目的 觀察無菌性松動全髖關(guān)節(jié)假體周圍界膜中凋亡調(diào)控蛋白Caspase-3表達和細胞凋亡分布的變化,探討其與假體周圍骨溶解之間的關(guān)系。方法 2001年4月~2006年8月臨床上選取16例高分子聚乙烯金屬配伍全髖關(guān)節(jié)翻修術(shù)的患者，其中男10例，女6例；初裝年齡45~67歲，翻修年齡55~78歲，使用時間7~13年。根據(jù)術(shù)前X線片和術(shù)中所見，分為松動/非骨溶解組和松動/骨溶解組，每組各8例，取出假體周圍各區(qū)的假體骨間界膜組織。另取6例初裝人工全髖關(guān)節(jié)的骨性關(guān)節(jié)炎患者作為對照組，其中男2例，女4例；年齡54~68歲，病程9~15年；采用免疫組織化學法檢測界膜組織中Caspase-3的表達,末端標記法原位檢測細胞凋亡，分析并比較Caspase-3和細胞凋亡的陽性表達和分布,與磨損顆粒的局部聚積和骨溶解程度的關(guān)系。結(jié)果 高分子聚乙烯磨損顆粒局部聚積區(qū)的Caspase-3陽性細胞率和細胞凋亡指數(shù)明顯高于金屬磨損顆粒；重度磨損細胞凋亡指數(shù)高于輕度磨損，差異有統(tǒng)計學意義(Plt;0.05);松動/骨溶解組Caspase-3陽性細胞率和細胞凋亡指數(shù)明顯高于松動/非骨溶解組和對照組，差異有統(tǒng)計學意義(Plt;0.01)。結(jié)論 假體周圍界膜組織Caspase-3的表達和細胞凋亡具有一定規(guī)律性,并與磨損微粒的局部聚積和骨溶解程度密切相關(guān)，可能是磨損顆粒造成界面骨重建受阻而溶骨大量發(fā)生的關(guān)鍵環(huán)節(jié)之一；細胞凋亡參與了假體無菌性松動的病理過程，且與Caspase-3信號激活有關(guān)。
目的 通過觀察鹿茸多肽對白細胞介素 1β（interleukin 1β，IL-1β）誘導(dǎo)軟骨表型化骨髓間充質(zhì)干細胞（marrow mesenchymal stem cells，MSCs）凋亡的影響，以優(yōu)化軟骨組織工程的種子細胞。方法 新西蘭大白兔2只，抽取其骨髓；經(jīng)密度梯度離心得到單核細胞，經(jīng)體外分離、培養(yǎng)獲得兔MSCs。用轉(zhuǎn)化生長因子β1（transforming growth factor β1，TGF-β1）和堿性成纖維細胞生長因子（basic fibroblast growth factor，bFGF）將其誘導(dǎo)分化軟骨表型。將軟骨表型化MSCs隨機分成A組（空白對照組）：5%胎牛血清的αMEM培養(yǎng)液；B組（IL-1β組）：5%胎牛血清的αMEM培養(yǎng)液加入100 ng IL-1β；C組（鹿茸多肽組）：5%胎牛血清的αMEM培養(yǎng)液加入10 μg/ml鹿茸多肽作用3d后再加入100 ng IL-1β；D組（TGF-β1組）：5%胎牛血清的α-MEM培養(yǎng)液加10 ng/ml TGF-β1作用3 d后再加入100 ng IL-1β。分別于培養(yǎng)24、48和72 h后取樣，采用透射電鏡觀察細胞形態(tài)，Annexin V法檢測細胞凋亡率，RT-PCR技術(shù)分析Caspase-3 mRNA表達水平，ELISA法檢測Caspase-3蛋白酶活性。結(jié)果 透射電鏡觀察：B組24 h后細胞核內(nèi)染色質(zhì)開始呈塊狀凝集，分布于核膜下，核膜不規(guī)則；48 h后細胞核內(nèi)染色質(zhì)凝集加?。?2 h后部分細胞內(nèi)的核碎片凝集成凋亡小體。