目的評(píng)價(jià)整合素在腫瘤血管生成中的作用。方法復(fù)習(xí)國(guó)內(nèi)、外文獻(xiàn)，并作綜述報(bào)道。結(jié)果整合素在腫瘤血管生成中起重要作用，且與血管生長(zhǎng)因子VEGF、bFGF、TGFβ等有密切關(guān)系。結(jié)論整合素抑制劑將是一個(gè)有效的抗腫瘤方法。
目的 觀察血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子（VEGF）及β3整合素在肉芽組織血管生成中表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化。方法 RT-PCR法及免疫組織化學(xué)法觀察人正常皮下組織、增殖期肉芽組織（傷后7~12天）和成熟期肉芽組織（傷后30~35天）VEGF及β3整合素mRNA及蛋白的表達(dá)。 結(jié)果 VEGF及β3整合素在正常皮下組織表達(dá)很低，在增殖期肉芽組織中表達(dá)明顯升高，而肉芽組織成熟后其表達(dá)又降低。結(jié)論 VEGF及β3整合素是血管生成過(guò)程中重要的調(diào)節(jié)因子。
目的對(duì)離體培養(yǎng)血管施加不同水平切應(yīng)力，觀察不同時(shí)間點(diǎn)整合素 αVβ3（αVβ3-Integrin）的表達(dá)水平。方法（1）建立血管體外應(yīng)力培養(yǎng)系統(tǒng)，檢測(cè)不同切應(yīng)力時(shí)流場(chǎng)的穩(wěn)定性；（2）將家兔 50只按完全隨機(jī)分組方式分為兩組（ n=25）：低切應(yīng)力組（ 5 dyn/cm2）和正常切應(yīng)力組（ 20 dyn/cm2）, 每組再完全隨機(jī)等分為 2 h、 4 h、8 h、16 h 和 24 h共 5個(gè)時(shí)間點(diǎn)（ n=5），取兔降主動(dòng)脈并將其置于應(yīng)力培養(yǎng)系統(tǒng)進(jìn)行離體培養(yǎng)，采取免疫組織化學(xué)染色法觀察兩組 5個(gè)不同時(shí)間點(diǎn)的整合素 αVβ3表達(dá)部位及強(qiáng)度。結(jié)果建立的體外血管應(yīng)力培養(yǎng)系統(tǒng)運(yùn)行穩(wěn)定，能夠提供實(shí)驗(yàn)所需的各種切應(yīng)力。低切應(yīng)力組的整合素 αVβ3在 5個(gè)時(shí)間點(diǎn)都有較高程度的表達(dá)，并在 16 h時(shí)達(dá)到高峰，其平均光密度值 [MOD= （1.995±0.194）×10-2]明顯增高（ P＜ 0.05）；正常切應(yīng)力組隨時(shí)間的增加逐漸減少， 2 h [（0.059±0.005）×10-2]、4 h [（0.049±0.002）×10-2]時(shí)分別與其他時(shí)間點(diǎn)相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（ P＜ 0.05）。低切應(yīng)力組的整合素 αVβ3 MOD值與正常切應(yīng)力組相同時(shí)間點(diǎn)比較明顯增（ P=0.000）。結(jié)論低切應(yīng)力可引起 αVβ3明顯表達(dá)，而正常切應(yīng)力抑制 αVβ3的表達(dá)。
摘要： 目的 觀察整合素相連激酶（ILK）和基質(zhì)金屬蛋白酶9（MMP-9）在人非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）中的表達(dá)，初步探討其與NSCLC預(yù)后的關(guān)系。 方法 選取2002年1月至2004年1月于南京醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院手術(shù)切除的75例NSCLC患者標(biāo)本，采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)NSCLC組織中ILK和MMP-9的表達(dá)水平，根據(jù)所得積分光密度（IOD）的中位數(shù)將75例患者分為ILK高表達(dá)組和低表達(dá)組，MMP-9高表達(dá)組和低表達(dá)組。