目的 總結(jié)交鎖髓內(nèi)釘動(dòng)力化固定對骨折愈合的影響，分析動(dòng)力化固定后可達(dá)到正常愈合的類型。 方法回顧性分析2005年6月－2010年8月30例初始行靜力鎖定后再行動(dòng)力化固定患者臨床資料。男25例，女5例；年齡18～60歲，平均34歲。股骨干骨折26例，轉(zhuǎn)子下骨折4例。均為閉合損傷。根據(jù)AO分型：A1型2例，A2型2例，A3型1例，B1型5例，B2型6例，B3型2例，C1型8例，C2型4例。根據(jù)骨折或不愈合端的力學(xué)穩(wěn)定性和生物活性分型：穩(wěn)定/增生型8例、穩(wěn)定/萎縮型5例、不穩(wěn)定/增生型9例、不穩(wěn)定/萎縮型8例。于初次靜力釘術(shù)后6～18周，平均14周后行髓內(nèi)釘動(dòng)力化固定。 結(jié)果術(shù)后患者切口均Ⅰ期愈合。30例均獲隨訪，隨訪時(shí)間6～18個(gè)月，平均12個(gè)月。24例骨折于動(dòng)力化固定后3～6個(gè)月完全愈合，4例于7～11個(gè)月延遲愈合，2例不愈合。3例不穩(wěn)定/萎縮型患者出現(xiàn)明顯股骨短縮，1例不穩(wěn)定/萎縮型患者出現(xiàn)旋轉(zhuǎn)移位。 結(jié)論髓內(nèi)釘動(dòng)力化治療股骨干骨折不愈合療效確切，但不穩(wěn)定/萎縮型患者行動(dòng)力化固定術(shù)后并發(fā)癥較多。
目的對近年半月板組織工程研究進(jìn)展進(jìn)行綜述。 方法廣泛查閱近年國內(nèi)外半月板組織工程的相關(guān)文獻(xiàn)，總結(jié)現(xiàn)狀及進(jìn)展。 結(jié)果半月板組織工程研究主要集中在種子細(xì)胞選擇及其軟骨分化潛能研究，支架材料選擇及其機(jī)械力學(xué)性能研究，細(xì)胞培養(yǎng)過程中細(xì)胞因子作用機(jī)制研究等。 結(jié)論半月板組織工程研究已取得許多成果，尋找更符合生理過程、易于培養(yǎng)和定向軟骨分化能力強(qiáng)的種子細(xì)胞；探索促進(jìn)種子細(xì)胞向軟骨，尤其是向纖維軟骨分化的細(xì)胞因子，并揭示分化過程中的作用機(jī)制；尋找可塑性強(qiáng)、無抗原性、可降解、力學(xué)性能接近正常半月板的支架材料是下一步研究重點(diǎn)。
目的 比較關(guān)節(jié)鏡下空心螺釘和不可吸收縫線固定前交叉韌帶止點(diǎn)撕脫骨折的臨床療效。 方 法 回顧分析2002 年1 月－ 2009 年1 月關(guān)節(jié)鏡下治療并獲2 年以上隨訪的43 例前交叉韌帶止點(diǎn)撕脫骨折患者臨床資料，骨折Meyers-McKeever-Zaricznyj 分型均為Ⅱ型或Ⅲ型。其中21 例采用空心螺釘固定（空心螺釘組），22 例采用不可吸收縫線固定（縫線組）。兩組患者性別、年齡、病程、骨折分型等一般資料比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05），具有可比性。比較術(shù)后兩組患者膝關(guān)節(jié)活動(dòng)度和Lysholm 評(píng)分，采用Lachman 試驗(yàn)和 KT-2000 檢測評(píng)估關(guān)節(jié)穩(wěn)定性。 結(jié)果 空心螺釘組手術(shù)時(shí)間為48 ～ 60 min，平均51.6 min，縫線組為55 ～ 68 min，平均63.2 min，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=4.645，P=0.032）。兩組患者術(shù)后切口均Ⅰ期愈合，無感染等早期并發(fā)癥發(fā)生?