摘要： 目的 探討溴代呋喃酮對胸心外科聚氯乙烯(PVC)材料表面表皮葡萄球菌生物膜形成的影響，為生物材料表面改性研究及臨床生物材料植入感染的防治提供新思路。 方法 選用化學(xué)結(jié)構(gòu)具有代表性的三種溴代呋喃酮分為3組，呋喃酮1組：3,4-二溴基-5-羥基呋喃酮；呋喃酮2組：4-溴-5-(4-甲氧基苯基)-3-(甲氨基) 呋喃酮；呋喃酮3組：3,4-二溴基-5,5-二甲苯基2(5H)呋喃酮；對照組：PVC材料用酒精浸泡5 min；分別對4組PVC材料進行表面涂層改性，將改性過的PVC材料與表皮葡萄球菌共同培育；分別于培養(yǎng)6 h、12 h、18 h和24 h時用激光共聚焦顯微鏡動態(tài)觀察PVC材料表面細(xì)菌群落及細(xì)菌生物膜厚度的形成，掃描電子顯微鏡觀察PVC材料表面細(xì)菌生物膜表面結(jié)構(gòu)。 結(jié)果 激光共聚焦顯微鏡觀測結(jié)果顯示：呋喃酮2組各時間點PVC材料表面表皮葡萄球菌群落數(shù)量和細(xì)菌生物膜厚度明顯小于對照組(Plt;0.05)，呋喃酮1組、呋喃酮3組表皮葡萄球菌群落數(shù)量和細(xì)菌生物膜厚度與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(Pgt;0.05)。掃描電子顯微鏡觀察顯示: 與對照組比較，呋喃酮2組6 h時PVC材料表面細(xì)菌群落附著數(shù)量較少；18 h時對照組PVC材料表面細(xì)菌生物膜結(jié)構(gòu)初步形成，而呋喃酮2組無明顯細(xì)菌生物膜結(jié)構(gòu)形成。 結(jié)論 不同溴代呋喃酮對PVC材料表面表皮葡萄球菌生物膜形成的影響不同，呋喃酮2可以抑制PVC材料表面表皮葡萄球菌群落數(shù)量和細(xì)菌生物膜厚度的形成。
目的觀察不同濃度下金屬蛋白酶（Aur）對金黃色葡萄球菌在滌綸材料表面細(xì)菌生物膜形成的影響。方法90片滌綸片按隨機數(shù)字表法分成3組，每組30片。3組均將滌綸片放入有金黃色葡萄球菌液（105 CFU／m1）的無菌瓶中，A組再加入含400ng／ml濃度的Aur，B組再加入含80ng／ml濃度的Aur。3組均置入電熱恒溫水浴箱（98．6°F）中培育，分別于培育后6h、16h、24h、30h和48h用掃描電子顯微鏡（SEM），激光共聚焦掃描顯微鏡（CLSM）觀察細(xì)菌生物膜的厚度和單位面積內(nèi)細(xì)菌生物膜群落數(shù)量。結(jié)果對照組滌綸片細(xì)菌生物膜的厚度和群落數(shù)呈時間依賴性明顯增加，A組滌綸片金黃色葡萄球菌生物膜的厚度和群落數(shù)在各時間點均明顯低于B組和對照組（P〈0．05），B組生物膜的厚度和群落數(shù)在各時間點亦明顯低于對照組（P〈0．05）。結(jié)論Aur對金黃色葡萄球菌在滌綸片上細(xì)菌生物膜的形成有抑制作用，其抑制作用的強度與Aur劑量呈正相關(guān)。
目的 表皮葡萄球菌胞間黏附素基因（intercellar adhesion，ica）是細(xì)菌聚集的關(guān)鍵因子，通過分析醫(yī)源性表皮葡萄球菌生物膜基因型，探討ica 操縱子在聚氯乙烯（polyvinyl chloride，PVC）材料表面細(xì)菌生物膜形成中的作用。 方法 取56 株醫(yī)源性表皮葡萄球菌臨床分離株，應(yīng)用PCR 法、基因測序技術(shù)檢測細(xì)菌生物膜形成相關(guān)基因，包括16S rRNA、自溶素（autolysin，atlE）、纖維蛋白原結(jié)合蛋白（fibrinogen binding protein，fbe）以及ica。取醫(yī)源性表皮葡萄球菌制備濃度為1 × 105 cfu/mL 的細(xì)菌懸液，并根據(jù)目的基因檢測結(jié)果，分別以icaADB、atlE、fbe 陽性基因型（ica 操縱子陽性組）以及icaADB 陰性而atlE、fbe 陽性基因型（ica 操縱子陰性組）與PVC 材料培養(yǎng)。