各時間點C、D組細胞結(jié)構(gòu)改變相對滯后，且數(shù)量較少；A組細胞結(jié)構(gòu)幾乎無明顯改變。各時間點B組MSCs凋亡率、Caspase-3 mRNA表達及蛋白酶活性逐漸增高，與A組比較差異有統(tǒng)計學意義（Plt;0.01）；C、D組與B組比較則逐漸下降，且差異有統(tǒng)計學意義（Plt;0.05）。結(jié)論 Caspase3參與MSCs凋亡，鹿茸多肽通過減少Caspase-3 mRNA表達，并抑制其蛋白酶活性，阻止或逆轉(zhuǎn)軟骨表型化MSCs凋亡。
目的 觀察關(guān)節(jié)游離體軟骨細胞的生物學特性，尋找組織工程軟骨種子細胞來源。方法 分別取游離體軟骨標本5例，正常軟骨標本2例和骨關(guān)節(jié)炎軟骨標本6例，組織學觀察其細胞分布、尿嘧啶脫氧核苷末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的三磷酸脫氧核苷缺口標記法觀察細胞凋亡，細胞分離培養(yǎng)觀察原代軟骨細胞形態(tài)，并進行比較。結(jié)果 與正常軟骨、骨關(guān)節(jié)炎軟骨比較, 游離體軟骨細胞分布密度較高，細胞凋亡明顯，體外培養(yǎng)時原代細胞已呈成纖維細胞樣形態(tài)。結(jié)論 游離體軟骨細胞已具有成纖維細胞特性，不宜直接作為組織工程的種子細胞來源。
目的：分析體外受精(IVF)患者卵泡液中sFas和sFasL的濃度與妊娠的關(guān)系，以及與卵泡液中的促黃體素(LH)水平之間的相關(guān)性。方法：收集行IVF/ICSI患者的卵泡液，測定sFas、sFasL和LH濃度。結(jié)果：妊娠組排卵前卵泡液中的sFasL和LH水平顯著高于未妊娠組(P分別為0.002和＜0.001)，兩組中sFas水平?jīng)]有明顯差異。通過logistic回歸分析，卵泡液中與妊娠有統(tǒng)計學相關(guān)的因素僅為LH，OR=4.117(P為0.001)。卵泡液中的LH和sFasL的水平呈明顯正相關(guān)關(guān)系(Plt;0.001)，LH與sFas之間無顯著相關(guān)關(guān)系。結(jié)論：在IVF/ICSI治療周期中，卵泡液中的sFasL蛋白和LH水平與妊娠結(jié)局有關(guān)，卵泡液中的LH水平可能通過調(diào)節(jié)卵泡局部的某些系統(tǒng)來調(diào)節(jié)卵泡中FasFasL系統(tǒng)介導(dǎo)的凋亡作用。
目的:探討丙型肝炎病毒非結(jié)構(gòu)蛋白NS4B在原發(fā)性肝癌發(fā)生中的作用,及其發(fā)生機制。方法:設(shè)置對照組、空白載體PCXN2組、轉(zhuǎn)染NS4B組。使用脂質(zhì)體介導(dǎo)法,轉(zhuǎn)染丙型肝炎病毒非結(jié)構(gòu)蛋白重組質(zhì)粒NS4B進入Chang肝細胞內(nèi),并用G418篩選。繪制生長曲線,分別用流式細胞儀檢測瞬時表達及穩(wěn)定表達時肝細胞凋亡率,用均數(shù)±標準差表示,統(tǒng)計學分析采用Dunnett t檢驗及q檢驗。結(jié)果:瞬時表達各組(PCXN2,NS4B)凋亡率分別為:(918±060)%,(445±053)%。穩(wěn)定表達各組(PCXN2,NS4B)凋亡率分別為:(1575±209)%,(366±034)%。與PCXN2組比較Plt;001。結(jié)論:NS4B抑制肝細胞凋亡率,可能導(dǎo)致肝細胞異常增殖,誘導(dǎo)肝癌發(fā)生。