；颊呔@隨訪，隨訪時(shí)間空心螺釘組為（5.7 ± 0.6）年，縫線組為（5.3 ± 0.5） 年。術(shù)后兩組骨折均臨床愈合，空心螺釘組骨折愈合時(shí)間為（3.3 ± 0.6）個(gè)月，縫線組為（3.2 ± 0.4）個(gè)月，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（t=3.723，P=0.019）。末次隨訪時(shí)，空心螺釘組患者關(guān)節(jié)活動(dòng)度為（128.6 ± 10.1）°，縫線組為（130.2 ± 14.1）°；屈膝30° KT-2000 檢測健、患側(cè)脛骨前移差值分別為（0.9 ± 0.3）mm 和（1.0 ± 0.4）mm；Lysholm 評(píng)分分別為（94.6 ± 14.5）分和（95.1 ± 17.2）分；以上指標(biāo)兩組間比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。 結(jié)論 關(guān)節(jié)鏡下采用空心螺釘和不可吸收縫線固定Meyers-McKeever-Zaricznyj Ⅱ、Ⅲ型前交叉韌帶止點(diǎn)撕脫骨折，均能獲得較好療效，但均有部分患者術(shù)后存在5° 或10° 的膝關(guān)節(jié)伸直滯缺。
目的探討TGF-β3、BMP-2及地塞米松（dexamethasone，DEX）誘導(dǎo)兔滑膜MSCs（synovialMSCs，SMSCs）成軟骨分化的作用。 方法取5只10～16月齡新西蘭大白兔（體重1.8～2.5kg）膝關(guān)節(jié)滑膜分離培養(yǎng)SMSCs，并行形態(tài)學(xué)觀察、流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞表面抗原及成脂、成骨誘導(dǎo)分化鑒定。采用PELLET培養(yǎng)系統(tǒng)，將聚丙烯管中的SMSCs團(tuán)塊分成8組，分別加入不同組合的細(xì)胞因子進(jìn)行成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)。A組TGF-β3，B組BMP-2，C組DEX，D組TGF-β3+BMP-2，E組TGF-β3+DEX，F(xiàn)組BMP-2+DEX，G組TGF-β3+BMP-2+DEX，H組為對照組。通過比較各組軟骨微球的直徑、重量，蛋白聚糖（甲苯胺藍(lán)染色）、Ⅱ型膠原（免疫組織化學(xué)染色）表達(dá)，以及軟骨標(biāo)志基因表達(dá)水平[實(shí)時(shí)定量RT-PCR（realtimequantitativePCR，RT-qPCR）]來評(píng)價(jià)各組細(xì)胞因子誘導(dǎo)SMSCs成軟骨能力大小，確定最佳成軟骨誘導(dǎo)細(xì)胞因子組合；并通過檢測各組軟骨微球DNA含量來評(píng)價(jià)軟骨微球重量增加與細(xì)胞增殖的關(guān)系。 結(jié)果經(jīng)鑒定，成功從新西蘭大白兔膝關(guān)節(jié)處滑膜分離獲得SMSCs。A～F組誘導(dǎo)產(chǎn)生的軟骨微球直徑較小、重量較輕，Ⅱ型膠原及蛋白聚糖合成量亦較低；而G組誘導(dǎo)產(chǎn)生的軟骨微球直徑最大，重量最重，蛋白聚糖及Ⅱ型膠原合成量亦最多，均顯著高于A～F組（P＜0.05）；RT-qPCR結(jié)果顯示，G組軟骨相關(guān)基因（SOX-9、聚集蛋白聚糖、Ⅱ型膠原、Ⅹ型膠原、BMP受體Ⅱ）的相對表達(dá)量顯著高于其余各組（P＜0.01）。各組軟骨微球DNA含量隨時(shí)間延長不斷降低（7d降低約70%，14d降低約80%，21d降低約88%）。 結(jié)論SMSCs在TGF-β3、BMP-2及DEX三者聯(lián)合誘導(dǎo)條件下成軟骨分化能力最強(qiáng)；軟骨微球重量的增加由細(xì)胞外基質(zhì)合成增多導(dǎo)致，而不是由細(xì)胞增殖引起。
