目的 探討p53基因第72位密碼子(Arg72Pro)多態(tài)性與胃癌高發(fā)區(qū)甘肅河西地區(qū)漢族人群胃癌遺傳易感性的關(guān)系，并探討Arg72Pro多態(tài)性與環(huán)境因素、胃癌發(fā)生部位、病理分型等的相互關(guān)系。方法 采用 Taq Man實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法檢測(cè)140例胃癌患者、110例胃癌癌前病變患者以及125例健康人群的外周血標(biāo)本p53基因Arg72Pro的多態(tài)性，并比較其不同的基因型與胃癌風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)系； 對(duì)胃鏡活檢以及手術(shù)切除標(biāo)本應(yīng)用Warthin-Starry法(W-S法)判斷幽門(mén)螺桿菌（Hp）感染情況。結(jié)果 胃癌組、癌前病變組及健康對(duì)照組的Pro等位基因頻率分別為 0.543、 0.482和0.472，Pro基因型攜帶者的胃癌發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)是Arg/Arg基因型攜帶者的1.846倍〔95% CI (1.006~3.387)， P =0.046〕。經(jīng)Logistic回歸篩選確定了飲食、Hp感染、精神因素以及腫瘤家族史為胃癌的危險(xiǎn)因素，并與Pro基因型具有加乘作用。p53基因型分布和胃癌的部位及病理分型具有相關(guān)性（ P ＜ 0.05） 。結(jié)論 p53 Arg72Pro多態(tài)性與甘肅河西地區(qū)漢族人群胃癌遺傳易感性相關(guān)，值得進(jìn)一步進(jìn)行功能學(xué)探討及大樣本人群驗(yàn)證。
目的探討膽囊癌的發(fā)生與細(xì)菌L型感染和p21及p53基因突變的關(guān)系。方法采用免疫組化SP法和革蘭氏染色技術(shù)，對(duì)40例膽囊癌及40例慢性膽囊炎組織中的細(xì)菌L型和突變型p53蛋白及p21蛋白進(jìn)行檢測(cè)，并對(duì)膽囊癌組織中的細(xì)菌L型陽(yáng)性伴p21及p53蛋白陽(yáng)性表達(dá)結(jié)果和細(xì)菌L型陰性伴p21及p53蛋白陽(yáng)性表達(dá)結(jié)果進(jìn)行對(duì)比分析。結(jié)果膽囊癌組織中革蘭氏染色細(xì)菌L型檢出率為77.5%(31/40)，明顯高于膽囊炎的57.5%(23/40)，P＜0.05，且與免疫組化細(xì)菌L型抗原表達(dá)陽(yáng)性率〔80.0%(32/40)〕具有一致性； 膽囊癌組織中的p21及p53蛋白表達(dá)陽(yáng)性率分別為62.5%(25/40)和65.0%(26/40)，明顯高于膽囊炎組織中的p21及p53蛋白表達(dá)陽(yáng)性率〔2.5%(1/40)和5.0%（2/40）〕，P＜0.05； 膽囊癌組織中的細(xì)菌L型陽(yáng)性者其p21及p53蛋白表達(dá)陽(yáng)性率分別為75.0%(24/32)和78.1%（25/32）,明顯高于細(xì)菌L型陰性者的p21及p53蛋白的表達(dá)陽(yáng)性率〔12.5%(1/8)，12.5%(1/8)〕，P＜0.05。結(jié)論細(xì)菌L型參與了p21及p53基因的突變，并在膽囊癌的發(fā)生中可能起協(xié)同作用。
目的 探討槐耳清膏在體外對(duì)人直腸癌HR8348細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用和凋亡誘導(dǎo)作用及其作用機(jī)理。方法 將處于對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的HR8348細(xì)胞用含槐耳清膏的培養(yǎng)基培養(yǎng)36 h，用四氮唑藍(lán)（MTT）比色法檢測(cè)吸光度(OD)值，計(jì)算抑制率； 用甲基綠-派若寧染色法及TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡指數(shù)； 用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)bcl-2、bcl-xl、bax、bak及p53基因表達(dá)的情況。