采用Log-rank檢驗(yàn)比較各臨床病理特征及ILK、MMP-9表達(dá)對(duì)生存的影響，并對(duì)ILK和MMP9的表達(dá)進(jìn)行相關(guān)性分析。 結(jié)果 ILK和MMP9在NSCLC組織中均有表達(dá)，相關(guān)性分析顯示：在本組75例患者中，ILK與MMP9的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.79，Plt;0.05）。術(shù)后隨訪(fǎng)75例，隨訪(fǎng)至2009年1月31日時(shí)，中位生存時(shí)間30個(gè)月。ILK與MMP9低表達(dá)組患者生存時(shí)間顯著高于ILK和MMP9高表達(dá)組（χ2=15.067，14.031，Plt;0.05）；患者性別、年齡、吸煙史和病理類(lèi)型對(duì)其生存期影響差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ20.450,0.078,1.460,1.623,Pgt;0.05）；而腫瘤直徑、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、TNM分期ILK及MMP9表達(dá)對(duì)患者生存期影響差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ23.936, 15.169, 20.529, 15.067,14.301,Plt;0.05）。 結(jié)論 ILK和MMP-9的表達(dá)水平影響NSCLC患者的預(yù)后，MMP9可能通過(guò)ILK途徑促進(jìn)腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移。因此，ILK和MMP9的表達(dá)檢測(cè)對(duì)評(píng)估NSCLC患者預(yù)后可能具有重要作用。
目的 探討環(huán)狀精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-D-脯氨酸-賴(lài)氨酸短肽（Cyclo-RGDfK）能否提高去細(xì)胞瓣對(duì)肌成纖維細(xì)胞（myofibroblast）的黏附性能，以及RGD肽對(duì)Integrin αVβ3基因表達(dá)的調(diào)控。 方法 組織塊培養(yǎng)法獲取大鼠主動(dòng)脈壁肌成纖維細(xì)胞（myofibroblast），免疫熒光染色檢測(cè)波形蛋白(Vimentin)和α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)分子在培養(yǎng)myofibroblast中的表達(dá)。將去細(xì)胞瓣隨機(jī)分為3組（每組7個(gè)），A組：去細(xì)胞瓣未接受任何處理；B組：去細(xì)胞瓣與交聯(lián)劑1-乙基-3-(二甲基氨基丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽（EDC）反應(yīng)36h；實(shí)驗(yàn)組：去細(xì)胞瓣與EDC反應(yīng)36h后，再與Cyclo-RGDfK反應(yīng)24h，使RGD肽共價(jià)結(jié)合于去細(xì)胞瓣。將第5代myofibroblast分別接種至各組瓣膜上。HE染色和掃描電子顯微鏡觀察細(xì)胞黏附增殖狀況，半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)Integrin αVβ3基因在各組的表達(dá)。 結(jié)果 免疫熒光染色顯示原代培養(yǎng)的myofibroblast生長(zhǎng)良好，高表達(dá)Vimentin和αSMA分子。HE染色和掃描電子顯微鏡顯示myofibroblast在實(shí)驗(yàn)組的生長(zhǎng)好于A組和B組，半定量PCR示Integrin αVβ3 mRNA在實(shí)驗(yàn)組的表達(dá)高于A組和B組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05)，而A組與B組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P=0.900)。 結(jié)論 Cyclo-RGDfK促進(jìn)myofibroblast在去細(xì)胞瓣上黏附，此效應(yīng)可能與RGD肽上調(diào)Integrin αVβ3基因表達(dá)有關(guān)。
