目的：研究轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1（TGF-β1）促進(jìn)Tenon囊成纖維細(xì)胞的增殖作用及核心蛋白多糖（decorin）對(duì)TGF-β1促Tenon囊成纖維細(xì)胞增殖的影響。方法：（1）取青光眼患者的Tenon囊組織，采用組織塊貼壁培養(yǎng)法進(jìn)行原代培養(yǎng)細(xì)胞培養(yǎng)，細(xì)胞經(jīng)過冷凍與復(fù)蘇后，觀察細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與生物學(xué)特性。（2）用不同濃度(0.01、0.1、1、5、10ng/mL)TGF-β1作用于Tenon囊成纖維細(xì)胞48 h。（3）終濃度為5 ng/mL的TGF-β1 和不同濃度(0.01、0.1、1、2、5μg/mL)的decorin共同作用于Tenon囊成纖維細(xì)胞48h。MTT比色法檢測(cè)Tenon囊成纖維細(xì)胞增殖。結(jié)果：（1）體外成功培養(yǎng)Tenon囊成纖維細(xì)胞，細(xì)胞生長(zhǎng)活躍，形狀穩(wěn)定，細(xì)胞經(jīng)過冷凍與復(fù)蘇后，仍能保持其原來的細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)與穩(wěn)定的生物學(xué)特性。（2）1～10ng/mL TGF-β1能促進(jìn)Tenon囊成纖維細(xì)胞的增殖，并與濃度成正比。（3）2～5μg/mL decorin 能抑制TGF-β1促Tenon囊成纖維細(xì)胞增殖作用，其抑制作用與濃度成正比。結(jié)論： TGF-β1可刺激Tenon囊成纖維細(xì)胞增殖，Decorin能抑制TGF-β1促進(jìn)細(xì)胞增殖的作用，其機(jī)理可能通過與TGF-β1結(jié)合抑制青光眼濾過手術(shù)后瘢痕形成。
目的 探討syndecan-1蛋白在肝細(xì)胞肝癌的表達(dá)及與臨床病理參數(shù)的關(guān)系方法 采用免疫組化ABC法檢測(cè)syndecan-1在肝細(xì)胞肝癌中的表達(dá)。結(jié)果 發(fā)現(xiàn)在47例肝癌組織中syndecan-1陰性表達(dá)28例，其分化不良的肝癌syndecan-1陰性表達(dá)率高于分化較好者（分別為78.3%，41.7%，兩者相比Ｐ＜0.05）； 直徑＞5cm的肝癌syndecan-1陰性表達(dá)率高于直徑≤5cm肝癌（分別為81.0%，42.3%，兩者相比Ｐ＜0.01）； 大體或鏡下有癌栓者syndecan-1陰性表達(dá)率高于無癌栓的肝癌（分別為84.2%，42.9%，兩者相比Ｐ＜0.01）。syndecan-1的陰性表達(dá)與患者血清甲胎蛋白水平及Child分級(jí)均無明顯的相關(guān)性（Ｐ＞0.05）。結(jié)論 syndecan -1的低表達(dá)與肝癌增大、分化程度低、侵襲轉(zhuǎn)移發(fā)生等惡性表型相關(guān)，可能對(duì)這些表型起負(fù)調(diào)節(jié)作用，可視為抑癌基因。
目的 應(yīng)用重組腺相關(guān)病毒2（recombinant adeno-associated virus 2，rAAV2）介導(dǎo)hTGF-β1 基因體內(nèi)轉(zhuǎn)染兔退變椎間盤髓核細(xì)胞，觀察基因產(chǎn)物的表達(dá)及其對(duì)退變髓核細(xì)胞蛋白多糖合成的生物調(diào)節(jié)作用。 方法 于24 只成年新西蘭大白兔，雌雄不限，體重1.7 ～ 2.2 kg，L1、2、L2、3、L3、4、L4、5 椎間盤注射25 μL 濃度為1 mmol/L 的纖維結(jié)合素片段（fibronectin fragment，F(xiàn)n-f）制備椎間盤退變模型，注射Fn-f 4 周時(shí)的造模椎間盤模擬早期退變的椎間盤。將24 只兔隨機(jī)分為3 組（n=8），A、B、C 組分別于造模椎間盤髓核內(nèi)注射25 μL rAAV2-hTGF-β1（1 × 1012 vg/mL）、rAAV2- 增強(qiáng)綠色熒光蛋白（enhanced green fluorescent protein，EGFP，rAAV2-EGFP）、PBS。術(shù)后1 周A、C 組各處死2 只兔，取髓核組織采用免疫組織化學(xué)染色觀察hTGF-β1 的表達(dá)；術(shù)后4、8、12 周每組取2 只兔髓核組織，35S 整合分析法檢測(cè)新合成蛋白多糖的含量；術(shù)后12 周處死B 組2 只兔，熒光顯微鏡觀察髓核組織中EGFP 的表達(dá)。 