于6、12、18、24、30 h 各取2 個PVC 材料，進行激光共聚焦顯微鏡及掃描電鏡觀察，測量單位視野細(xì)菌群落數(shù)量及形成的細(xì)菌生物膜厚度。 結(jié) 果 目 的 基因檢測示，醫(yī)源性表皮葡萄球菌16S rRNA 陽性率為100%（56/56）；icaADB、atlE、fbe 陽性基因型菌株占57.1%（32/56）；icaADB 陰性而atlE、fbe 陽性基因型菌株占37.5%（21/56）。測序結(jié)果示，目的基因16S rRNA、atlE、fbe、icaADB 擴增產(chǎn)物序列分別與GenBank 中基因序列相符。隨時間延長，ica 操縱子陰性組的PVC 材料表面無明顯細(xì)菌生物膜形成；ica 操縱子陽性組的PVC 材料表面細(xì)菌群落數(shù)量逐漸增多，細(xì)菌生物膜體積逐漸增大，24 h 時可見成熟的細(xì)菌生物膜結(jié)構(gòu)，30 h 時細(xì)菌生物膜體積趨于穩(wěn)定。培養(yǎng)各時間點ica 操縱子陽性組PVC 材料表面單位視野細(xì)菌群落數(shù)量（F=435.987，P=0.000）及細(xì)菌生物膜厚度（F=6 714.395，P=0.000）明顯高于ica 操縱子陰性組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義。 結(jié)論 醫(yī)源性表皮葡萄球菌可以分為ica 操縱子陰性和ica 操縱子陽性兩類細(xì)菌；ica 操縱子可以增加PVC 材料表面細(xì)菌生物膜的形成能力、細(xì)菌群落數(shù)量及細(xì)菌生物膜厚度，在PVC 材料表面細(xì)菌生物膜形成中具有重要作用。
目的 細(xì)菌生物膜常于骨感染灶滋生，導(dǎo)致難以根除的慢性感染；慶大霉素陽離子脂質(zhì)體同種異體骨在體外可有效抑制金黃色葡萄球菌生物膜的生長。探討慶大霉素陽離子脂質(zhì)體同種異體骨對兔慢性骨髓炎的治療作用。 方法 取40 只6 月齡新西蘭大白兔，左下肢構(gòu)建脛骨金黃色葡萄球菌慢性骨髓炎模型，右下肢為陰性對照側(cè)。造模后2 周行大體及X 線片觀察。造模后10 d 內(nèi)死亡4 只動物，余36 只于造模后2 周根據(jù)不同治療方法分為6 組，每組6 只。A 組：無抗生素；B 組：慶大霉素靜脈注射；C 組：慶大霉素陽離子脂質(zhì)體靜脈注射；D 組：植入2 粒慶大霉素同種異體骨（0.5 cm × 0.3 cm）；E 組：植入2 粒慶大霉素陽離子脂質(zhì)體同種異體骨（0.5 cm × 0.3 cm）；F 組：植入2 粒同種異體骨（0.5 cm × 0.3 cm）。治療后2 周行X 線檢查并行Norden 評分，抽取靜脈血行細(xì)菌學(xué)檢查；然后處死動物，取標(biāo)本行HE染色及骨髓細(xì)菌學(xué)檢查。 結(jié)果 造模后2 周大體及X 線片觀察均提示兔脛骨金黃色葡萄球菌慢性骨髓炎模型制備成功。治療后2 周行X 線檢查提示A、B、C、F 組均有不同程度骨質(zhì)破壞以及骨膜反應(yīng)；D、E 組未見明顯骨質(zhì)破壞和骨膜反應(yīng)。A ～ F 組Norden 評分分別為（2.5 ± 0.3）、（2.1 ± 0.2）、（1.5 ± 0.3）、（1.5 ± 0.2）、（0.9 ± 0.3）、（2.7 ± 0.3）分，A 組與B ～ E 組比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05），與F 組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）；B ～ F 組中除C、D 組間比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）外，其余各組間比較差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）。