目的 觀察膿毒癥患者外周血白細胞中微小RNA-150( miR-150) 的表達變化, 探討其與膿毒癥免疫細胞因子水平及嚴重程度的關系。方法 采用實時定量PCR( qRT-PCR) 檢測40 例膿毒癥患者、20 例全身性炎癥反應綜合征( SIRS) 患者和20 例正常對照外周血白細胞中miR-150 表達量, 并評價miRNA 檢測的穩(wěn)定性和線性。酶聯免疫吸附法測定TNF-α和IL-10濃度, 序貫器官衰竭估計(SOFA) 評分系統(tǒng)評價膿毒癥患者的嚴重程度。對miR-150與白細胞總數、TNF-α、IL-10 和SOFA評分之間進行相關分析。結果 外周血標本在4 ℃保存5 d, 白細胞中miR-150 表達量無明顯變化; 最低檢出限為6. 97 pg/ μL RNA, 在6. 97～6. 97 ×104 pg/ μL RNA 之間有良好的線性關系( r = 0. 999) 。膿毒癥組miR-150 表達量較正常對照組顯著降低( P lt; 0. 01) , 白細胞總數、IL-10水平和IL-10/TNF-α比值顯著升高( Plt;0. 05) ; 而膿毒癥組與SIRS 組間差異均無統(tǒng)計學意義( Pgt;0. 05) 。血清TNF-α水平在三組間差異均無統(tǒng)計學意義( Pgt;0. 05) 。膿毒癥患者中, 死亡組miR-150 表達量較存活組顯著降低( Plt;0. 05) , 而IL-10 水平和IL-10 /TNF-α比值顯著升高( Plt;0. 01) , TNF-α水平差異無統(tǒng)計學意義( Pgt;0. 05) 。膿毒癥患者miR-150 表達量與SOFA 評分、血清TNF-α和IL-10呈顯著負相關( r 值分別為-0. 619、-0. 457 和-0. 431, Plt;0.05) ; 與WBC無顯著相關性( Pgt;0.05) 。血清TNF-α、IL-10 和IL-10/TNF-α比值與SOFA 評分無顯著相關性( Pgt;0.05) 。結論 膿毒癥患者外周血miR-150表達量顯著降低, 其水平不但能反映機體炎癥反應狀態(tài), 而且在一定程度上能作為判斷疾病嚴重程度及預后的指標。
目的 通過離體缺血-再灌注心臟模型，觀察缺血預處理（IPC）、缺血后處理（IPO）和肢體遠端預處理（RIPC）后心臟microRNA1 （miRNA-1）和microRNA21 （miRNA-21）的表達變化，以及它們所調控靶蛋白熱休克蛋白70 （HSP70）和程序性細胞死亡4 （PDCD4）表達變化，期望從miRNA調控水平揭示心臟的內源性保護機制?！》椒ā∪prague-Dawley （SD）大鼠心臟，建立離體Langendorff心肌缺血-再灌注模型，隨機分為4組（每組12只），對照組、IPC組、IPO組和RIPC組。檢測各組血流動力學指標，蛋白印跡法（Western blotting）檢測PDCD4、HSP70、B細胞淋巴瘤/白血病-2 （Bcl-2） 和Bcl-2相關X蛋白（Bax）含量，taqman探針法檢測miRNA-1和miRNA-21含量，末端脫氧核苷酸轉移酶介導的原位缺口標記法（TUNEL） 檢測心肌細胞凋亡，2，3，5-氯化三苯基四氮唑（TTC） 法檢測心肌梗死面積?！〗Y果 IPC組心肌的 miRNA-1和miRNA-21表達明顯高于對照組，但RIPC組和IPO組心肌的miRNA-1表達較對照組明顯降低 （P＜0.05）。IPC組、RIPC組和IPO組心肌中HSP70、PDCD4和Bax蛋白含量較對照組明顯減少（P＜0.05），Bcl-2蛋白含量各組間差異無統(tǒng)計學意義。IPC組、RIPC組和IPO組左室心肌梗死面積/左室總面積以及心肌細胞凋亡率明顯低于對照組（P＜0.05）?！〗Y論 miRNA-1和miRNA-21在缺血預處理、缺血后處理和遠端預處理后，表達變化是不同的，同時各處理組中miRNA與其靶蛋白并不都是負性調節(jié)關系。