結(jié)果 術(shù)后1 周，免疫組織化學(xué)染色示A 組髓核細(xì)胞及基質(zhì)中廣泛存在強(qiáng)陽(yáng)性染色顆粒，C 組僅存在少量陽(yáng)性顆粒。35S 整合法檢測(cè)示，各時(shí)間點(diǎn)A 組35S 蛋白多糖合成率均高于B、C 組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05） ；B、C 組間比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。術(shù)后12周， 熒光顯微鏡下觀察B 組盤髓核組織可見大量綠色熒光表達(dá)。 結(jié)論 新型基因轉(zhuǎn)導(dǎo)載體rAAV2 可有效介導(dǎo)hTGF-β1基因體內(nèi)轉(zhuǎn)染兔退變髓核細(xì)胞，基因產(chǎn)物可持續(xù)表達(dá)超過12 周，hTGF-β1 可有效促進(jìn)退變髓核細(xì)胞蛋白多糖的合成。
目的 探討硫酸軟骨素酶ABC（chondroitinase ABC，ChABC）對(duì)大鼠脊髓損傷（spinal cord injury，SCI）后生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43（growth associated protein 43，GAP-43）和神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）表達(dá)的影響。 方法 取成年雌性SD 大鼠150 只，體重250 ～ 300 g，隨機(jī)分為ChABC 治療組（A 組）、生理鹽水治療組（B 組）和假手術(shù)組（C 組），每組50 只。A、B 組制作大鼠脊髓橫斷損傷模型，分別于SCI 區(qū)通過蛛網(wǎng)膜下腔注射6 μL ChABC（1 U/mL）和等量生理鹽水治療；C 組不切斷脊髓及不治療作為空白對(duì)照。于術(shù)后1、3、7、14、21 d 采用BBB 評(píng)分法觀察大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能情況，用免疫熒光染色法檢測(cè)各組GAP-43 和GFAP 陽(yáng)性表達(dá)并計(jì)數(shù)陽(yáng)性表達(dá)神經(jīng)元數(shù)量。 結(jié)果 術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)A、B 組BBB 評(píng)分均明顯小于C 組（P lt; 0.05）。術(shù)后1、3、7 d，A、B 組間BBB 評(píng)分差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）；術(shù)后14、21 d，A 組BBB 評(píng)分明顯高于B 組（P lt; 0.01）。免疫熒光染色示，術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)A、B組GAP-43 和GAFP 陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)均明顯多于C 組（P lt; 0.05）。術(shù)后14、21 d，A 組GAP-43 陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)明顯多于B 組（P lt; 0.01）；1、3、7 d 時(shí)兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。術(shù)后7、14、21 d，A 組GFAP 陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)明顯少于B 組（P lt; 0.01）；術(shù)后1、3 d 時(shí)兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。 結(jié)論 ChABC 能夠降解膠質(zhì)瘢痕，改善大鼠SCI 區(qū)域的微環(huán)境，使GAP-43 表達(dá)增強(qiáng)，促進(jìn)神經(jīng)軸突的生長(zhǎng)與延伸。