A、F 組血液及骨髓培養(yǎng)均呈金黃色葡萄球菌陽性；其余4 組血液培養(yǎng)均為陰性；骨髓培養(yǎng)B、C、D 組各有6、4、3 只兔為金黃色葡萄球菌陽性，E 組為陰性。HE 染色示A、F 組均有膿腫、死骨形成，未見新骨形成；B、C 組均有不同程度中性粒細(xì)胞聚集；D 組部分出現(xiàn)中性粒細(xì)胞聚集，并見植入骨周圍骨母細(xì)胞及破骨細(xì)胞；E 組無中性粒細(xì)胞聚集，大量肉芽組織長入，植入骨周圍有骨母細(xì)胞及破骨細(xì)胞。 結(jié)論 慶大霉素陽離子脂質(zhì)體同種異體骨對兔脛骨金黃色葡萄球菌慢性骨髓炎的治療效果顯著優(yōu)于慶大霉素同種異體骨或慶大霉素脂質(zhì)體。
目的 綜述細(xì)菌生物膜（bacterial biofilm，BBF）在慢性骨髓炎形成中的作用及其防治。 方法 查閱近年國內(nèi)外有關(guān)慢性骨髓炎和BBF 的相關(guān)文獻，對BBF 在慢性骨髓炎形成中的作用以及防治進行回顧及綜合分析。 結(jié) 果 慢性骨髓炎的診治至今仍很棘手，除局部瘢痕增生、血供差、耐藥菌等原因外，BBF 的形成也是重要原因之一。BBF 在壞死軟組織、骨組織表面形成，對細(xì)菌具有保護作用，大大增強了細(xì)菌對抗生素的抵抗力，導(dǎo)致細(xì)菌難以徹底清除，骨髓炎反復(fù)發(fā)作感染。BBF 的生長包括黏附、發(fā)展和成熟3 個階段。作為慢性骨髓炎的主要致病菌之一的葡萄球菌，在形成BBF 的過程中有其獨自特點，根據(jù)這些特點設(shè)計治療方案已成為抗BBF 感染治療的一個趨勢。 結(jié)論 目前有大量以BBF 形成過程中的關(guān)鍵因子為靶點的治療研究，但迄今為止手術(shù)徹底清除壞死骨組織仍是最有效的方法。
目的 探討不同溴代呋喃酮對聚氯乙烯（polyvinyl chloride，PVC）材料表面大腸桿菌生物膜形成的影響，為生物材料表面改性研究及臨床生物材料植入感染的防治提供新思路。 方法 選用具有化學(xué)結(jié)構(gòu)代表性的3 種溴代呋喃酮，溴代呋喃酮1：3，4- 二溴基-5- 羥基- 呋喃酮，溴代呋喃酮2：4- 溴-5-（4- 甲氧基苯基）-3-（甲氨基）- 呋喃酮，溴代呋喃酮3：3，4- 二溴基-5，5- 二甲苯基-2（5H）- 呋喃酮，分別對PVC 材料片（1 cm × 1 cm）進行表面涂層改性，將改性后的PVC 材料片與大腸桿菌共同培養(yǎng)；將PVC 材料片用75% 乙醇浸泡5 min 后與大腸桿菌共同培養(yǎng)作為對照組。分別于培養(yǎng)6、12、18、24 h，采用激光共聚焦顯微鏡動態(tài)觀測PVC 材料表面單位面積細(xì)菌群落數(shù)及細(xì)菌群落厚度，掃描電鏡觀察PVC 材料表面細(xì)菌生物膜表面結(jié)構(gòu)。 結(jié)果 激光共聚焦顯微鏡觀測顯示，各時間點溴代呋喃酮3 組PVC 材料表面單位面積細(xì)菌群落數(shù)以及細(xì)菌群落厚度均小于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P lt; 0.05）；而溴代呋喃酮1 組和溴代呋喃酮2 組與對照組比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P gt; 0.05）。掃描電鏡觀察示，與對照組比較，溴代呋喃酮3 組培養(yǎng)后6 h PVC 材料表面細(xì)菌群落附著數(shù)量較少；18 h 時對照組及溴代呋喃酮1 組和溴代呋喃酮2 組PVC 材料表面細(xì)菌生物膜結(jié)構(gòu)已初步形成，而溴代呋喃酮3 組PVC 材料表面無明顯細(xì)菌生物膜結(jié)構(gòu)形成。 結(jié)論 不同溴代呋喃酮對PVC 材料表面大腸桿菌生物膜形成的影響不同，3，4- 二溴基-5，5- 二甲苯基-2（5H）- 呋喃酮可抑制PVC 材料表面單位面積大腸桿菌群落數(shù)和細(xì)菌群落厚度形成。
