目的檢測人胃癌KATO-Ⅲ、SGC7901、AGS及MKN-45細(xì)胞株中CD133基因及蛋白的表達(dá)，研究CD133陽性(CD133+)細(xì)胞與CD133陰性(CD133-)細(xì)胞的生物學(xué)特性的差異。方法采用半定量聚合酶鏈反應(yīng)及免疫蛋白印跡法分別檢測KATO-Ⅲ、SGC7901、AGS及MKN-45細(xì)胞株中CD133基因和蛋白的表達(dá); 免疫磁珠細(xì)胞技術(shù)將KATO-Ⅲ細(xì)胞株中CD133+和CD133-細(xì)胞分離純化，對比兩者生長形態(tài)特點(diǎn)、體外增殖能力及分化能力的差異; 采用CCK-8法分析CD133+和CD133-細(xì)胞對不同濃度(0.05、0.10、0.20、0.50、1.00 mg/ml)化療藥物5氟尿嘧啶(5-FU)敏感性的差別。結(jié)果KATO-Ⅲ細(xì)胞中CD133基因及蛋白表達(dá)量均明顯高于SGC7901、AGS及MKN-45細(xì)胞(Plt;0.05)。CD133+細(xì)胞在無血清培養(yǎng)基中呈球形克隆懸浮生長，相比CD133-細(xì)胞具有更強(qiáng)的體外增殖能力及潛在分化能力。5-FU耐藥性實(shí)驗(yàn)中，CD133+細(xì)胞在0.50 mg/ml濃度下的抑制率較CD133-細(xì)胞明顯降低(Plt;0.05)，但其他濃度時二者比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt;0.05)。結(jié)論人胃癌細(xì)胞株KATO-Ⅲ中的CD133+細(xì)胞具有一定增殖、分化及耐藥潛能，CD133可作為胃腫瘤起始細(xì)胞亞群的表面標(biāo)志之一。
目的 研究上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）相關(guān)因子Snail、E-cadherin、N-cadherin與胃癌患者臨床病理特征、預(yù)后及胃癌腫瘤起始細(xì)胞表面標(biāo)志物CD133表達(dá)的關(guān)系。方法 利用Western blot方法檢測50例胃癌及癌旁正常胃黏膜組織中EMT相關(guān)因子及CD133蛋白的定位及定量表達(dá)，分析EMT相關(guān)因子及CD133蛋白表達(dá)與胃癌患者的臨床病理學(xué)指標(biāo)的關(guān)系，Spearman等級相關(guān)分析EMT相關(guān)因子和CD133表達(dá)的關(guān)系，Kaplan-Meier方法分析EMT相關(guān)因子及CD133表達(dá)與胃癌患者生存的關(guān)系。結(jié)果?、傥赴┙M織中Snail、N-cadherin及CD133蛋白表達(dá)相對灰度值明顯高于其在癌旁正常胃黏膜組織中的表達(dá)（Snail：0.599±0.114比0.259±0.108，P=0.020；N-cadherin：0.754±0.154比0.329±0.134，P=0.001；CD133：0.635±0.119比0.485±0.116，P=0.029），E-cadherin蛋白表達(dá)相對灰度值明顯低于其在癌旁正常胃黏膜組織中的表達(dá)（0.378±0.123比0.752±0.156，P=0.003）。②Snail蛋白、N-cadherin蛋白表達(dá)平均相對灰度值在有血管浸潤、淋巴管浸潤、N3淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤直徑≥5 cm和Ⅲ＋Ⅳ期胃癌患者中的表達(dá)明顯高于無血管浸潤、淋巴管浸潤、N0～N2淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及腫瘤直徑＜5 cm和Ⅰ＋Ⅱ期的胃癌患者（P＜0.05），而E-cadherin蛋白表達(dá)平均相對灰度值在有血管浸潤、淋巴管浸潤、N3淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及Ⅲ＋Ⅳ期胃癌患者中的表達(dá)顯著低于無血管浸潤、淋巴管浸潤、N0～N2淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及Ⅰ＋Ⅱ期的胃癌患者（P＜0.05），CD133蛋白表達(dá)平均相對灰度值在有淋巴管浸潤、N3淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤直徑≥5 cm和Ⅲ＋Ⅳ期胃癌患者中的表達(dá)顯著高于無淋巴管浸潤、N0～N2淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、腫瘤直徑＜5cm和Ⅰ＋Ⅱ期的胃癌患者（P＜0.05）。③Snail、N-cadherin蛋白表達(dá)與CD133蛋白表達(dá)分別均呈正相關(guān)（rs=0.278，P=0.048；rs=0.406，P=0.003），而E-cadherin蛋白表達(dá)與CD133蛋白表達(dá)呈負(fù)相關(guān)（rs=-0.504，P=0.000）。④Snail、N-cadherin及CD133蛋白低表達(dá)組的生存時間明顯長于其高表達(dá)者 （P＜0.05），聯(lián)合EMT相關(guān)因子和CD133蛋白表達(dá)能夠最有效預(yù)測患者生存。結(jié)論 EMT與胃癌腫瘤起始細(xì)胞特性之間存在明顯相關(guān)，并且兩者與胃癌的高侵襲的臨床病理特征相關(guān)，聯(lián)合EMT相關(guān)因子Snail、E-cadherin、N-cadherin與CD133能夠最有效預(yù)測胃癌患者的預(yù)后。