目的探討微小RNA-451（micro RNA-451，miRNA-451）靶向調節(jié)鈣結合蛋白39（calcium binding protein 39，CAB39）表達，促進MSCs向成骨細胞分化的效應。 方法選擇pMIR-report質粒及pRL-TK質粒，通過雙熒光素酶基因報告系統(tǒng)，鑒定CAB39是否為miRNA-451的靶基因。將pre-miRNA-451（A組）及anti-miRNA-451（C組）分別轉染到C3H10T1/2細胞中，同時設置相應的pre-miRNA陰性對照組（B組）和anti-miRNA陰性對照組（D組）；成骨誘導培養(yǎng)7、14 d，采用實時熒光定量PCR檢測成骨標志物Runx2、ALP mRNA相對表達量；誘導培養(yǎng)14 d，采用Western blot檢測細胞中CAB39蛋白表達，茜素紅染色觀察細胞外鈣基質沉積情況。 結果經鑒定，CAB39是miRNA-451的靶基因。實時熒光定量PCR檢測示，成骨誘導培養(yǎng)7、14 d，A組Runx2、ALP mRNA相對表達量顯著高于B組，C組顯著低于D組，差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。成骨誘導培養(yǎng)14 d，Western blot檢測示A組CAB39蛋白表達量為0.55 ± 0.05，較B組1.00 ± 0.07明顯降低；而C組為1.21 ± 0.05，較D組1.00 ± 0.04明顯增高；差異均有統(tǒng)計學意義（P lt; 0.05）。茜素紅染色示A組細胞外鈣基質沉積較B組明顯增多，而C組細胞外鈣基質沉積較D組明顯減少。 結論miRNA-451可通過抑制CAB39表達，促進MSCs成骨分化。
目的 總結微小RNA（microRNA，miRNA）在成骨細胞分化成熟過程中的調控作用及作用機制，為相關的基礎和臨床研究提供參考。 方法 廣泛查閱近年miRNA 對成骨分化調節(jié)相關研究文獻，對成骨細胞分化成熟過程中的功能性miRNA 進行分類和總結。 結果 miRNA 分子參與了成骨細胞分化成熟過程中的各個階段，通過調節(jié)BMP、TGF-β、Wnt/β-catenin 等一系列信號通路調控成骨細胞的分化成熟。在病理狀況下，尤其是一些成骨細胞分化紊亂引起的疾病中能觀察到相關miRNA 分子的異常表達。 結論 miRNA 在成骨細胞分化成熟過程中的生理病理作用將為骨代謝相關疾病的早期診斷和靶向治療提供新的思路和手段。
目的 明確萎縮性骨不連組織中表達上調的數種微小RNA（micro RNA，miRNA）與其相應靶基因mRNA、蛋白在hBMSCs 成骨分化過程中的表達變化趨勢和生物學功能。 方法 取自體髂骨植骨手術患者的髂骨骨髓血，采用密度梯度離心法分離培養(yǎng)hBMSCs。取第4 代hBMSCs 以成骨誘導培養(yǎng)液誘導成骨分化，分別提取0、12 h，1、2、4、7、14 d 時的細胞總RNA 和蛋白，進行miRNA 的實時定量PCR（quantitative real-time PCR，qRT-PCR）、相應靶基因mRNA 的qRT-PCR 和蛋白Western blot 檢測。 結果 誘導hBMSCs 成骨分化時，成骨性靶基因堿性磷酸酶（alkaline phosphatase liver/bone/kidney，ALPL）、PDGF-α 多肽（PDGF-α polypeptide，PDGF-A）和BMP-2 的mRNA 和蛋白表達在多數時間點同對照（0 h）相比增加（BMP-2 在12 h 和1 d 時下降），1 ～ 7 d 變化最為顯著。不同時間點的miRNA、靶基因mRNA 和蛋白表達水平存在差異，其中hsa-miRNA-149 和hsa-miRNA-654-5p miRNA 含量的變化趨勢與各自靶基因ALPL 和BMP-2 的mRNA 及蛋白表達水平總體上成負相關（P lt; 0.05），hsa-miRNA-221 與其靶基因PDGF-A 的變化趨勢無明顯負相關關系（P gt; 0.05）。 結論 誘導hBMSCs 成骨分化過程中，hsa-miRNA-149 和hsa-miRNA-654-5p 對其相應靶基因ALPL 和BMP-2 的mRNA 及蛋白存在密切調控關系。