目的 綜述生物膜（biofilm，BF）在關(guān)節(jié)假體感染（prosthetic joint infection，PJI）中的特點、診斷、預(yù)防以及治療。 方法 查閱近年BF 與PJI 的相關(guān)文獻，對BF 在PJI 中的作用以及診斷和防治進行回顧及綜合分析。 結(jié)果 PJI 是人工關(guān)節(jié)置換的嚴(yán)重并發(fā)癥?；A(chǔ)研究表明其發(fā)生的重要原因之一是細(xì)菌與關(guān)節(jié)假體等界面黏附后，通過一系列調(diào)控機制，形成BF，從而導(dǎo)致PJI 的發(fā)生。近年來針對BF 相關(guān)PJI 的病原學(xué)、診斷、治療和預(yù)防等方面均有了新的研究進展，研究表明BF 與PJI 關(guān)系密切。 結(jié)論 BF 與PJI 的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)，研究BF 對PJI 的診斷、治療和預(yù)防有指導(dǎo)意義。
目的 將人表皮細(xì)胞接種到生物膜上構(gòu)建一種新的表皮替代物———表皮細(xì)胞生物膜移植物（ＭＣＧ）。方法 新鮮和冷凍保存的ＭＣＧ移植到裸鼠全厚皮膚缺損創(chuàng)面，以單純無接種細(xì)胞的生物膜作為對照。并行組織學(xué)、免疫組織化學(xué)及電鏡觀察。結(jié)果 表皮細(xì)胞可以生物膜為載體在體外進行培養(yǎng)，達(dá)６０％～７０％亞飽和狀態(tài)時，表皮細(xì)胞生物膜可一起移植到創(chuàng)面，在創(chuàng)面上表皮細(xì)胞繼續(xù)增殖分化，形成一層新生表皮。結(jié)論 表皮細(xì)胞生物膜移植物可作為一種新型表皮替代物修復(fù)皮膚缺損.
目的 研究幾丁糖薄膜對肌腱粘連和愈合的影響，為臨床應(yīng)用幾丁糖薄膜預(yù)防肌腱術(shù)后粘連提供實驗依據(jù)。方法 以55 只6～8 個月來亨雞的趾深屈肌腱為實驗?zāi)Ｐ?，將切斷的趾深屈肌腱周圍包裹幾丁糖薄膜，術(shù)后2、4、6、8和10 周分別測量肌腱的活動或抗張強度，肉眼及病理切片觀察肌腱的粘連、愈合情況。結(jié)果 幾丁糖薄膜能有效預(yù)防肌腱粘連，早期(即4 周內(nèi))可以影響肌腱愈合，4 周后可加快肌腱愈合和增加肌腱抗張強度。結(jié)論 幾丁糖薄膜具有無毒副作用、生物通透性好及生物降解、吸收好，并可以選擇性抑制成纖維細(xì)胞生長等優(yōu)點，能有效預(yù)防肌腱粘連，晚期(4 周后)可加快肌腱愈合，是一種較為理想的預(yù)防肌腱粘連的生物材料。
1988年1月～1994年5月，應(yīng)用顯微外科技術(shù)修復(fù)手指屈肌腱損傷共78例183條肌腱，早期進行功能鍛煉，并經(jīng)4～6個月的隨訪，用TAM法評定療效；單純顯微縫合組36例78條肌腱修復(fù)后得到隨訪的26例63條肌腱，優(yōu)良率為76.2%；顯微縫合加生物膜包裹吻合口組42例105條肌腱，得到隨訪的有32例77條肌腱，優(yōu)良率達(dá)89.5%。兩組病例療效經(jīng)統(tǒng)計學(xué)處理有顯著差異。療效欠佳的病例，肌腱損傷主要在手指Ⅱ區(qū)，該區(qū)皮下組織少，陳舊性損傷者腱床周圍瘢痕較多，修復(fù)術(shù)后容易引起粘連所致。