結(jié)果 槐耳清膏對(duì)HR8348細(xì)胞的抑制率隨濃度增加而上升，濃度為4.0 mg/ml時(shí)抑制率最大（71.1%），與5-FU組（濃度為10 μg/ml）相比差異無(wú)顯著性意義（P＞0.05）。甲基綠-派若寧染色法和TUNEL法均可見(jiàn)到典型的細(xì)胞凋亡、凋亡小體或出泡現(xiàn)象，凋亡指數(shù)隨槐耳清膏濃度的增加而增加，當(dāng)濃度達(dá)4.0 mg/ml時(shí)，凋亡指數(shù)迅速上升，甲基綠-派若寧法為0.1620±0.0128，TUNEL法為0.2612±0.0158，均大于5-FU組的凋亡指數(shù)（0.0780±0.0095和0.1028±0.0131），P＜0.05?；倍甯嘟Mbcl2、bclxl、bak、p53蛋白表達(dá)較空白對(duì)照組明顯增強(qiáng)（P＜0.05)，而bax變化不明顯（P＞0.05）?；倍甯嘟Mbak/bcl-2 和bak/bcl-xl比值顯著大于空白對(duì)照組。結(jié)論 槐耳清膏在體外對(duì)人直腸癌HR8348細(xì)胞具有顯著的抑制作用和凋亡誘導(dǎo)作用?；倍甯嗾T導(dǎo)人直腸癌HR8348細(xì)胞凋亡可能與提高bak/bcl-2、bak/bcl-xl比值及上調(diào)p53基因表達(dá)有關(guān)。
目的 探討5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil,5-FU）體外誘導(dǎo)直腸癌HR8348細(xì)胞凋亡的作用及細(xì)胞凋亡與bcl-2、bcl-xl、bax及p53表達(dá)的關(guān)系。方法 經(jīng)5-FU處理HR8348細(xì)胞24 h后，用甲基綠-派若寧染色法和TUNEL法檢測(cè)細(xì)胞凋亡情況，并用SP免疫組織化學(xué)法檢測(cè)HR8348細(xì)胞中bcl-2、bcl-xl、bax和p53的表達(dá)。結(jié)果 HR8348細(xì)胞經(jīng)5-FU作用24 h后，細(xì)胞凋亡指數(shù)（AI）明顯高于對(duì)照組，差異有顯著性意義（P＜0.01）。5-FU作用不同時(shí)相bcl-2的表達(dá)評(píng)分結(jié)果與對(duì)照組比較差異均無(wú)顯著性意義； 不同時(shí)相bcl-xl的表達(dá)評(píng)分結(jié)果與對(duì)照組比較稍降低； 而bax的表達(dá)評(píng)分結(jié)果隨時(shí)間延長(zhǎng)明顯增加，24 h、36 h的表達(dá)評(píng)分結(jié)果明顯高于對(duì)照組（P＜0.01），而p53在5-FU組和對(duì)照組各時(shí)相均未見(jiàn)表達(dá)。結(jié)論 5-FU具有誘導(dǎo)HR8348細(xì)胞凋亡的作用； 5-FU可能通過(guò)上調(diào)bax的表達(dá)并改變bax/bcl-xl的比值而誘導(dǎo)HR8348細(xì)胞凋亡。
目的 探討p53及c-erb B-2癌基因蛋白在乳腺非典型增生及癌變組織中的表達(dá)及其在非典型增生及癌變過(guò)程中與血管生成的關(guān)系。方法 對(duì)103例正常乳腺、乳腺非典型增生及乳腺癌組織的p53及c-erb B-2癌基因蛋白及第8因子相關(guān)抗原FⅧ-RA進(jìn)行免疫組化染色。對(duì)微血管內(nèi)皮細(xì)胞面積(MEA)進(jìn)行CIAS定量測(cè)定，并分析p53及c-erb B-2與MEA的相關(guān)性。 結(jié)果 在輕度非典型增生組織中，p53癌基因蛋白陽(yáng)性表達(dá)組MEA(4 194.89±498.599 8)高于陰性組(3 216.94±803.939 4,t=2.302 4,P＜0.05)。中重度非典型增生組織中，p53陽(yáng)性組MEA(4 525.82±1 360.827 7)高于陰性組（3 564.61±687.064 6,t=2.179 4,P＜0.05）。c-erb B-2與MEA無(wú)相關(guān) 性(P＞0.05)。結(jié)論 在乳腺非典型增生及癌變過(guò)程中，p53癌基因蛋白表達(dá)與血管生成具有明顯相關(guān)性。