目的 探討硫酸軟骨素酶ABC（chondroitinase ABC，ChABC）對(duì)大鼠脊髓損傷（spinal cord injury，SCI）后生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43（growth associated protein 43，GAP-43）和神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）表達(dá)的影響。 方法 取成年雌性SD 大鼠150 只，體重250 ～ 300 g，隨機(jī)分為ChABC 治療組（A 組）、生理鹽水治療組（B 組）和假手術(shù)組（C 組），每組50 只。A、B 組制作大鼠脊髓橫斷損傷模型，分別于SCI 區(qū)通過蛛網(wǎng)膜下腔注射6 μL ChABC（1 U/mL）和等量生理鹽水治療；C 組不切斷脊髓及不治療作為空白對(duì)照。于術(shù)后1、3、7、14、21 d 采用BBB 評(píng)分法觀察大鼠后肢運(yùn)動(dòng)功能情況，用免疫熒光染色法檢測(cè)各組GAP-43 和GFAP 陽(yáng)性表達(dá)并計(jì)數(shù)陽(yáng)性表達(dá)神經(jīng)元數(shù)量。 結(jié)果 術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)A、B 組BBB 評(píng)分均明顯小于C 組（P lt; 0.05）。術(shù)后1、3、7 d，A、B 組間BBB 評(píng)分差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）；術(shù)后14、21 d，A 組BBB 評(píng)分明顯高于B 組（P lt; 0.01）。免疫熒光染色示，術(shù)后各時(shí)間點(diǎn)A、B組GAP-43 和GAFP 陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)均明顯多于C 組（P lt; 0.05）。術(shù)后14、21 d，A 組GAP-43 陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)明顯多于B 組（P lt; 0.01）；1、3、7 d 時(shí)兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。術(shù)后7、14、21 d，A 組GFAP 陽(yáng)性神經(jīng)元數(shù)明顯少于B 組（P lt; 0.01）；術(shù)后1、3 d 時(shí)兩組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P gt; 0.05）。 結(jié)論 ChABC 能夠降解膠質(zhì)瘢痕，改善大鼠SCI 區(qū)域的微環(huán)境，使GAP-43 表達(dá)增強(qiáng)，促進(jìn)神經(jīng)軸突的生長(zhǎng)與延伸。
目的 分析大鼠亞急性脊髓損傷（spinal cord injury，SCI）后聯(lián)合應(yīng)用嗅鞘細(xì)胞（olfactory ensheathing cells，OECs）和硫酸軟骨素酶ABC（chondroitinase ABC，ChABC）移植的可行性，并探討其相互作用。 方法 取健康成年SD 大鼠3 只，分離嗅球培養(yǎng)OECs，原代培養(yǎng)8 ～ 9 d 后調(diào)整細(xì)胞濃度為1 × 105 個(gè)/μL 備用。另取健康成年SD大鼠54 只制備SCI 動(dòng)物模型，并隨機(jī)分為4 組；A 組（n=36）為對(duì)照組，不作處理，B、C、D 組（n=6）分別于損傷區(qū)注射OECs、ChABC 和ChABC/OECs。采用BBB 評(píng)分法評(píng)價(jià)傷后1、2、3、7、14 d 各組大鼠雙后肢運(yùn)動(dòng)功能。A 組分別于傷后即刻，1、2、3、7、14 d 取材（n=6），B、C、D 組于傷后14 d 取材行HE 染色并計(jì)算損傷區(qū)最大橫徑和壞死總面積；行膠質(zhì)細(xì)胞酸性蛋白（glial fibrillary acidic protein，GFAP）/CS56、GFAP/ 生長(zhǎng)相關(guān)蛋白43（growth associated protein 43，GAP-43）和GFAP/ 神經(jīng)絲蛋白160（neurofilament 160，NF160）免疫熒光染色，評(píng)價(jià)神經(jīng)纖維束再生情況。 