目的 探討將真核表達(dá)載體pcDNA3.1-VEGF-C重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入人乳腺癌MCF-7細(xì)胞后VEGF-C表達(dá)的變化。方法 通過脂質(zhì)體介導(dǎo)方法，將構(gòu)建好含有VEGF-C的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)染入人乳腺癌MCF-7細(xì)胞中，新霉素（G418）篩選得到穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞系，RT-PCR和Western blot方法檢測(cè)穩(wěn)定轉(zhuǎn)染后細(xì)胞中VEGF-C mRNA和蛋白的表達(dá)。 結(jié)果 成功轉(zhuǎn)染并獲得穩(wěn)定高表達(dá)VEGF-C的乳腺癌MCF-7細(xì)胞系， 其轉(zhuǎn)染組VEGF-C mRNA相對(duì)吸光度值（12.382±2.183）較空載組(6.039±1.950)顯著上調(diào)(P＜0.01)。Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染組VEGF-C蛋白相對(duì)灰度值(0.971±0.186)較空載組(0.594±0.196)明顯上調(diào)(P＜0.05)。 結(jié)論 脂質(zhì)體介導(dǎo)重組質(zhì)粒pcDNA3.1-VEGF-C轉(zhuǎn)染入人乳腺癌MCF-7細(xì)胞中可顯著增加VEGF-C表達(dá)水平。
目的探索雌激素受體α（ERα）陽(yáng)性乳腺癌組織及乳腺纖維腺瘤組織中Mdm2的表達(dá)，并探索MDM2-siRNA對(duì)人乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖、克隆及凋亡的影響。 方法①回顧性收集筆者所在醫(yī)院2012年6月至2015年10月期間的經(jīng)病理組織學(xué)檢查確診的ERα陽(yáng)性乳腺癌組織石蠟標(biāo)本78例（乳腺癌組）及乳腺纖維腺瘤組織石蠟標(biāo)本10例（乳腺纖維腺瘤組），采用免疫組化染色方法檢測(cè)其Mdm2的表達(dá)，并分析乳腺癌患者中Mdm2表達(dá)與其臨床病理特征的關(guān)系。②將MCF-7細(xì)胞分為MDM2-siRNA組、陰性對(duì)照組及空白對(duì)照組，MDM2-siRNA組和陰性對(duì)照組分別轉(zhuǎn)染MDM2-siRNA及無效干擾siRNA，空白對(duì)照組不加入任何試劑。檢測(cè)3組細(xì)胞中Mdm2的表達(dá)、細(xì)胞增殖率、克隆形成數(shù)量及凋亡率，并進(jìn)行組間比較。 結(jié)果①乳腺纖維腺瘤組織中Mdm2均呈陰性表達(dá)，表達(dá)陽(yáng)性率為0（0/10）；ERα陽(yáng)性乳腺癌組織中Mdm2陽(yáng)性表達(dá)38例，陽(yáng)性表達(dá)率為48.7%（38/78），高于乳腺纖維腺瘤組織（χ2=12.357，P=0.000）；ERα陽(yáng)性乳腺癌組織中Mdm2表達(dá)與患者的TNM分期和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量均有關(guān)（P＜0.050），TNM分期越晚、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移數(shù)量越多，Mdm2的表達(dá)陽(yáng)性率越高。② MDM2-siRNA組細(xì)胞的Mdm2表達(dá)水平，轉(zhuǎn)染后2、3及4 d時(shí)的細(xì)胞增殖率及細(xì)胞克隆形成數(shù)均低于空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組（P＜0.050），而細(xì)胞凋亡率高于空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組（P＜0.050），但空白對(duì)照組和陰性對(duì)照組轉(zhuǎn)染后1、2、3及4 d時(shí)的細(xì)胞增殖率，Mdm2表達(dá)水平，細(xì)胞克隆形成數(shù)及細(xì)胞凋亡率比較差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.050）。 結(jié)論ERα陽(yáng)性乳腺癌患者中Mdm2的表達(dá)情況是診斷乳腺癌的相對(duì)特異性標(biāo)志物，靶向Mdm2可能在ERα陽(yáng)性乳腺癌患者的治療中具有一定價(jià)值。
目的:探討雌激素饑餓對(duì)腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞MCF-7凋亡的影響及作用機(jī)制?！糎TH〗方法〖HTSS〗:MCF-7細(xì)胞培養(yǎng)貼壁之后,用雌激素饑餓處理后加入TRAIL,用熒光染料Hoechst染色法檢測(cè)細(xì)胞的凋亡,用細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測(cè)細(xì)胞的存活。在雌激素饑餓處理MCF-7細(xì)胞后,收集對(duì)照和饑餓組蛋白用Western blot法檢測(cè)相關(guān)的蛋白表達(dá)。〖HTH〗結(jié)果〖HTSS〗:單獨(dú)使用雌激素饑餓處理或者單獨(dú)使用TRAIL處理乳腺癌細(xì)胞MCF-7都能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡,但是它們誘導(dǎo)凋亡的活性較小,兩種方法聯(lián)合使用可以極大地增加誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡的活性(Plt;0.001)。雌激素饑餓處理后的乳腺癌細(xì)胞,死亡受體5(DR5)表達(dá)上調(diào)?！糎TH〗結(jié)論〖HTSS〗:乳腺癌細(xì)胞MCF-7對(duì)TRAIL敏感度不高,雌激素饑餓可以增加TRAIL誘導(dǎo)乳腺癌細(xì)胞凋亡的活性,DR5與雌激素饑餓誘導(dǎo)TRAIL活性增加相關(guān)。