目的 對微小RNAs（microRNAs，miRNAs）在骨與軟骨組織中的調控作用和作用機制作一綜述。 方 法 廣泛查閱近年來有關miRNAs 在骨與軟骨組織的調控作用及作用機制的文獻，進行總結與分析。 結 果 miRNAs 是近年來骨關節(jié)疾病研究的熱點，越來越多研究顯示其在骨與軟骨組織形成和代謝過程中，對于細胞分化、細胞基質分泌等方面發(fā)揮重要的調控作用，但確切機制尚不清楚。 結論 通過對miRNAs 在骨與軟骨組織中的調控作用及作用機制的研究，可能為了解退行性骨關節(jié)疾病開辟新的領域。
目的?總結異位骨化（heterotopic ossification，HO）發(fā)病機制的研究進展。?方法?查閱近年有關HO危險因素及發(fā)病機制的文獻，并綜合分析。?結果?HO發(fā)病機制尚未明確，但對HO相關的細胞外因子、信號通路、轉錄因子等有了更深入了解，如BMP、Smad信號通路、核心結合因子α1/成骨特異性轉錄因子2等可能參與了HO的形成，而一些相關的微小RNA也有可能參與HO形成。?結論?通過對HO發(fā)病機制進一步研究，為有效防治HO奠定基礎。
目的 對微小RNAs（microRNAs，miRNAs）在成骨過程中的調控作用及作用機制的研究現狀、存在的爭議以及研究方向作一綜述。 方法 廣泛查閱近年來有關成骨過程中miRNAs 的調控作用及作用機制的文獻，進行總結與分析。 結果 miRNAs 是近來成骨研究的熱點，越來越多資料顯示其在骨化過程中發(fā)揮重要作用，但確切機制尚未清楚。 結論 通過應用miRNAs 技術促進成骨細胞分化，具有巨大的應用前景，同時將可能獲取成骨細胞分化中的miRNAs 調控機制，也有利于建立成骨效果比較的研究模型。
目的 探討異位骨化（HO）發(fā)病機制以及其研究策略。 方法 查閱近年有關HO危險因素及發(fā)病機制的文獻，結合相關領域的方法學及新技術和新觀點進展綜合分析。結果 HO發(fā)病機制尚未完全明確，但其本質是一種體內互轉化現象。BMP-Smad、Wnt-beta-catenin和LIF -STAT3信號通路被認為是胚胎干細胞保持自我更新和向特定細胞定向分化過程中的中樞調控因子。TGFβ/BMP-Smad信號通路是干細胞定向分化成肌腱（韌帶）細胞的前提，是必要條件，但不是充分條件。微小RNA（miRNA）和TGFβ/BMP-Smad信號通路可以聯合作用，組合成不同的密碼來裁定細胞的命運和表型。 結論 miRNAs和TGFβ/BMP-Smad信號通路可能是決定干細胞向肌腱細胞，或軟骨細胞，或肌腱和軟骨細胞混合成分哪一個方向分化的關鍵調控因素。通過對比分析干細胞在上述3種分化途徑中基因表達調控、蛋白結構和功能的差異，可能幫助我們尋找到決定肌腱細胞與軟骨細胞互相轉化分化的關鍵miRNAs，肌腱細胞定向分化的關鍵調控基因，以及揭開精確調控細胞分化方向的關鍵機制和調控網絡。
【摘要】 微小RNA（microRNA，miRNA）是近年來發(fā)現的一類長度為18~26個核苷酸的非編碼小分子RNA。它主要通過與靶標基因3’-UTR的完全或不完全配對，降解靶標基因mRNA或抑制其翻譯，從而參與調控生命活動，影響腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。目前研究發(fā)現，大量miRNA的表達變化與前列腺癌的發(fā)生發(fā)展相關，了解這些miRNA的表達規(guī)律和作用機制對深入探討前列腺癌的發(fā)病機制、研究新的診斷和治療手段意義重大。綜述主要介紹近年來miRNA與前列腺癌發(fā)生的關系及對其診治的研究進展。