結(jié)果 各組各時(shí)間點(diǎn)BBB 評(píng)分結(jié)果示，A 組與B、C、D 組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.05），B、C 組與D 組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt;0.05）。HE 染色示，傷后14 d 時(shí)各組均有空洞形成，傷后B、C、D 組損傷區(qū)最大橫徑和壞死總面積與A 組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01），B、C 組與D 組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P lt; 0.01）。免疫組織化學(xué)染色示，A 組GFAP 反應(yīng)最強(qiáng)，損傷區(qū)空洞明顯可見，范圍大于其他3 組；D 組介于B、C 組之間；B、C、D 組的GAP-43 表達(dá)增多，且以D 組為著；D 組損傷區(qū)內(nèi)的NF 通過明顯多于其他3 組。 結(jié)論 ChABC 聯(lián)合OECs 移植對(duì)亞急性SCI 有較好的療效。
目的 綜述降鈣素（calcitonin，CT）對(duì)骨性關(guān)節(jié)炎關(guān)節(jié)軟骨、軟骨下骨的作用。 方法 廣泛查閱近年來有關(guān)CT 對(duì)骨性關(guān)節(jié)炎作用的國(guó)內(nèi)外文獻(xiàn)，并進(jìn)行總結(jié)與分析。 結(jié)果 CT 能促進(jìn)軟骨蛋白多糖、Ⅱ型膠原等重要軟骨基質(zhì)的合成，并能促進(jìn)軟骨及軟骨下骨再生。 結(jié)論 CT 通過促進(jìn)軟骨合成及抑制軟骨降解發(fā)揮保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨的作用。
目的通過慢病毒介導(dǎo)環(huán)氧合酶2（cyclooxygenase 2, COX-2）-siRNA、聚蛋白多糖酶1（Aggrecanase-1）-siRNA、IGF-1基因聯(lián)合轉(zhuǎn)染BMSCs，將其注射至食蟹猴骨關(guān)節(jié)炎（osteoarthritis, OA）模型關(guān)節(jié)腔，探討對(duì)OA相關(guān)炎性因子及關(guān)節(jié)軟骨的影響。 方法取髖關(guān)節(jié)OA患者自愿捐贈(zèng)骨髓組織，分離培養(yǎng)BMSCs。采用基因重組技術(shù)構(gòu)建COX-2-siRNA、Aggrecanase-1-siRNA和IGF-1過表達(dá)基因的慢病毒載體，以最佳感染復(fù)數(shù)40轉(zhuǎn)染第3代BMSCs（病毒組），以空慢病毒轉(zhuǎn)染培養(yǎng)作為對(duì)照（空病毒組），以正常BMSCs作為正常對(duì)照組。倒置相差顯微鏡下觀察細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)，并行細(xì)胞計(jì)數(shù)；取轉(zhuǎn)染培養(yǎng)1周細(xì)胞，RT-PCR檢測(cè)COX-2、Aggrecanase-1及IGF-1 mRNA的表達(dá)。取健康3歲食蟹猴9只，按照Hulth造模法于右膝制備OA模型后，隨機(jī)分為3組（n=3）。模型制備術(shù)后6周，病毒組及空病毒組右膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)分別注射對(duì)應(yīng)的1 mL BMSCs（約1×107個(gè)），空白對(duì)照組注射1 mL生理鹽水。以左膝作為正常對(duì)照組。注射后觀察動(dòng)物一般情況；1、4、6周取雙膝關(guān)節(jié)液，ELISA檢測(cè)前列腺素E2（prostaglandin E2, PGE2）、IL-1、Aggrecanase-1、IGF-1濃度；6周時(shí)MRI及大體觀察檢查膝關(guān)節(jié)軟骨改變，并取材行組織學(xué)、免疫組織化學(xué)染色觀察，以及RT-PCR檢測(cè)COX-2、Aggrecanase-1及IGF-1 mRNA表達(dá)。 結(jié)果轉(zhuǎn)染后兩組細(xì)胞形態(tài)及生長(zhǎng)曲線無明顯差異。RT-RCR檢測(cè)，與空病毒組、正常對(duì)照組比較，病毒組COX-2、Aggrecanase-1表達(dá)明顯降低，IGF-1表達(dá)明顯增加（P＜0.05）。