目的 分析整合素在神經(jīng)系統(tǒng)損傷及其修復(fù)過(guò)程中的作用和可能機(jī)制。 方法 查閱近年有關(guān)整合素在神經(jīng)系統(tǒng)損傷及其修復(fù)中作用的相關(guān)文獻(xiàn)，并作進(jìn)一步綜合分析。 結(jié)果 整合素及相關(guān)信號(hào)通路參與了神經(jīng)系統(tǒng)損傷，尤其是缺氧缺血性神經(jīng)系統(tǒng)損傷及其修復(fù)過(guò)程。 結(jié)論 通過(guò)干預(yù)整合素相關(guān)信號(hào)對(duì)于治療神經(jīng)系統(tǒng)損傷，尤其是缺氧缺血性神經(jīng)系統(tǒng)損傷具有良好的應(yīng)用價(jià)值和發(fā)展前景。
目的 表皮干細(xì)胞（epidermal stem cells，ESCs）能主動(dòng)參與創(chuàng)面修復(fù)，促進(jìn)創(chuàng)面再上皮化。建立糖尿?。╠iabetes mellitus，DM）大鼠模型，觀察DM 大鼠皮膚中ESCs 增殖分化相關(guān)蛋白——角蛋白19（keratin19，K19）、β1整合素（β1-integrin）、β- 連環(huán)素（β-catenin）及增殖細(xì)胞核抗原（proliferating cell nuclear antigen，PCNA）的表達(dá)，探討DM大鼠皮膚創(chuàng)面難愈合的潛在機(jī)制。 方法 20 只雄性SD 大鼠，體重250 ～ 300 g，隨機(jī)分為DM 組和正常對(duì)照組，每組10 只。DM 組大鼠一次性腹腔注射鏈脲佐菌素（streptozocin，STZ，65 mg/kg）制備DM 大鼠模型，正常對(duì)照組不作處理。給藥后4 周取兩組大鼠胰腺組織，HE 染色觀察胰島組織學(xué)變化。取兩組動(dòng)物背部全層皮膚，分離培養(yǎng)ESCs，取第2 代ESCs 行免疫細(xì)胞化學(xué)染色鑒定K19、β1-integrin、β-catenin 和PCNA 陽(yáng)性表達(dá)，流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期，細(xì)胞接種1 周后檢測(cè)兩組細(xì)胞克隆形成率。 結(jié)果 DM 大鼠造模成功率為90%。DM 組胰腺HE 染色可見(jiàn)胰島細(xì)胞數(shù)明顯減少，出現(xiàn)變性壞死；正常對(duì)照組胰島細(xì)胞結(jié)構(gòu)清楚，無(wú)變性壞死。DM 組大鼠ESCs 的K19、β1-integrin、β-catenin 及PCNA 陽(yáng)性表達(dá)分別為82.63 ± 14.77、21.59 ± 4.71、76.49 ± 6.58、90.77 ± 12.44，均低于正常對(duì)照組的151.24 ± 42.83、54.48 ± 17.43、116.39 ± 9.26、110.62 ± 20.67，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01）。DM 組ESCs 克隆形成率為6.43% ± 1.01%，明顯低于正常對(duì)照組的11.37% ± 1.62%，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01）。流式細(xì)胞儀分析顯示DM 組88.89% 細(xì)胞處于G0/G1 期，凋亡細(xì)胞數(shù)為3.98%；正常對(duì)照組91.50% 細(xì)胞處于G0/ G1 期，無(wú)凋亡細(xì)胞。 結(jié)論 通過(guò)腹腔一次性注射65 mg/kg STZ 可有效建立DM 大鼠模型。DM 大鼠ESCs 數(shù)量少、增殖分化能力低可能是DM 創(chuàng)面難愈合的重要機(jī)制之一。