目的 研究胃癌組織中CD133表達(dá)的相互關(guān)系，重點(diǎn)明確術(shù)前、術(shù)后外周血單核細(xì)胞中CD133 mRNA表達(dá)的臨床意義及其與胃癌原發(fā)灶CD133表達(dá)的關(guān)系。方法 50例胃癌、10例胃潰瘍穿孔及10名健康自愿者入組研究。胃癌患者術(shù)前和術(shù)后1周抽外周靜脈血各4ml，密度梯度離心法分離單核細(xì)胞，半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測CD133mRNA表達(dá)水平。胃潰瘍穿孔患者術(shù)前抽外周靜脈血、健康自愿者抽晨血各4ml。胃癌原發(fā)灶及癌旁正常胃黏膜組織分別行RT-PCR、免疫組織化學(xué)染色檢測CD133mRNA和蛋白的表達(dá)。分析CD133表達(dá)對各臨床病理特征和預(yù)后的影響。結(jié)果 健康自愿者及術(shù)前胃潰瘍患者及胃癌患者外周血中CD133mRNA的半定量值分別為0.029±0.060、0.059±0.099及0.270±0.163 （P=0.000）。胃癌患者術(shù)前外周血CD133mRNA表達(dá)與腫瘤組織分化程度、淋巴管浸潤、腫瘤浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移及TNM分期均有關(guān)（P＜0.05）。相關(guān)分析顯示，胃癌患者術(shù)前外周血中CD133mRNA半定量值與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率（rs=0.422，P=0.002）、癌轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)枚數(shù)（rs=0.398，P=0.004）呈正相關(guān)，并與胃癌原發(fā)灶中CD133mRNA的表達(dá)呈正相關(guān)（rs=0.337，P=0.017）。胃癌原發(fā)灶中CD133蛋白表達(dá)陽性者，術(shù)前外周血中CD133mRNA的半定量值較CD133蛋白表達(dá)陰性者高（Z=-2.539，P=0.011）。50例胃癌患者行胃癌根治術(shù)后1周，其外周血中CD133mRNA半定量值明顯高于術(shù)前CD133mRNA的表達(dá)水平（P=0.021）。胃癌浸潤深度較深者，術(shù)后CD133mRNA表達(dá)升高更明顯（Z=-1.978，P=0.039）。術(shù)后外周血中CD133mRNA高表達(dá)者較低表達(dá)者預(yù)后更差（χ2=6.193，P=0.013）。結(jié)論 胃癌患者術(shù)前外周血高表達(dá)CD133mRNA，其與腫瘤分化程度、淋巴管浸潤、腫瘤浸潤深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期及胃癌原發(fā)病灶CD133蛋白表達(dá)有關(guān)，且與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移率、癌轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)枚數(shù)及胃癌原發(fā)灶中CD133mRNA的表達(dá)呈正相關(guān)。術(shù)后患者外周血中CD133mRNA半定量值較術(shù)前明顯升高，這一升高提示腫瘤浸潤程度較深，患者預(yù)后較差。
目的研究胃腺癌組織中CD133蛋白表達(dá)及其臨床意義。方法應(yīng)用免疫組織化學(xué)染色方法檢測99例胃癌患者手術(shù)切除的原發(fā)灶及正常胃黏膜組織中CD133蛋白的表達(dá)，分析其與臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系。結(jié)果29例(29.29%)患者腫瘤組織中CD133蛋白表達(dá)陽性，正常胃黏膜組織中均為陰性(P=0.000)。 腫瘤直徑gt;5 cm者CD133蛋白表達(dá)陽性率顯著高于≤5 cm者(P=0.041); CD133蛋白表達(dá)與TNM分期有關(guān)(P=0.044); 有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.017)、淋巴管浸潤(P=0.000)和血管浸潤(P=0.000)者，CD133蛋白表達(dá)顯著增高。logistic回歸分析顯示: 腫瘤浸潤深度(P=0.011)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.043)和TNM分期(P＝0.049)分別是CD133蛋白表達(dá)陽性的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。CD133蛋白表達(dá)陽性患者的術(shù)后生存時間短于表達(dá)陰性患者(P＝0.046)。 Cox比例風(fēng)險(xiǎn)回歸模型分析顯示，有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.042)、TNM分期(P=0.046)及CD133蛋白表達(dá)陽性(P=0.046)分別是胃癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。結(jié)論胃癌組織中CD133蛋白的表達(dá)與胃癌的發(fā)展、轉(zhuǎn)移及預(yù)后密切相關(guān)。
