目的 評價新型復合材料納米TCP/ 明膠/ 鹿茸多肽的生物相容性，為其在骨缺損修復領域中的臨床應用提供實驗依據。 方法 制備納米TCP/ 明膠/ 鹿茸多肽復合材料，掃描電鏡觀察其形態(tài)。常規(guī)培養(yǎng)L929 和NIH/3T3 細胞，取對數生長期的細胞用于實驗。通過急性毒性實驗、溶血實驗、細胞增殖實驗和細胞毒性實驗等研究該復合材料的生物相容性。 結果 掃描電鏡觀察示復合材料微球直徑約10 μm，單個分散存在，微球表面存在納米級孔洞。急性毒性實驗結果顯示，實驗動物在觀察期內一般狀態(tài)良好，無驚厥、癱瘓和死亡等毒性反應，給藥前、后體重無明顯變化，該復合材料無急性毒性。溶血實驗結果顯示溶血率均lt; 5%，符合醫(yī)用生物材料的溶血實驗要求。細胞增殖實驗結果顯示，不同濃度材料浸提液作用于NIH/3T3 細胞均不同程度地促進細胞增殖，具有較好的生物學活性。細胞毒性實驗結果顯示，該材料細胞毒性為0 級。 結論 納米TCP/ 明膠/ 鹿茸多肽復合材料具有良好的生物相容性。
目的 探討鹿茸多肽局部給藥和鹿茸多肽-PLGA 復合膜對大鼠坐骨神經損傷后神經再生的影響。 方法 制備厚度為50 μm、濃度分別為3 mg/g 及15 mg/g 的鹿茸多肽-PLGA復合膜。取3 ～ 6 月齡Wistar 大鼠72 只，雌雄不限，體重（250 ± 50） g，制備坐骨神經切斷模型。模型制備后隨機分成4 組，每組18 只。A 組：吻合后不作任何處理；B組：術后每隔1 d 術側腓腸肌內注射10 mg/L鹿茸多肽1 mL；C組：神經吻合口部位包繞3 mg/g 鹿茸多肽-PLGA復合膜；D 組：神經吻合口部位包繞15 mg/g 鹿茸多肽-PLGA 復合膜。術后第2、4 及6 周，大體觀察神經斷端粘連情況，行電生理檢測、免疫組織化學染色及半定量分析、辣根過氧化物酶（horseradish peroxidase，HRP）逆行示蹤。 結果 術后各組大鼠行為無明顯異常，足底、足趾均無潰瘍；神經吻合口處均無神經瘤形成。術后2、4 及6 周，A 組神經吻合處與周圍組織粘連明顯，B 組僅有輕度粘連，C、D 組無明顯粘連。術后各時間點小腿三頭肌誘發(fā)電位恢復率B、C、D 組明顯高于A組（P lt; 0.01），D 組優(yōu)于B 組和C 組（P lt; 0.05）；2、4 周B 組和C 組差異無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05），6 周時C 組優(yōu)于B 組（P lt;0.05）。再生神經纖維軸突及髓鞘TGF-β1、IGF 抗原染色：A 組輕度著色，B、C、D 組隨觀察時間的延長著色逐漸加深。各時間點B、C、D 組TGF-β1、 IGF 抗原表達均較A 組高（P lt; 0.05）；術后6 周，D 組與B、C 組比較差異有統(tǒng)計學意義（P lt;0.05），B、C 組間比較差異無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05）。HRP 逆行示蹤實驗：隨時間延長，被標記的有髓神經纖維逐漸增多，B、C、D 組標記陽性的有髓神經纖維數明顯高于A 組，D 組高于其他組，B 組和C 組差異不明顯。 結論 鹿茸多肽局部應用和鹿茸多肽-PLGA 復合膜包繞神經吻合口周圍對神經再生均有促進作用，此作用與鹿茸多肽有明顯量效關系，鹿茸多肽-PLGA 復合膜有預防神經粘連作用。
目的 通過觀察鹿茸多肽對白細胞介素 1β（interleukin 1β，IL-1β）誘導軟骨表型化骨髓間充質干細胞（marrow mesenchymal stem cells，MSCs）凋亡的影響，以優(yōu)化軟骨組織工程的種子細胞。方法 新西蘭大白兔2只，抽取其骨髓；經密度梯度離心得到單核細胞，經體外分離、培養(yǎng)獲得兔MSCs。用轉化生長因子β1（transforming growth factor β1，TGF-β1）和堿性成纖維細胞生長因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）將其誘導分化軟骨表型。將軟骨表型化MSCs隨機分成A組（空白對照組）：5%胎牛血清的αMEM培養(yǎng)液；B組（IL-1β組）：5%胎牛血清的αMEM培養(yǎng)液加入100 ng IL-1β；C組（鹿茸多肽組）：5%胎牛血清的αMEM培養(yǎng)液加入10 μg/ml鹿茸多肽作用3d后再加入100 ng IL-1β；D組（TGF-β1組）：5%胎牛血清的α-MEM培養(yǎng)液加10 ng/ml TGF-β1作用3 d后再加入100 ng IL-1β。分別于培養(yǎng)24、48和72 h后取樣，采用透射電鏡觀察細胞形態(tài)，Annexin V法檢測細胞凋亡率，RT-PCR技術分析Caspase-3 mRNA表達水平，ELISA法檢測Caspase-3蛋白酶活性。結果 透射電鏡觀察：B組24 h后細胞核內染色質開始呈塊狀凝集，分布于核膜下，核膜不規(guī)則；48 h后細胞核內染色質凝集加劇；72 h后部分細胞內的核碎片凝集成凋亡小體。各時間點C、D組細胞結構改變相對滯后，且數量較少；A組細胞結構幾乎無明顯改變。各時間點B組MSCs凋亡率、Caspase-3 mRNA表達及蛋白酶活性逐漸增高，與A組比較差異有統(tǒng)計學意義（Plt;0.01）；C、D組與B組比較則逐漸下降，且差異有統(tǒng)計學意義（Plt;0.05）。結論 Caspase3參與MSCs凋亡，鹿茸多肽通過減少Caspase-3 mRNA表達，并抑制其蛋白酶活性，阻止或逆轉軟骨表型化MSCs凋亡。