目的綜述人工關(guān)節(jié)置換術(shù)圍手術(shù)期血液管理策略。 方法查閱近年國內(nèi)外相關(guān)文獻(xiàn)，對人工關(guān)節(jié)置換術(shù)前、術(shù)中及術(shù)后血液管理相關(guān)研究進(jìn)行總結(jié)分析。 結(jié)果目前人工關(guān)節(jié)置換圍手術(shù)期血液管理方式較多，其中術(shù)前包括補(bǔ)充鐵劑、使用促紅細(xì)胞生成素和自體血儲(chǔ)備，術(shù)中包括急性等容血液稀釋技術(shù)、抗纖溶治療、使用止血帶等，術(shù)后包括使用自體血回輸系統(tǒng)以及嚴(yán)格的輸血指征。對貧血患者，術(shù)前單獨(dú)使用促紅細(xì)胞生成素或者聯(lián)合自體血儲(chǔ)備可以降低術(shù)后輸血率，術(shù)中使用止血帶及靜脈輸注氨甲環(huán)酸也能有效控制術(shù)中出血，術(shù)后采取嚴(yán)格的輸血指征可有效減少不必要的輸血。 結(jié)論人工關(guān)節(jié)置換術(shù)圍手術(shù)期血液管理應(yīng)針對患者個(gè)體情況綜合使用多種方式，減少圍手術(shù)期失血及輸血，促進(jìn)患者康復(fù)。
目的通過使用腺病毒介導(dǎo)BMP-2/7共表達(dá)載體轉(zhuǎn)染兔滑膜MSCs（synovial-derived MSCs，SMSCs），觀察其在體外向纖維軟骨樣細(xì)胞分化的可行性。 方法取3月齡新西蘭大白兔6只，雌雄不限，體重（2.1 ± 0.3） kg；取滑膜組織分離純化SMSCs后，進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察及免疫細(xì)胞熒光染色、流式細(xì)胞儀、細(xì)胞周期鑒定，并檢測其成脂、成骨、成軟骨多向分化潛能。同時(shí)包裝pAdTrack-BMP-2-內(nèi)部核糖體進(jìn)入位點(diǎn)（internal ribosome entry site，IRES）-BMP-7腺病毒載體，轉(zhuǎn)染SMSCs后進(jìn)行增殖動(dòng)力學(xué)、核型分析、流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞DNA含量、致瘤性分析等安全性鑒定。體外在不完全成軟骨培養(yǎng)基中培養(yǎng)，觀察其分化狀態(tài)，并行RT-PCR檢測、免疫熒光染色及甲苯胺藍(lán)染色檢測。 結(jié)果從兔滑膜組織中分離出的SMSCs，其細(xì)胞形態(tài)、表面標(biāo)記、多向分化潛能等均符合MSCs的特點(diǎn)。pAdTrack-BMP-2-IRES-BMP-7轉(zhuǎn)染SMSCs的轉(zhuǎn)染率約為70%。安全性鑒定結(jié)果顯示轉(zhuǎn)染后的SMSCs倍增時(shí)間、染色體數(shù)目及DNA含量均正常，且無致瘤性。體外不完全成軟骨培養(yǎng)基誘導(dǎo)培養(yǎng)21 d后，RT-PCR檢測示SMSCs 的Ⅰ、Ⅱ型膠原表達(dá)明顯增加，以Ⅱ型膠原為主；軟骨分化信號(hào)分子RhoA與Sox-9的表達(dá)經(jīng)誘導(dǎo)后也明顯增加。免疫熒光染色及甲苯胺藍(lán)染色結(jié)果亦顯示轉(zhuǎn)染后的SMSCs向纖維軟骨樣細(xì)胞分化。 結(jié)論使用腺病毒載體安全有效，可在體外定向誘導(dǎo)兔SMSCs向纖維軟骨樣細(xì)胞分化。