目的研究腫瘤干細(xì)胞標(biāo)志物CD44及CD133蛋白的表達(dá)與胃癌臨床病理特征和預(yù)后的關(guān)系。 方法應(yīng)用免疫組化方法檢測100例胃癌組織中CD44和CD133蛋白的表達(dá)情況，并對CD133及CD44表達(dá)與胃癌患者的臨床病理資料和生存率進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)果CD133和CD44蛋白均主要表達(dá)在細(xì)胞膜，少量在細(xì)胞漿中表達(dá)。兩者的表達(dá)均與患者的年齡和性別無關(guān)（P＞0.05），但與腫瘤的大小、組織學(xué)分化程度、血管浸潤、淋巴管浸潤、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移以及pTMN分期有關(guān)，腫瘤直徑越大（CD44 P=0.015；CD133 P=0.002）、組織學(xué)分化程度越差（CD44 P=0.008；CD133 P=0.019）、有血管浸潤（CD44 P=0.043；CD133 P=0.023）、有淋巴管浸潤（CD44 P=0.020；CD133 P=0.044）、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（CD44 P=0.002；CD133 P=0.004）、腫瘤浸潤越深（CD44 P=0.006；CD133 P=0.021）以及pTNM分期越高（CD44 P=0.034；CD133 P=0.001），其CD44和CD133蛋白的表達(dá)陽性率越高。CD44+CD133+雙陽性表達(dá)與患者的年齡、性別、腫瘤的組織學(xué)分化程度以及血管浸潤均無關(guān)（P＞0.05），但與腫瘤大小、淋巴管浸潤、腫瘤T分期、N分期以及pTNM分期有關(guān)，其中，腫瘤直徑越大（P=0.010）、有淋巴管浸潤（P=0.003）、有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P=0.045）、腫瘤浸潤越深（P=0.041）以及pTNM分期越高（P=0.049），其CD44+CD133+雙陽性表達(dá)率越高。單因素生存分析結(jié)果顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P＜0.001）、TNM分期（P=0.013）、CD44蛋白陽性表達(dá)（P=0.005）、CD133蛋白陽性表達(dá)（P=0.002）以及CD44+CD133+雙陽性表達(dá)（P＜0.001）和患者的3年生存率均有關(guān)。Spearman等級相關(guān)分析結(jié)果表明，CD44蛋白的表達(dá)與CD133蛋白的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.207，P=0.039）。logistic回歸分析提示CD44+CD133+蛋白雙陽性表達(dá)是淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P=0.038）的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。Cox風(fēng)險(xiǎn)回歸多因素生存分析顯示，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移（P=0.006）以及CD44和CD133蛋白的共表達(dá)（P=0.003）是影響胃癌患者術(shù)后生存的獨(dú)立預(yù)后因素。 結(jié)論CD44和CD133可作為胃癌干細(xì)胞的腫瘤標(biāo)志物；CD44與CD133蛋白的共表達(dá)是影響胃癌患者預(yù)后的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，與患者預(yù)后密切相關(guān)，其表達(dá)水平越高，預(yù)后越差。
目的研究膽囊癌CD133陽性細(xì)胞侵襲能力的產(chǎn)生機(jī)制。 方法Transwell法檢測CD133陽性細(xì)胞和CD133陰性細(xì)胞的遷移和侵襲能力。半定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（RT-PCR）法、蛋白免疫印跡法、細(xì)胞免疫熒光法分別檢測CD133陽性細(xì)胞和CD133陰性細(xì)胞中CXCR4的表達(dá)。分別用SDF-1α、AMD3100作用GBC-SD細(xì)胞后，Transwell法檢測CD133陽性細(xì)胞和CD133陰性細(xì)胞的遷移和侵襲能力。半定量RT-PCR法檢測GBC-SD細(xì)胞中CD133 mRNA表達(dá)，蛋白免疫印跡法檢測GBC-SD細(xì)胞中CD133蛋白表達(dá)。 