目的 探討p53基因第72位密碼子多態(tài)與瘢痕疙瘩遺傳易感性的關(guān)系。 方法 采用聚合酶鏈反應(yīng)反向斑點(diǎn)雜交、DNA直接測(cè)序方法，檢測(cè)了15例瘢痕疙瘩患者與15名正常人對(duì)照的p53基因第72位密碼子的基因型。結(jié)果 瘢痕疙瘩組的Pro等位基因及Pro/Pro基因型頻率明顯高于對(duì)照組(Ｐ值分別為0.035、0.030)，Pro/Arg、Arg/Arg基因型頻率在病例組和對(duì)照組的分布差異無(wú)顯著性。 結(jié)論 p53基因第72位密碼子Pro等位基因及Pro/Pro基因型可能是瘢痕疙瘩的易感因素。
目的 觀察外源性雌激素受體β1（estrogen receptor β1，ERβ1）基因轉(zhuǎn)染乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞后對(duì)p53基因表達(dá)和細(xì)胞凋亡的影響，探討ERβ1在乳腺癌中的生物學(xué)作用。方法 應(yīng)用脂質(zhì)體法將ERβ1真核表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染至乳腺癌MDA-MB-231細(xì)胞中，分別用熒光實(shí)時(shí)定量PCR法、Western blot法檢測(cè)轉(zhuǎn)染前、后細(xì)胞中ERβ1與p53 mRNA和蛋白表達(dá)的變化，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。細(xì)胞生長(zhǎng)曲線顯示轉(zhuǎn)染前、后細(xì)胞增殖能力的改變。結(jié)果 轉(zhuǎn)染外源性ERβ1真核表達(dá)質(zhì)粒后，MDA-MB-231細(xì)胞中ERβ1及p53 mRNA和蛋白表達(dá)明顯增強(qiáng)（Plt;0.01）; 細(xì)胞凋亡率明顯增加（Plt;0.01），增殖能力明顯減弱（Plt;0.01）。結(jié)論 在乳腺癌中，ERβ1可以通過(guò)上調(diào)p53基因表達(dá)促進(jìn)乳腺癌細(xì)胞凋亡，從而抑制乳腺癌細(xì)胞的增殖。
目的 介紹近年來(lái)抑癌基因p53和癌基因c-erbB-2與胃癌關(guān)系的研究進(jìn)展。方法 收集近年來(lái)國(guó)內(nèi)、外關(guān)于胃癌中p53和c-erbB-2的相關(guān)文獻(xiàn)并進(jìn)行綜述。結(jié)果 p53基因突變和c-erbB-2的過(guò)表達(dá)是胃癌發(fā)生中的常見(jiàn)事件。p53突變與胃癌的發(fā)生部位及其侵襲性生物學(xué)行為有關(guān); c-erbB-2的過(guò)表達(dá)可作為判斷胃癌預(yù)后的獨(dú)立參數(shù)。針對(duì)p53及c-erbB-2的基因靶向治療藥物也在不斷研究中。結(jié)論 深入研究p53與c-erbB-2基因在胃癌發(fā)生、發(fā)展中的作用，將有助于清楚地認(rèn)識(shí)胃癌的生物學(xué)行為，并為胃癌的基因治療提供理論依據(jù)。
