目的 綜述京尼平作為交聯(lián)劑在天然生物材料改性中的應用及研究進展。 方法 查閱近年關于京尼平作為交聯(lián)劑在天然生物材料改性中應用的相關文獻，進行分析總結。 結果 天然交聯(lián)劑京尼平交聯(lián)效率高，細胞毒性顯著低于傳統(tǒng)人工合成的化學交聯(lián)劑，交聯(lián)后的生物制品穩(wěn)定性強，抗酶解效果顯著提高。 結論 京尼平有望替代人工合成的傳統(tǒng)化學交聯(lián)劑，為組織工程中天然生物材料的交聯(lián)改性提供更好的選擇。
目的 研究NGF 對人真皮成纖維細胞增殖、細胞周期、膠原合成和遷移的影響，探討NGF 在創(chuàng)傷修復中的作用。 方法 采用酶消化法體外分離培養(yǎng)人真皮成纖維細胞，取第3 代細胞進行實驗。分別加入0、25、50、100、200、400 ng/mL NGF，培養(yǎng)48 h 采用MTT 法檢測細胞增殖；加入0、100 ng/mL NGF，培養(yǎng)48 h 采用流式細胞儀分析細胞有絲分裂周期，采用羥脯氨酸法檢測培養(yǎng)液膠原含量，實時熒光定量PCR 測定細胞Col Ⅰ、Col Ⅲ mRNA 表達水平；建立體外細胞劃痕創(chuàng)傷模型，加入0、50、100、200 ng/mL NGF，培養(yǎng)24 h 觀察細胞遷移。 結果 MTT 法檢測結果顯示，各濃度組間細胞增殖的吸光度值比較差異均無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05）。在0、100 ng/mL NGF 作用下，細胞周期顯示兩組的G0/ G1 期、S 期、G2/M 期細胞百分率差異均無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05），羥脯氨酸法測得兩組細胞培養(yǎng)液膠原含量和實時熒光定量PCR 測定細胞Col Ⅰ、Col Ⅲ mRNA 表達水平差異均無統(tǒng)計學意義（P gt; 0.05）。細胞遷移實驗結果顯示，培養(yǎng)24 h 后0、50、100、200 ng/mL NGF 濃度組細胞遷移率分別為52.12% ± 6.50%、80.67% ± 8.51%、66.33% ± 3.58% 和61.19% ± 0.97%，50、100 ng/mL NGF 可顯著促進細胞遷移（P lt; 0.05）。 結論 NGF 對人真皮成纖維細胞增殖、細胞周期及Col Ⅰ、Col Ⅲ mRNA 表達無影響，不能促進膠原合成，但能促進人真皮成纖維細胞遷移。
【摘 要】 目的 綜述細胞治療臨床應用的新進展。 方法 廣泛查閱近年有關細胞治療臨床應用研究的文獻并進行綜述。 結果 在細胞生物學尤其是干細胞生物學飛速發(fā)展的基礎上，細胞治療已開始應用于心血管系統(tǒng)疾病、神經系統(tǒng)疾病、肌肉骨骼相關疾病、糖尿病以及壓力性尿失禁等多種疾病的臨床試驗研究，并取得了令人振奮的初步研究成果，展示了廣闊的臨床應用前景。 結論 細胞治療為人類疾病治療提供了一種新的治療手段，具體作用機制還有待進一步研究。
目的 綜述杜興肌營養(yǎng)不良癥（Duchenne muscular dystrophy，DMD）治療的最新研究進展。 方法 廣泛查閱近年來相關文獻，對DMD治療的研究進展進行綜述。 結果 目前對DMD的治療主要有基因治療、細胞治療和藥理學治療，基因治療和細胞治療通過傳遞正?；蚧蛐拚蛔兓蛞约耙浦舱＜毎?，如干細胞來進行治療；而藥理學治療主要針對dystrophin基因缺陷引起的下游事件，運用各種藥物來減緩DMD病理進程，從而改善患者的生活質量，延長壽命。 結論 針對DMD的各種治療手段均存在一定困難，目前尚不能有效治療此病，還需要研究探索更有效的治療途徑。