目的 探索自體全層皮膚移植成活過(guò)程中表皮干細(xì)胞隨微環(huán)境的改變而變化的規(guī)律，為表皮干細(xì)胞的臨床應(yīng)用提供理論依據(jù)。方法Wistar大鼠42只，于背部制作1.5 cm×1.5 cm自體全層皮膚原位移植模型。按取材時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)分成7組（G1～G7組）,每組6只，分別為術(shù)后第1、3、5、7、14、21和30天；各組術(shù)前取材作對(duì)照。在各時(shí)間點(diǎn)大體觀察移植皮片情況；于手術(shù)前、后各時(shí)間點(diǎn)切取皮片組織標(biāo)本，行HE染色和免疫組織化學(xué)染色，觀察組織學(xué)變化及整合素β1和基因物質(zhì)p63陽(yáng)性細(xì)胞變化。結(jié)果 術(shù)后第3天，G5、G6組各有1只動(dòng)物移植皮片周?chē)腥?，其他各組移植皮片均成活良好。G1~G4組細(xì)胞水腫，炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，纖維細(xì)胞逐漸增多，G5~G7組上皮化程度越來(lái)越高，纖維細(xì)胞含量越來(lái)越少。各組整合素β-1陽(yáng)性細(xì)胞率低于基因物質(zhì)p63，但隨觀察時(shí)間延長(zhǎng)變化規(guī)律相似。陽(yáng)性細(xì)胞在移植皮片中的排列結(jié)構(gòu)紊亂，分布到表皮各層，從G6組開(kāi)始逐漸集中于表皮的基底層和毛囊隆突部，但在表皮的其他各層仍然有陽(yáng)性細(xì)胞。G1組陽(yáng)性細(xì)胞率開(kāi)始逐漸減少，G2組達(dá)到最低，然后逐漸增加，G1～G3組手術(shù)前、后比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；G4組接近術(shù)前（P＞0.05）；G6組達(dá)到最高峰后逐漸降低，G5～G7組手術(shù)前、后比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論 表皮干細(xì)胞在自體全層皮片移植成活過(guò)程中，數(shù)量逐漸減少后增加,至超過(guò)正常，后又逐漸減少；在分布上開(kāi)始紊亂，幾乎分布表皮各層，后又趨向正常規(guī)律性變化。
目的探討體外篩選及鑒定人角朊干細(xì)胞(KSC)的方法. 方法利用KSC對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)的快速黏附性,選擇不同時(shí)間黏附的細(xì)胞分為5、20和60分鐘3組,并以不進(jìn)行篩選的細(xì)胞作對(duì)照組.體外培養(yǎng)擴(kuò)增后,以KSC的相對(duì)特異性標(biāo)識(shí)分子β1整合素、角蛋白19(Ck19)的單克隆抗體,免疫組織化學(xué)方法對(duì)各組細(xì)胞進(jìn)行鑒定,利用圖像分析系統(tǒng)測(cè)平均灰度值.并用流式細(xì)胞儀、透射電鏡對(duì)各組細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè). 結(jié)果各組細(xì)胞在10～14天均有克隆形成,組間比較5分鐘組細(xì)胞生長(zhǎng)較慢,但形成克隆較大,細(xì)胞體積較小.免疫組織化學(xué)β1整合素、Ck19在各組都有表達(dá),各組平均灰度值統(tǒng)計(jì)學(xué)分析顯示,β1整合素在5分鐘組的表達(dá)與另3組間有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05),Ck19的表達(dá)在5分鐘組與20分鐘組間無(wú)差異(Pgt;0.05),60分鐘組與對(duì)照組間差異不顯著,而前兩組與后兩組之間比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Plt;0.05).流式細(xì)胞儀檢測(cè)提示5分鐘組細(xì)胞大部分處于G1期,與其它3組有區(qū)別.透射電鏡顯示5分鐘組細(xì)胞體小,核漿比大,細(xì)胞器不成熟. 結(jié)論利用細(xì)胞外基質(zhì)篩選的5分鐘組細(xì)胞處于幼稚狀態(tài),并有強(qiáng)克隆形成能力,符合預(yù)期的KSC特點(diǎn),可利用KSC對(duì)細(xì)胞外基質(zhì)的快速黏附性對(duì)其純化篩選,同時(shí)利用β1整合素、Ck19的單抗加以鑒定.