本研究探討海藻酸鈉-多聚鳥氨酸-海藻酸(A-PLO-A)和海藻酸鋇-多聚鳥氨酸-海藻酸(B-PLO-A)兩種新型微囊作為細(xì)胞移植載體的效果。兩種微囊包裹小鼠肝細(xì)胞后,植入D-氨基半乳糖腹腔注射法制備的急性肝衰竭模型大鼠體內(nèi),觀察大鼠死亡率,檢測(cè)微囊內(nèi)肝細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、代謝的情況,以及能否有效改善肝衰大鼠的肝功能。實(shí)驗(yàn)分為A-PLO-A空微囊、B-PLO-A空微囊、移植游離的肝細(xì)胞、A-PLO-A微囊化肝細(xì)胞、B-PLO-A微囊化肝細(xì)胞五組。研究結(jié)果表明,單純的空微囊對(duì)肝衰大鼠病情無緩解作用,移植后兩個(gè)空囊移植組3 d死亡率均達(dá)到了100%。游離肝細(xì)胞組、A-PLO-A微囊化肝細(xì)胞組和B-PLO-A微囊化肝細(xì)胞組大鼠的ALT、AST、ALB水平均有所恢復(fù),4周時(shí)微囊移植組的上述指標(biāo)均優(yōu)于游離肝細(xì)胞組,說明微囊化肝細(xì)胞移植有效緩解了肝臟損傷的程度,治療效果好于游離肝細(xì)胞組。微囊化肝細(xì)胞組大鼠的存活率明顯高于空囊移植組和游離肝細(xì)胞移植組;4周后回收的微囊表面光滑,無細(xì)胞包裹,無纖維化。研究結(jié)果提示基于多聚鳥氨酸的海藻酸微囊物理穩(wěn)定性和生物相容性良好,適合作為肝細(xì)胞體內(nèi)移植的載體。
目的 探討人表皮細(xì)胞與聚碳酸脂膜構(gòu)建組織工程表皮模型的方法，建立可用于皮膚刺激試驗(yàn)的組織工程表皮模型。 方法 應(yīng)用組織工程方法，以聚碳酸脂膜為支架，以人皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞為細(xì)胞來源，構(gòu)建組織工程表皮模型。氣液面培養(yǎng)13 d，通過HE 染色、角蛋白10（keratin 10，K10）和K13 抗體、K14 抗體、層粘連蛋白抗體、角化細(xì)胞交聯(lián)外膜蛋白抗體、中間絲相關(guān)蛋白抗體免疫熒光染色、透射電鏡觀察組織工程表皮模型組織結(jié)構(gòu)。采用快速滲透試驗(yàn)方法，SDS 分別作用于培養(yǎng)基中添加脂質(zhì)物（實(shí)驗(yàn)組）和未添加脂質(zhì)物（對(duì)照組）的組織工程表皮模型18 h，測(cè)定組織活性減小50% 所需化學(xué)物質(zhì)的濃度（half maximal inhibitory concentration of a substance，IC50）值。 結(jié)果 HE 染色、免疫熒光染色及透射電鏡觀察顯示，構(gòu)建的組織工程表皮模型分化良好，具有與正常表皮相似的結(jié)構(gòu)：基底膜、棘層、顆粒層和角化層。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組組織工程表皮模型的IC50 值分別為0.183%（6.00 mmol/L）和0.072%（2.36 mmol/L）。 結(jié) 論 在聚碳酸酯膜上構(gòu)建的組織工程表皮模型具有與正常表皮相似的組織結(jié)構(gòu)，并且具有一定的屏障功能。