細(xì)胞注射后各組動(dòng)物均存活至實(shí)驗(yàn)完成。注射后1、4、6周，病毒組PGE2、Aggrecanase-1、IL-1濃度明顯低于空病毒組、空白對(duì)照組，但I(xiàn)GF-1濃度明顯增高（P＜0.05）；但3組以上指標(biāo)濃度均顯著高于正常對(duì)照組（P＜0.05）。MRI檢查示，與正常對(duì)照組比較，病毒組、空病毒組及空白對(duì)照組關(guān)節(jié)面均出現(xiàn)異常高密度影，但病毒組區(qū)域最小。大體觀察及組織學(xué)觀察見，病毒組、空病毒組及空白對(duì)照組關(guān)節(jié)軟骨符合早期OA改變，但病毒組修復(fù)程度優(yōu)于空病毒組及空白對(duì)照組，根據(jù)改良Pineda評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)的組織學(xué)評(píng)分亦較低，比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。免疫組織化學(xué)染色示，病毒組細(xì)胞質(zhì)染色較空病毒組及空白對(duì)照組深，偶爾可見棕黃色顆粒，軟骨細(xì)胞較多。RT-PCR檢測(cè)，與空病毒和空白對(duì)照組相比，病毒組COX-2、Aggrecanase-1 mRNA表達(dá)明顯降低，IGF-1 mRNA表達(dá)明顯增高（P＜0.05）。 結(jié)論慢病毒介導(dǎo)的多基因轉(zhuǎn)染BMSCs可以有效抑制食蟹猴早期OA模型膝關(guān)節(jié)腔內(nèi)COX-2和Aggrecanse-1的表達(dá)，增強(qiáng)IGF-1的表達(dá)，降低膝關(guān)節(jié)內(nèi)炎性因子濃度，有效保護(hù)關(guān)節(jié)軟骨。
目的探討磷脂酰肌醇蛋白多糖-3（GPC3）對(duì)Hippo信號(hào)通路的調(diào)控機(jī)制及其對(duì)人肝癌Huh7細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。 方法分別構(gòu)建4種靶向GPC3和YAP1基因的shRNA序列，然后轉(zhuǎn)染入肝癌Huh7細(xì)胞，并篩選穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株。采用熒光定量PCR法和蛋白印跡法檢測(cè)轉(zhuǎn)染后的Huh7細(xì)胞中GPC3和YAP1的表達(dá)，以篩選有效沉默GPC3和YAP1的shRNA。觀察沉默GPC3和YAP1以及人重組YAP1（rhYAP1）對(duì)肝癌細(xì)胞增殖、侵襲和凋亡的影響。GPC3 shRNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)分為6組：未轉(zhuǎn)染組、空載體組、GPC3-714-shRNA組、GPC3-647-shRNA組、GPC3-1718-shRNA組、GPC3-2134-shRNA組。YAP1 shRNA轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)分為6組：未轉(zhuǎn)染組、空載體組、YAP1-906-shRNA組、YAP1-1363-shRNA組、YAP1-1666-shRNA組、YAP1-2895-shRNA組。GPC3對(duì)YAP1的調(diào)控實(shí)驗(yàn)分為5組：未轉(zhuǎn)染組、空載體組、GPC3-1718-shRNA組、GPC3-1718-shRNA+rhYAP1組、YAP1-1666-shRNA組。 結(jié)果①成功構(gòu)建了可有效沉默GPC3和YAP1表達(dá)的GPC3-1718-shRNA和YAP1-1666-shRNA質(zhì)粒。② GPC3 shRNA各轉(zhuǎn)染組細(xì)胞中GPC3 mRNA和蛋白表達(dá)均明顯低于未轉(zhuǎn)染組（P＜0.05）和空載體組（P＜0.05），而GPC3-1718-shRNA組又明顯低于其他轉(zhuǎn)染組（P＜0.05）。YAP1 shRNA各轉(zhuǎn)染組細(xì)胞中YAP1 mRNA和蛋白表達(dá)均明顯低于未轉(zhuǎn)染組（P＜0.05）和空載體組（P＜0.05），而YAP1-1666-shRNA組又明顯低于其他轉(zhuǎn)染組（P＜0.05）。