結(jié)果①CD133陽性細(xì)胞中穿膜細(xì)胞數(shù)明顯多于CD133陰性細(xì)胞（23.78±8.74比6.56±3.09，P=0.000 7）。②CD133陽性細(xì)胞中CXCR4mRNA相對灰度值明顯高于CD133陰性細(xì)胞（0.642 4±0.020 4比0.335 9±0.043 2，P=0.004）；CD133陽性細(xì)胞中CXCR4蛋白表達(dá)相對灰度值明顯高于CD133陰性細(xì)胞（0.765 0±0.106 6比0.409 4±0.019 5，P=0.013）；CD133陽性細(xì)胞中CXCR4熒光蛋白表達(dá)明顯強(qiáng)于CD133陰性細(xì)胞。③細(xì)胞侵襲能力：穿膜細(xì)胞數(shù)量在CD133陽性細(xì)胞中，與空白對照組（23.78±8.74）相比，SDF-1α組（62.89±15.27）明顯增加（P=0.000 6），AMD3100組（10.33±2.00）明顯減少（P=0.000 2）；在CD133陰性細(xì)胞中，與空白對照組（6.59±3.09）相比，SDF-1α組（6.89±4.23）無明顯變化（P=0.41），AMD3100組（6.11±2.67）亦無明顯變化（P=0.38）。④細(xì)胞遷移能力：遷移細(xì)胞數(shù)量，在CD133陽性細(xì)胞中，與空白對照組（35.56±10.97）相比，SDF-1α組（74.56±15.80）明顯增加（P=0.000 3），AMD3100組（12.67±2.40）明顯減少（P=0.000 2）；在CD133陰性細(xì)胞中，與空白對照組（9.56±1.74）相比，SDF-1α組（9.78±2.04）無明顯變化（P=0.43），AMD3100組（9.54±1.74）亦無明顯變化（P=0.42）。⑤在GBC-SD細(xì)胞中CD133 mRNA表達(dá)：與空白對照組（0.450 0±0.024 3）相比，SDF-1α組明顯增加（0.626 5±0.048 7，P=0.004），AMD3100組（0.359 3±0.047 3）明顯下降（P=0.011）；CD133蛋白表達(dá)：與空白對照組（0.440 9±0.013 0）相比，SDF-1α組（0.508 9±0.020 7）明顯增加（P=0.016），而AMD3100組（0.317 7±0.013 7）明顯下降（P=0.004）。 結(jié)論膽囊癌CD133陽性細(xì)胞高侵襲能力可能由于高表達(dá)CXCR4。
目的研究長鏈非編碼RNA（long non-coding RNA，LncRNA）中的同源基因轉(zhuǎn)錄反義基因間RNA（HOTAIR）在人胃癌KATO-Ⅲ細(xì)胞中的表達(dá)及其作用。 方法采用免疫磁珠分選技術(shù)分選出人胃癌KATO-Ⅲ細(xì)胞中的CD133陽性和CD133陰性細(xì)胞后，再采用逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（reverse transcription polymerase chainreaction，RT-PCR）法檢測其中HOTAIR mRNA和CD133 mRNA的表達(dá)水平；采用小干擾RNA技術(shù)（small inter-fering RNA，siRNA）干擾CD133陽性細(xì)胞中HOTAIR的表達(dá)后，再采用RT-PCR法檢測細(xì)胞中HOTAIR mRNA的表達(dá)水平，以篩選出干擾效果最好的siRNA用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)；以篩選出的siRNA干擾序列干擾CD133陽性細(xì)胞中HOTAIR的表達(dá)后，檢測細(xì)胞中CD133 mRNA、E-鈣黏素（E-cadherin）mRNA及N-鈣黏素（N-cadherin）mRNA的表達(dá)，并開展Transwell實(shí)驗(yàn)以檢測細(xì)胞遷移和侵襲能力的改變。 結(jié)果①RT-PCR檢測結(jié)果表明，CD133陽性組細(xì)胞中CD133 mRNA和HOTAIR mRNA的表達(dá)水平均高于CD133陰性組和未分選組（P＜0.05）。②siHOTAIR干擾細(xì)胞中HOTAIR的表達(dá)后，siHOTAIR1組、siHOTAIR2組及siHOTAIR3組細(xì)胞中HOTAIR mRNA的表達(dá)水平均低于空白對照組和陰性對照組（P＜0.05），且siHOAIR2組細(xì)胞中HOTAIR mRNA的表達(dá)水平低于siHOTAIR1組及siHOTAIR3組（P＜0.05），表明siHOTAIR2的干擾效果最好。③siHOTAIR2組細(xì)胞中CD133 mRNA和N-cadherin mRNA的表達(dá)水平均低于空白對照組和陰性對照組（P＜0.05），但E-cadherin mRNA的表達(dá)水平卻高于空白對照組和陰性對照組（P＜0.05）；細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)和侵襲實(shí)驗(yàn)結(jié)果均表明，siHOTAIR2組的穿膜細(xì)胞數(shù)均低于空白對照組和陰性對照組（P＜0.05）。 結(jié)論HOTAIR mRNA在CD133陽性人胃癌KATO-Ⅲ細(xì)胞中的表達(dá)水平高于CD133陰性細(xì)胞，干擾HOTAIR mRNA的表達(dá)可下調(diào)CD133陽性人胃癌KATO-Ⅲ細(xì)胞中CD133 mRNA的表達(dá)，并抑制胃癌細(xì)胞的遷移及侵襲。