目的采用正交實(shí)驗(yàn)研究滑膜間充質(zhì)干細(xì)胞（synovial derived MSCs,SMSCs）成纖維軟骨分化的條件。 方法5只成年新西蘭白兔，活檢取滑膜組織。貼壁法獲取SMSCs后采用流式細(xì)胞儀及成脂、成骨、成軟骨誘導(dǎo)分化鑒定。根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)與文獻(xiàn)綜述尋找與SMSCs成纖維軟骨分化可能相關(guān)的條件，采用缺失實(shí)驗(yàn)初篩必要條件后，TGF-β1、BMP-2、地塞米松、脯氨酸、檸檬酸（ascorbic acid,ASA）、丙酮酸、胰島素+轉(zhuǎn)鐵蛋白+亞硒酸預(yù)混液、牛血清白蛋白、bFGF、間斷靜水壓、BMP-7、IGF納入正交實(shí)驗(yàn)，采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件設(shè)計(jì)L60（212）正交實(shí)驗(yàn)及表頭，定義2水平條件，在SMSCs-三維小腸黏膜下層（small intestinal submucosa,SIS）支架上誘導(dǎo)成纖維軟骨分化。使用流式細(xì)胞儀計(jì)數(shù)，檢測CD151+/CD44+細(xì)胞并記錄SMSCs向纖維軟骨分化的轉(zhuǎn)換率，采用免疫組織化學(xué)染色，結(jié)合細(xì)胞形態(tài)、甲苯胺藍(lán)染色、半定量RT-PCR檢測SOX9、聚集蛋白聚糖、Ⅰ型膠原（collagen typeⅠ,Col Ⅰ）、ColⅡ、Col Ⅸ基因表達(dá)，進(jìn)一步驗(yàn)證結(jié)果。檢驗(yàn)指標(biāo)rate是CD151+/CD44+細(xì)胞與高表達(dá)ColⅠ細(xì)胞的比例乘積。同時(shí)采用PicoGreen Assay測量細(xì)胞總DNA量，以反映細(xì)胞擴(kuò)增情況。正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果采用直觀觀察和主體間方差分析方法，考慮部分因子間的1階交互作用，組間差異采用LSD和q檢驗(yàn)驗(yàn)證，使用Ⅲ型平方和校正模型，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。 結(jié)果實(shí)驗(yàn)獲取的細(xì)胞為SMSCs，細(xì)胞倍增時(shí)間為28 h。成纖維軟骨分化過程中SMSCs-三維SIS支架體積5 d倍增，14 d后得到甲苯胺藍(lán)染色陽性的細(xì)胞-支架復(fù)合物。正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果直觀分析示，TGF-β1對成纖維軟骨分化轉(zhuǎn)化率的作用最明顯，BMP-7采用水平2有利于得到更高的轉(zhuǎn)化率，但與BMP-2存在交互作用；其余第1區(qū)組水平值加和高于22.5的因子有DEX、ASA、ITS、轉(zhuǎn)鐵蛋白、bFGF，模型的相關(guān)性好。方差分析校正模型P=0.000，能夠滿足實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)；截距P=0.000，說明各因子對因變量影響差異不完全相同。TGF-β1、ASA、bFGF、IGF對因變量調(diào)控作用較其他因子顯著，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，與直觀觀察結(jié)果相似。 結(jié)論TGF-β1、ASA、bFGF、IGF顯著影響SMSCs成纖維軟骨分化，通過合理調(diào)整上述因子濃度，可顯著提高SMSCs成纖維軟骨分化轉(zhuǎn)化率；精確的調(diào)控條件和調(diào)控機(jī)制有待進(jìn)一步探索。