目的 了解WO-1在體外環(huán)境中對人成骨細胞增殖、分化的影響，為骨組織工程學研究提供更多的方法。方法 采用培養(yǎng)人胚成骨細胞，以生長曲線和3 H-TdR法分析WO-1與成骨細胞生物學效應的量效關系，在最佳作用濃度下，以接種細胞克隆形成率，流式細胞技術分析細胞周期，透射電鏡觀察細胞形態(tài)學，了解WO-1對細胞活性和細胞增殖的影響；以ALP活性檢測，3 H-Proline摻入實驗，放射免疫法測骨鈣素合成及I型膠原和骨鈣素mRNA的表達等，從蛋白質和mRNA兩個水平觀察WO1對細胞功能的影響。結果 WO-1在高濃度時對人胚成骨細胞增殖有抑制作用，低濃度時對人胚成骨細胞增殖有促進作用，最佳作用濃度8 μg/ml，在0.25～8 μg/ml濃度范圍內存在量效關系。在8 μg/ml WO-1作用下，實驗組人胚成骨細胞接種克隆形成率增加，克隆體積增大；群體倍增時間明顯縮短，電鏡下見細胞器較對照組發(fā)達；而ALP活性、Ⅰ型膠原合成、骨鈣素合成等，在蛋白質及mRNA兩個水平均有增加，且與對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。結論 低濃度WO-1，可促進體外培養(yǎng)的人胚成骨細胞活性及增殖，加強細胞合成Ⅰ型膠原、骨鈣素等基質的功能，可用作成骨細胞增殖及分化的促進劑。
目的 研究組織工程骨體外構建過程中，成骨細胞與生物衍生骨相互作用的基因表達。方法用人胚骨膜來源的成骨細胞與生物衍生骨體外復合培養(yǎng)構建組織工程骨。培養(yǎng)2、4、6、8和10 d，分別提取總RNA，經逆轉錄成cDNA。用熒光及TaqMan探針行實時定量PCR，分別擴增成骨細胞特異轉錄因子（Cbfa1）、成骨細胞特異基因（Osterix）、Ⅰ型膠原、骨鈣素（osteocalcin，OC）和整合素α5和β1（Integrin α5 and β1），讀取擴增循環(huán)數(shù)（Ct值），進行統(tǒng)計學分析。以單純培養(yǎng)的成骨細胞作為對照組。 結果 Cbfa1與Osterix變化一致，其中實驗組Osterix在2 d和 8 d的表達均明顯高于對照組（P＜0.05)。Ⅰ型膠原與OC的表達變化一致，實驗組除10 d時，其余各時間段Ⅰ型膠原表達均明顯低于對照組（P＜0.01)。Intgerin的表達始終處于較高水平，在培養(yǎng)最初的2 d，實驗組Integrin β1表達明顯高于對照組（P＜0.01)。結論 成骨細胞與生物衍生材料復合后，重要基因可持續(xù)正常表達。作為支架材料，生物衍生骨在保持成骨細胞性狀、誘導及促進成骨細胞分化方面有明顯優(yōu)越性；它不僅對細胞順利進入增殖狀態(tài)無影響，而且為細胞增殖提供廣闊而有效的空間。成骨細胞最終可良好分化，充分發(fā)揮成骨功能，并有利于成骨細胞黏附，黏附行為貫穿細胞與材料相互作用的整個過程，而并非局限于開始階段。
目的 比較培養(yǎng)關節(jié)軟骨和半月板軟骨細胞的生物學特性，探討培養(yǎng)軟骨作為半月板移植替代物的可能性。方法 分別自3周齡大耳白兔關節(jié)軟骨和半月板分離軟骨細胞，行單層傳代培養(yǎng)和離心管培養(yǎng)。將離心管培養(yǎng)形成的軟骨和6周齡兔半月板行組織學和透射電鏡觀察，比較關節(jié)軟骨細胞和半月板纖維軟骨細胞的生長曲線。流式細胞術檢測第2、4代關節(jié)軟骨細胞和半月板纖維軟骨細胞周期。結果 第4代關節(jié)軟骨細胞呈去分化，似成纖維細胞。離心管關節(jié)軟骨細胞培養(yǎng)能形成軟骨，半月板纖維軟骨細胞不能形成軟骨。培養(yǎng)軟骨和半月板的組織學及超微結構差異顯著，培養(yǎng)軟骨中軟骨細胞5%呈現(xiàn)凋亡。第2、4代關節(jié)軟骨細胞中亞二倍體細胞比例明顯多于第2、4代半月板纖維軟骨細胞（Plt;0.05）。結論 半月板來源的軟骨細胞經離心管培養(yǎng)不能形成軟骨組織，關節(jié)軟骨細胞離心培養(yǎng)形成軟骨不能作為半月板的移植物，關節(jié)軟骨和半月板軟骨組織存在明顯的區(qū)別。
目的 探討離心管培養(yǎng)軟骨作為移植材料的可能性。方法 3周齡兔關節(jié)軟骨細胞經離心管培養(yǎng) 2周形成軟骨 ,另取 6周齡兔肱骨頭關節(jié)軟骨、脛骨近端生長板和半月板 ,并對 4種軟骨進行透射電鏡觀察 ,比較其軟骨細胞和細胞外基質結構。結果 離心管培養(yǎng)軟骨具有獨特的超微結構 ,與關節(jié)軟骨和生長板有一定的相似性 ,而與半月板有明顯區(qū)別。4種軟骨都形成了各自不同的細胞和細胞外基質特征 ,離心管培養(yǎng)軟骨呈現(xiàn)典型軟骨細胞凋亡 ,生長板表現(xiàn)“黑暗”軟骨細胞 ,關節(jié)軟骨和半月板未見細胞凋亡。結論 離心管培養(yǎng)軟骨具有獨特的超微結構 ,可作為關節(jié)軟骨和生長板的移植物。