和2.0 μg/mL TGF-β1 組膠原纖維排列整齊。原位雜交結(jié)果顯示，術(shù)后各時間點1.0 μg/mL TGF-β1 組TGF-β1 mRNA和Col ⅠmRNA表達水平均低于NS組，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。 結(jié)論 TGF-β1 中和抗體能有效抑制TGF-β1 在肌腱損傷修復中的作用，減少粘連形成。