目的系統(tǒng)評價(jià)CD133蛋白表達(dá)與胃癌及其臨床病理特征的相關(guān)性。 方法計(jì)算機(jī)檢索PubMed、EMbase、Web of Knowledge、The Cochrane Library（2013年第10期）、CBM、VIP（1989～2013.10）、CNKI及WanFangData，查找國內(nèi)外公開發(fā)表的關(guān)于CD133蛋白表達(dá)與胃癌及其臨床病理特征相關(guān)性的病例-對照研究，檢索時限均為從建庫至2013年10月。由兩位研究者按照納入和排除標(biāo)準(zhǔn)篩選文獻(xiàn)、提取資料并評價(jià)質(zhì)量后，采用RevMan 5.2軟件進(jìn)行Meta分析。 結(jié)果最終納入9個病例-對照研究，共623例患者。Meta分析結(jié)果顯示：CD133蛋白在胃癌組與癌旁和正常胃組織組［OR=3.89，95% CI（1.87, 8.11），P=0.000 3］、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組［OR=2.75，95% CI（1.99, 3.81），P＜0.000 01］、胃癌Ⅲ～Ⅳ期組與Ⅰ～Ⅱ期組［OR=2.83，95% CI（2.13, 3.76），P＜0.000 01］、伴遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組與無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組［OR=2.38，95% CI（1.47, 3.85），P=0.000 4］的表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但在高中分化組與低分化組的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義［OR=1.70，95% CI（0.90, 3.21），P=0.10］。 結(jié)論CD133蛋白的表達(dá)與胃癌患病及其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及臨床分期等有明顯相關(guān)性，提示其在胃癌發(fā)生、發(fā)展過程中可能起重要作用。受納入研究質(zhì)量限制，上述結(jié)論尚需更多大樣本、設(shè)計(jì)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)母哔|(zhì)量研究加以驗(yàn)證。 目的系統(tǒng)評價(jià)CD133蛋白表達(dá)與胃癌及其臨床病理特征的相關(guān)性。 方法計(jì)算機(jī)檢索PubMed、EMbase、Web of Knowledge、The Cochrane Library（2013年第10期）、CBM、VIP（1989～2013.10）、CNKI及WanFangData，查找國內(nèi)外公開發(fā)表的關(guān)于CD133蛋白表達(dá)與胃癌及其臨床病理特征相關(guān)性的病例-對照研究，檢索時限均為從建庫至2013年10月。由兩位研究者按照納入和排除標(biāo)準(zhǔn)篩選文獻(xiàn)、提取資料并評價(jià)質(zhì)量后，采用RevMan 5.2軟件進(jìn)行Meta分析。 結(jié)果最終納入9個病例-對照研究，共623例患者。Meta分析結(jié)果顯示：CD133蛋白在胃癌組與癌旁和正常胃組織組［OR=3.89，95% CI（1.87, 8.11），P=0.000 3］、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組與無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組［OR=2.75，95% CI（1.99, 3.81），P＜0.000 01］、胃癌Ⅲ～Ⅳ期組與Ⅰ～Ⅱ期組［OR=2.83，95% CI（2.13, 3.76），P＜0.000 01］、伴遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組與無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移組［OR=2.38，95% CI（1.47, 3.85），P=0.000 4］的表達(dá)差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。但在高中分化組與低分化組的表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義［OR=1.70，95% CI（0.90, 3.21），P=0.10］。 結(jié)論CD133蛋白的表達(dá)與胃癌患病及其淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移及臨床分期等有明顯相關(guān)性，提示其在胃癌發(fā)生、發(fā)展過程中可能起重要作用。受納入研究質(zhì)量限制，上述結(jié)論尚需更多大樣本、設(shè)計(jì)嚴(yán)謹(jǐn)?shù)母哔|(zhì)量研究加以驗(yàn)證。