目的 探討p53基因和hMLH1基因的突變是否是直腸癌發(fā)生的早期事件之一。方法 用PV-9000二步法免疫組化檢測(cè)技術(shù)對(duì)我院2003年2月至2009年7月期間的32例早期直腸癌、32例直腸腺瘤及30例正常直腸黏膜組織石蠟切片進(jìn)行p53和hMLH1基因蛋白表達(dá)的檢測(cè)。結(jié)果 ①正常直腸黏膜組織、直腸腺瘤組織及早期直腸癌組織中p53蛋白表達(dá)陽(yáng)性率分別為0(0/30)、59.38%(19/32)及68.75%(22/32),其在直腸腺瘤組織和早期直腸癌組織中的p53蛋白表達(dá)陽(yáng)性率差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Pgt;0.05),但二者均明顯高于其在正常直腸黏膜組織中的表達(dá)(Plt;0.01); hMLH1蛋白在前述三種組織中的表達(dá)陰性率分別為0(30/30)、12.50%(4/32)和50.00%(16/32)，其在早期直腸癌組織中的表達(dá)陰性率明顯高于在直腸腺瘤組織和正常直腸黏膜組織中的表達(dá)（Plt;0.01）。②在直腸腺瘤組織和早期直腸癌組織中p53陽(yáng)性表達(dá)同時(shí)合并hMLH1陰性表達(dá)者分別占9.38%(3/32)及37.50%(12/32)，二者間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.008)。③p53陽(yáng)性表達(dá)和hMLH1陰性表達(dá)均與早期直腸癌的分化程度有關(guān)(Plt;0.05)，而均與患者的性別、年齡、腫瘤最大徑、浸潤(rùn)深度及大便潛血均無(wú)關(guān)(Pgt;0.05)。④p53陽(yáng)性表達(dá)與腺瘤的增生程度有關(guān)(P=0.009)，hMLH1陰性表達(dá)與腺瘤的增生程度無(wú)關(guān)(Pgt;0.05)。結(jié)論 p53基因和hMLH1基因的同時(shí)突變致癌作用明顯，可能是直腸癌發(fā)生的早期事件之一。
【摘要】目的 研究小分子泛素樣修飾體-1(small ubiquitin-like modifier-1，SUMO-1)在野生型p53基因誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡中的作用。方法 用含人野生型p53基因質(zhì)粒pcDNA3-wtp53(pwtp53)、含人雙微粒體基因2〔（human double minute gene 2 (HDM2)； 鼠同源基因?yàn)镸DM2〕質(zhì)粒pCMV-HDM1B(pMDM2)、含人SUMO-1基因質(zhì)粒pcDNA3-His6-SUMO-1(pSUMO-1)和空質(zhì)粒pcDNA3分別或同時(shí)轉(zhuǎn)染HepG2細(xì)胞，獲得各轉(zhuǎn)染細(xì)胞系，應(yīng)用Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞中質(zhì)粒蛋白的表達(dá)及流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞凋亡比例。結(jié)果 轉(zhuǎn)染pwtp53和pMDM2質(zhì)粒的HepG2細(xì)胞均可見(jiàn)p53及MDM2蛋白條帶，同時(shí)轉(zhuǎn)染pSUMO-1質(zhì)粒的細(xì)胞分別可見(jiàn)被SUMO-1修飾的相對(duì)分子量較大的p53和MDM2蛋白條帶，在未轉(zhuǎn)染任何質(zhì)粒、僅轉(zhuǎn)染空質(zhì)粒和pSUMO1質(zhì)粒的細(xì)胞中只檢測(cè)到少量p53蛋白表達(dá)。轉(zhuǎn)染pwtp53及pwtp53+pSUMO-1質(zhì)粒的HepG2細(xì)胞凋亡比例分別為(16.79±1.62)%和(18.15±1.36)%，轉(zhuǎn)染pwtp53+pMDM2+pSUMO-1質(zhì)粒的細(xì)胞凋亡比例為(14.06±1.84)%，轉(zhuǎn)染pwtp53+pMDM2質(zhì)粒的細(xì)胞凋亡比例則下降至(5.17±1.23)%，與前三者比較差異有顯著性意義(PH＜0.01)； 其他轉(zhuǎn)染系細(xì)胞中的細(xì)胞凋亡比例均≤2%，差異無(wú)顯著性意義。結(jié)論 SUMO-1通過(guò)與p53蛋白的結(jié)合或翻譯后修飾，抑制MDM2等癌基因蛋白對(duì)p53蛋白的降解，可增強(qiáng)p53抑癌基因誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡。