目的觀察補體受體1(CR1)對補體激活的氧化應(yīng)激狀態(tài)下人視網(wǎng)膜色素上皮(hRPE)單層細胞屏障的保護作用。 方法原代培養(yǎng)3~5代hRPE細胞, 建立穩(wěn)定的hRPE單層細胞屏障模型。500 μmol/L叔丁基過氧化氫和10%正常人血清處理hRPE細胞, 建立hRPE單層細胞屏障補體激活的氧化損傷模型。將補體激活的氧化應(yīng)激狀態(tài)下hRPE單層細胞屏障分為模型組和CR1治療組。模型組加入1 μl的磷酸鹽緩沖液, CR1治療組加入1 μl的CR1溶液使其終濃度為1 μg/ml, 繼續(xù)培養(yǎng)4 h。以正常hRPE單層細胞屏障作為正常對照組, 檢測模型組和CR1治療組細胞的跨表皮細胞膜電阻(TER)值。酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測模型組和CR1治療組血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)、趨化因子配體2(CCL2)、C3a、C5a、膜攻擊復(fù)合物(MAC)的蛋白量。 結(jié)果hRPE單層細胞屏障于接種后3周穩(wěn)定形成。模型組、CR1治療組補體激活的氧化損傷hRPE細胞TER值分別為正常hRPE細胞的54.01%、63.48%。模型組與CR1治療組補體激活的氧化損傷hRPE細胞TER值比較, 差異有統(tǒng)計學(xué)意義(t=21.60, P<0.05)。CR1治療組VEGF、CCL2蛋白量分別較模型組下降了11.48%、23.47%;兩組VEGF、CCL2蛋白量比較, 差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(t=3.26、2.43, P<0.05)。CR1治療組C3a、C5a、MAC蛋白量較模型組分別下降了24.00%、27.87%、22.44%;兩組C3a、C5a、MAC蛋白量比較, 差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(t=9.86、2.63、6.94, P<0.05)。 結(jié)論CR1對補體激活的氧化應(yīng)激狀態(tài)下hRPE單層細胞屏障具有保護作用, 抑制補體激活、下調(diào)CCL2和VEGF表達可能是其機制。