目的 TGF-β1 對骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis，OA）關(guān)節(jié)軟骨起保護作用，探討OA 中基質(zhì)金屬蛋白酶 9（matrix metalloproteinase 9，MMP-9）、TGF-β1 mRNA 和蛋白表達的相關(guān)性，為臨床治療OA 尋找有效的干預(yù)靶點提供理論依據(jù)。 方法 取自愿捐贈的關(guān)節(jié)軟骨及滑膜標本，其中OA 患者60 例（實驗組），外傷截肢、交叉韌帶斷裂、盤狀軟骨損傷與半月板損傷患者20 例（正常對照組）。行HE 染色觀察關(guān)節(jié)軟骨與滑膜的病理組織學(xué)改變，免疫組織化學(xué)染色觀測MMP-9 及TGF-β1 蛋白表達，原位雜交技術(shù)檢測MMP-9 及TGF-β1 mRNA 表達；并進行相關(guān)性分析。 結(jié)果 HE染色顯示實驗組關(guān)節(jié)軟骨細胞固縮、壞死、排列紊亂，細胞外基質(zhì)斷裂，關(guān)節(jié)滑膜細胞肥大增生、淋巴細胞和單核細胞浸潤，多數(shù)小血管增生；正常對照組軟骨細胞排列整齊、基質(zhì)染色均勻，滑膜組織無慢性炎癥表現(xiàn)、無明顯增生。兩組均可見MMP-9、TGF-β1 mRNA 和蛋白陽性表達，陽性細胞包括軟骨細胞、滑膜襯里層細胞及滑膜下層的血管內(nèi)皮細胞、成纖維細胞、炎性浸潤細胞等。實驗組MMP-9 及TGF-β1 mRNA 和蛋白表達均高于正常對照組（P lt; 0.01）。實驗組MMP-9mRNA 與蛋白表達成正相關(guān)（r=0.924，P=0.000），TGF-β1 mRNA 及蛋白表達亦成正相關(guān)（r=0.941，P=0.000）；實驗組MMP-9 及TGF-β1 蛋白表達成負相關(guān)（r= — 0.762，P=0.000），MMP-9 mRNA 及TGF-β1 mRNA 表達成負相關(guān)（r= ?0.681，P=0.000）。 結(jié)論 OA 中TGF-β1 的高表達下調(diào)了關(guān)節(jié)軟骨與滑膜中MMP-9 的表達，對OA 關(guān)節(jié)軟骨起保護作用，從而延緩OA 進展。
目的通過將國產(chǎn)多孔鉭材料植入兔髕腱內(nèi)，觀察其形態(tài)學(xué)變化并評價生物相容性，為其用于肌腱與骨之間界面固定提供實驗依據(jù)。 方法成年新西蘭大白兔48只，雌雄不限，體重2.5～3.0 kg；將大小為5 mm×5 mm×2 mm的多孔鉭材料及多孔鈦材料分別植入左、右側(cè)髕腱，作為實驗組及對照組。術(shù)后觀察動物一般情況，2、4、8、12周取材行大體、組織學(xué)、掃描電鏡及硬組織切片觀察植入材料內(nèi)髕腱組織長入情況。 結(jié)果術(shù)后實驗動物均存活。大體觀察實驗組及對照組材料均與髕腱組織結(jié)合緊密，未見明顯炎性反應(yīng)。組織學(xué)觀察示，兩組植入材料周圍均有包膜形成，且各時間點對照組包膜均較實驗組疏松、厚，但兩組包膜厚度比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）；隨時間延長，兩組包膜均逐漸變薄，組內(nèi)各時間點間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。掃描電鏡觀察示隨時間延長，兩組材料孔隙中長入的肌腱纖維增多，但實驗組多孔鉭材料內(nèi)部肌腱組織量多于對照組。硬組織切片示，實驗組多孔鉭-肌腱界面及鉭孔隙內(nèi)充滿肌腱膠原纖維及小血管并逐漸向內(nèi)部生長，與對照組相比無明顯差異。 結(jié)論國產(chǎn)多孔鉭材料具有良好生物相容性，多孔鉭-肌腱界面之間可產(chǎn)生穩(wěn)定牢固的連接，適用于肌腱-骨連接裝置的重建。