③ GPC3-1718-shRNA組和YAP1-1666-shRNA組細(xì)胞中YAP1 mRNA和蛋白表達(dá)均明顯低于未轉(zhuǎn)染組（P＜0.05）和空載體組（P＜0.05）；而GPC3-1718-shRNA+rhYAP1組細(xì)胞中YAP1 mRNA和蛋白表達(dá)明顯高于GPC3-1718-shRNA組（P＜0.05）和YAP1-1666-shRNA組（P＜0.05）。④與未轉(zhuǎn)染組和空載體組比較，GPC3-1718-shRNA組和YAP1-1666-shRNA組的細(xì)胞增殖和侵襲能力明顯降低（P＜0.05），細(xì)胞凋亡明顯增加（P＜0.05）；而GPC3-1718-shRNA+rhYAP1組細(xì)胞增殖、侵襲和凋亡均得到明顯改善（P＜0.05）。 結(jié)論GPC3很有可能通過對(duì)Hippo信號(hào)通路YAP1的調(diào)控，實(shí)現(xiàn)其對(duì)人肝癌細(xì)胞Huh7生物學(xué)行為的影響。
目的 探討成軟骨相關(guān) miR-4287 對(duì)人軟骨細(xì)胞聚蛋白多糖酶-1（a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motif 4，ADAMTS4）調(diào)控作用及其機(jī)制。 方法 取自愿捐贈(zèng)的膝關(guān)節(jié)正常及骨關(guān)節(jié)炎軟骨組織，采用實(shí)時(shí)熒光定量 PCR 檢測(cè) miR-4287 和 ADAMTS4 mRNA 表達(dá)量；然后分離培養(yǎng)軟骨細(xì)胞，取第 1 代骨關(guān)節(jié)炎細(xì)胞，給予 IL-1β 處理，觀察其對(duì)軟骨細(xì)胞 miR-4287 和 ADAMTS4 mRNA 表達(dá)的影響；分別給予 MAPK 信號(hào)通路抑制劑 SP600125 以及 NF-κB 信號(hào)通路抑制劑 SN50 預(yù)處理后聯(lián)合 IL-1β 刺激，觀察 IL-1β 介導(dǎo)的信號(hào)通路對(duì)軟骨細(xì)胞 miR-4287 和 ADAMTS4 mRNA 表達(dá)的影響；分別轉(zhuǎn)染 miR-4287 模擬物及其陰性對(duì)照、miR-4287 抑制物及其陰性對(duì)照，觀察 miR-4287 調(diào)控軟骨細(xì)胞 ADAMTS4 mRNA 及蛋白的表達(dá)。熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證 miR-4287 與 ADAMTS4 mRNA 3’非翻譯區(qū)（untranslated region，UTR）的直接結(jié)合效應(yīng)。 結(jié)果 與正常軟骨組織比較，骨關(guān)節(jié)炎軟骨組織 miR-4287 相對(duì)表達(dá)量下降，ADAMTS4 mRNA 相對(duì)表達(dá)量上升，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。IL-1β 下調(diào)軟骨細(xì)胞 miR-4287 表達(dá)、上調(diào) ADAMTS4 mRNA 表達(dá)，與未經(jīng) IL-1β 處理的軟骨細(xì)胞相比差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。經(jīng) IL-1β 介導(dǎo)的信號(hào)通路抑制劑預(yù)處理后，軟骨細(xì)胞 miR-4287 相對(duì)表達(dá)量上升，ADAMTS4 mRNA 相對(duì)表達(dá)量降低，與未經(jīng)信號(hào)通路抑制劑預(yù)處理細(xì)胞相比，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）。轉(zhuǎn)染 miR-4287 模擬物后，軟骨細(xì)胞內(nèi) ADAMTS4 mRNA 及蛋白表達(dá)均降低（P<0.05）；而轉(zhuǎn)染 miR-4287 抑制物后，軟骨細(xì)胞內(nèi) ADAMTS4 mRNA 及蛋白表達(dá)均升高（P<0.05）。無論結(jié)合位點(diǎn)為野生型或突變型，過表達(dá) miR-4287 均不能改變報(bào)告載體的熒光素酶活性（P>0.05）。 結(jié)論 成軟骨相關(guān) miR-4287 可能是一種與軟骨退變相關(guān)的 miRNA。miR-4287 能調(diào)控人軟骨細(xì)胞 ADAMTS4 表達(dá)，但不是通過靶向結(jié)合 mRNA 3’UTR 的方式發(fā)揮作用，其具體機(jī)制有待進(jìn)一步研究。