目的觀察MG63細胞與國產(chǎn)多孔鉭材料共培養(yǎng)后成骨相關(guān)因子的表達，探討該材料作為骨組織工程支架的可行性。 方法實驗分為3組，A組為多孔鉭材料與MG63細胞共培養(yǎng)組，B組為多孔鉭浸提液與MG63細胞共培養(yǎng)組，C組為單純MG63細胞培養(yǎng)組。A組于培養(yǎng)后3、5、7 d行掃描電鏡觀察細胞在材料上的黏附情況；培養(yǎng)5 d分別采用免疫組織化學(xué)染色和Western blot檢測各組成骨相關(guān)因子Runt相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子2（Runt-related transcription factor2，Runx-2）、骨鈣素（osteocalcin，OC）和纖維連接蛋白（fibronectin，F(xiàn)N）的表達。 結(jié)果培養(yǎng)3 d，A組細胞在材料表面及孔隙內(nèi)黏附生長，細胞排列較稀疏，突起少；5 d，相鄰細胞互相連接成片狀，覆蓋材料表面及孔隙內(nèi)壁；7 d，細胞分泌大量細胞外基質(zhì)，覆蓋大部分材料表面。各組細胞均有不同程度Runx-2、OC和FN表達，其中A組細胞質(zhì)深染，表達較其余2組明顯。免疫組織化學(xué)染色和Western blot定量分析示，A組Runx-2、OC表達量顯著高于B、C組（P＜0.05）；B、C組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。3組間FN表達量比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。 結(jié)論國產(chǎn)多孔鉭材料有利于MG63細胞的早期黏附、生長，并可能影響Runx-2、OC的表達，可用作骨組織工程支架材料。
目的研究多孔鉭與BMP-7復(fù)合后對兔關(guān)節(jié)軟骨及軟骨下骨缺損修復(fù)的作用，探討其軟骨修復(fù)能力及與宿主組織的生物相容性。 方法取成年新西蘭大耳白兔48只，隨機分為3組（n=16），制備兔股骨內(nèi)髁軟骨缺損模型，分別于右側(cè)股骨內(nèi)髁植入復(fù)合BMP-7多孔鉭材料（A組）、多孔鉭材料（B組）及不植入材料（C組）。術(shù)后觀察動物一般狀況，術(shù)后4、8、16周取材行大體、組織學(xué)、掃描電鏡觀察，術(shù)后16周行Micro-CT觀察A、B組組織空隙內(nèi)軟骨及骨長入情況和多孔鉭周圍成骨情況。 結(jié)果術(shù)后動物存活良好，手術(shù)切口均Ⅰ期愈合。大體觀察示，隨時間延長，A、B組術(shù)后缺損區(qū)材料表面均出現(xiàn)新生軟骨并逐漸覆蓋缺損區(qū)域，A組術(shù)后新生軟骨組織出現(xiàn)更早，表面平整光滑，修復(fù)程度較B組好；C組術(shù)后各時間點缺損區(qū)均未修復(fù)，表面逐漸被纖維組織填充。除術(shù)后4周A、B組軟骨缺損修復(fù)大體觀察評分比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）外，術(shù)后8、16周A組評分均高于B組（P < 0.05）。掃描電鏡觀察示，隨時間延長，A組材料表面新生軟骨及成骨細胞數(shù)量逐漸增多，細胞外基質(zhì)逐漸將材料覆蓋，孔隙內(nèi)長入的新生骨組織逐漸增多，A組新生骨組織及細胞外基質(zhì)分泌明顯多于B組。甲苯胺藍染色組織學(xué)觀察示，術(shù)后4、8、16周兩組多孔鉭界面新生軟骨及骨組織逐漸增加，出現(xiàn)新生骨小梁并向材料孔隙內(nèi)生長，骨組織與多孔鉭接觸趨于緊密，軟骨缺損區(qū)域逐漸被新生軟骨樣組織覆蓋，新生軟骨組織與多孔鉭結(jié)合越發(fā)緊密；A組新生軟骨及骨組織多于B組。Micro-CT觀測示，術(shù)后16周A組組織骨密度、骨小梁厚度、骨小梁數(shù)目、骨體積分數(shù)均高于B組，骨小梁間隙低于B組，比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P < 0.05）。 結(jié)論多孔鉭具有良好的生物相容性，其與BMP-7復(fù)合后可與宿主形成穩(wěn)定的連接與整合，對軟骨及軟骨下骨缺損修復(fù)起良好作用。